방법 논문

엔트로피 방법과 결합된 Box-Behnken 디자인을 기반으로 한 Highland Barley Wine을 사용한 Tiebangchui 가공 최적화

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DOI:

10.3791/65154

2023년 5월 19일

이 논문에서

요약

본 프로토콜은 엔트로피 방법과 결합된 Box-Behnken 설계 응답 표면을 기반으로 고지대 보리 와인으로 처리된 Tiebangchui의 가공 기술을 최적화하기 위한 효율적인 방법을 설명합니다.

초록

독성 민족 의약품의 가공은 안전한 임상 적용을 위해 매우 중요합니다. 따라서 전통적인 가공의 한계를 해결하고 민족 의약품의 가공 방법을 현대 연구 방법을 사용하여 표준화해야합니다. 본 연구에서는 고지대 보리 와인으로 가공한 Aconitum pendulum Busch의 말린 뿌리인 일반적으로 사용되는 티베트 약재인 Tiebangchui(TBC)의 가공 기술을 최적화하였다. 디에스테르-디테르페노이드 알칼로이드(DDA)(아코니틴, 3-데옥시아코니틴, 3-아세틸아코니틴)와 모노에스테르-디테르페노이드 알칼로이드(MDA)(벤조일라코닌) 함량을 평가 지표로 사용하였으며, 각 평가 지수의 가중치 계수는 엔트로피법으로 결정하였다.

단일 요인 테스트와 Box-Behnken 설계는 고지대 보리 와인과 TBC 간의 비율, TBC의 슬라이스 두께 및 처리 시간의 영향을 조사하는 데 사용되었습니다. 엔트로피 방법에 의해 결정된 각 지수의 객관적인 가중치에 따라 종합 채점을 수행하였다. 고지대 보리 와인을 사용한 TBC의 최적 가공 조건은 다음과 같습니다 : 고지대 보리 와인의 양은 TBC의 5 배, 담금 시간은 24 시간, TBC 두께는 1.5cm입니다. 그 결과 검증 테스트와 예측 값 사이의 상대 표준 편차가 2.55 % 미만이었고 고지대 보리 와인으로 가공 된 TBC의 최적화 된 가공 기술은 간단하고 실현 가능하며 안정적이어서 산업 생산에 대한 참고 자료를 제공 할 수 있습니다.

서론

Aconitum pendulum Busch의 말린 뿌리인 Tiebangchui(TBC)는 잘 알려진 티베트 의학이며 처음에는 고전 티베트 의학 서적 "Four Medical Tantra"1,2에 기록되었습니다. "중화 인민 공화국 보건부 의약품 기준 (티베트 의학)"에 따르면 TBC는 감기 퇴치, 통증 완화, 바람 완화 및 충격 진정에 효과적이며 일반적으로 클리닉에서 류마티스 관절염 치료에 사용됩니다 3,4,5.

TBC는 주로 독성이 강한 디에스테르-디테르페노이드 알칼로이드(DDA)와 중간 정도의 독성이 있는 모노에스테르-디테르페노이드 알칼로이드(MDA)를 포함한 알칼로이드를 함유하고 있습니다.6,7,8. 이러한 화학 성분은 약효가 있는 활성 성분이지만 독성이 있습니다. 가장 유명한 활성 및 ....

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프로토콜

본 연구에서는 고지대 보리 와인으로 가공된 TBC의 가공 기술을 엔트로피 방법과 결합된 Box-Behnken 설계로 최적화하였다. DDA와 MDA 함량을 평가 지표로 사용하였으며, 각 평가 지수의 가중치 계수는 엔트로피 방식으로 결정하였다.

1. 실험 준비

  1. 고원 보리 와인을 준비하십시오15.
    1. 검은 고원 보리 쌀 500.00g을 취해 물의 5 배를 더한다. 남은 물이 흡수될 때까지(~2시간) 밥을 짓습니다. 그것을 붓고 온도가 37 °C로 떨어질 때까지 기다렸다가 Jiuqu 4g ( 재료 표 참조)을 넣고 잘 섞은 다음 캔을 밀봉하고 용기를 면봉으로 싸서 7 일 동안 끓입니다.
    2. 7일째 되는 날에 물 300mL를 넣고 다시 밀봉한다. 8일째 되는 날부터 와인을 꺼내기 시작하고 그 후 물 300mL로 교체합니다. 밀봉하여 1 일 동안 발효시킨 후 와인을 마시고 다시 물 300mL를 넣으십시오. 이 과정을 세 번 반복하고 주류를 결합하십시오.
    3. 끓으면 불을 약불로 줄이고 남은 물이 흡수될 때까지 계속 끓인다.
  2. 가공 제품을 준비하려면 용기에 T....

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결과

이 연구에서 TBC의 정밀도, 안정성, 반복성 및 샘플 회수율은 이 방법이 실현 가능하다는 것을 나타냅니다. TBC의 4가지 지수 성분은 특정 농도 범위 내에서 양호한 선형 관계를 가졌다. 일반적인 크로마토그램은 그림 1에 나와 있습니다. 정밀도 시험 결과(표 8)는 피크 면적의 상대 표준편차(RSD)가 벤조일라코닌, 아코니틴, 3-데옥시아코니틴에 대해 각각 2.56%, 1.49%, 2.03%, 3-아세틸아코니틴에 대해 0.21%로 나타났으며, 이는 기기의 정밀도가 양호함을 나타냅니다. 24시간 동안 수행된 안정성 연구(n = 6)는 벤조일라코닌, 아코니틴, 3-데옥시아코니틴 및 3-아세틸아코니틴에 대해 각각 2.76%, 2.21%, 2.98% 및 2.31%의 상대 표준 편차 값을 나타내었으며(표 9), 이는 샘플 용액이 24시간 동안 안정적임을 시사합니다. 반복성 시험 결과(표 10).......

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토론

일반적으로 사용되는 독성 효과가 있는 티베트 의약품으로서, 가공의 독성 감쇠 효과는 TBC의 임상 적용에 매우 중요하다25. 본 연구에서는 고지대 보리 와인으로 가공된 TBC의 가공 기술을 최적화하였다. 주요활성성분을 검토하고 TBC의 약리학적 효과를 관련시킴으로써, TBC 알칼로이드가 항염 및 진통 효과가 있으며 류마티스 관절염 치료에 사용될 수 있음을 발견하였다. 이 연구에서는 중간 정도의 독성 MDA가 양성 지표로 사용되었습니다. DDA의 총 함량은 부정적인 지표로 사용되었습니다. 엔트로피 방법은 인덱스 가중치를 계산하고 처리 기술을 최적화하는데 사용되었다(26).

실험 중에 특히 두 가지 점에 유의해야합니다. 첫째, 후속 결과의 정확도를 향상시키기 위해 단일 요인의 각 조건에 대해 세 가지 병렬 실험 세트가 필요합니다. 둘째, 종합 점수 계산에서 각 지표의 표준화 된 값에 원시 데이터 대.......

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공개 사항

저자는 공개할 이해 상충이 없습니다.

감사의 글

이 연구는 중국 국립 자연 과학 재단 (No. 82130113), 중국 박사후 과학 재단 (No. 2021MD703800), 쓰촨성 과학 기술부 청소년 과학 재단 (No. 2022NSFSC1449) 및 청두 중국 전통 의학 대학의 "Xinglin Scholars"연구 진흥 프로그램 (No. BSH2021009).

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
AconitineChengdu Push Biotechnology Co., LtdPS000905
3-AcetylaconitineChengdu Push Biotechnology Co., LtdPS010552
3-DeoxyaconitineChengdu Push Biotechnology Co., LtdPS011258
BenzoylaconineChengdu Push Biotechnology Co., LtdPS010300
순환수 진공 펌프Gongyi City Yuhua Instrument Co., LtdSHZ-DIII
디자인 전문가 State-East Corporation8.0.6
전기 항온 건조 오븐Shanghai Yuejin Medical Equipment Co., Ltd101-3-BS
전자 분석 저울Shanghai Liangping Instruments Co., Ltd.FA1004
고성능 액체 크로마토 그래피Shimadzu Enterprise Management (China) Co., Ltdshimadzu 2030
고원 보리 쌀Kangding City, Ganzi Tibetan Autonomous Prefecture, Sichuan Province20221015
Millipore filterTianjin Jinteng Experimental Equipment Co., Ltdφ 13 0.22 Nylon66
회전 증발기Shanghai Yarong Biochemical Instrument FactoryRE-2000A
주류 제조Angel Yeast CO., LtdBJ22-104
초순수 전신Merck Millipore Ltd.Milli-Q
초음파 세척 기계닝보 Xinyi 초음파 장비 Co., LtdSB-8200 DTS

참고문헌

  1. Zhang, J., et al. Study of quality standards for Aconitum pendulum Busch. Chinese Traditional Patent Medicine. 40 (9), 2100-2103 (2018).
  2. Liu, X. F., et al.

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재인쇄 및 허가

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