여기에서는 동물 유래 의약품에서 트리메틸아민(TMA) 측정에 적합한 헤드스페이스 가스 크로마토그래피-탠덤 사중극자 질량분석법(HS-GC-MS/MS) 방법을 설명합니다. 이 프로토콜에는 샘플 전처리, 헤드스페이스 처리, 분석 조건, 방법론적 검증 및 동물 유래 의약품의 TMA 측정이 포함됩니다.
방법 논문
여기에서는 동물 유래 의약품에서 트리메틸아민(TMA) 측정에 적합한 헤드스페이스 가스 크로마토그래피-탠덤 사중극자 질량분석법(HS-GC-MS/MS) 방법을 설명합니다. 이 프로토콜에는 샘플 전처리, 헤드스페이스 처리, 분석 조건, 방법론적 검증 및 동물 유래 의약품의 TMA 측정이 포함됩니다.
동물 유래 의약품은 특유의 특성과 상당한 치료 효과를 가지고 있지만 대부분 명백한 비린내이가 있어 임상 환자의 순응도가 낮습니다. 트리메틸아민(TMA)은 동물 유래 의약품의 주요 비린내 성분 중 하나입니다. 잿물 첨가 후 급격한 산-염기 반응으로 인한 헤드스페이스 바이알의 압력 증가로 인해 TMA가 헤드스페이스 바이알에서 빠져나가 동물유래 의약품의 비린내에 대한 연구 진행이 지연되어 기존 검출 방법으로는 TMA를 정확하게 식별하기 어렵습니다. 본 연구에서는 산과 잿물 사이의 격리층으로 파라핀층을 도입한 제어된 검출 방법을 제안하였다. TMA 생산 속도는 자동 온도 조절 용광로 가열을 통해 파라핀 층을 천천히 액화시킴으로써 효과적으로 제어 할 수 있습니다. 이 방법은 우수한 재현성과 높은 감도로 만족스러운 선형성, 정밀 실험 및 회수율을 보여주었습니다. 동물 유래 의약품의 탈취에 대한 기술 지원을 제공했습니다.
동물 부위 및/또는 그 부산물에서 추출한 제품(여기서는 동물 유래 의약품이라고 함)을 활용하여 인간의 질병을 치료하는 것이 점점 더 주목받고 있습니다. 암, 심혈관 질환, 간경변, 유방염 및 기타 질병을 치료하는 데 중요한 역할을 하며 강력한 효과, 소량, 중요하고 구체적인 임상 효능의 장점이 있습니다. 그러나 동물성 의약품은 일반적으로 비린내가 두드러져 환자의 순응도에 큰 영향을 미치며 특히 어린이 1,2에게 불리합니다. 비린내는 주로 약에 함유된 단백질, 아미노산, 지방 및 기타 물질에서 비롯되며, 지방산 산화, 아미노산 분해 및 기타 비린내를 가진 다양한 물질을 생성하는 기타 방법을 통해 분해됩니다 2,3,4. 그 중 트리메틸아민(TMA)은 썩거나 썩은 동물 유래 식품에 널리 존재하는 비린내를 동반한 휘발성 가스이다5.
지금까지, 가스 크로마토그래피 (GC), 액체 크로마토 그래피 (LC), 이온 크로마토 그래피, 분광 광도법....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
Pheretima, Periplaneta americana 및 Hirudo의 의약 재료에 대한 정보는 표 1을 참조하십시오. 그들은 청두 중국 전통 의학 대학의 Xu Runchun 교수에 의해 Pheretima aspergillum (E.Perrier), Periplaneta americana L. 및 Whitmania pigra Whitman의 건조 된 시체로 확인되었습니다.
1. 검체 추출
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
이 프로토콜의 전처리 원리와 작동에 대한 개략도는 각각 그림 1과 그림 2에 나와 있습니다. TMA의 피크 시간은 2.3분이었고, 피크 모양이 뚜렷하고 다른 불순물의 간섭이 없었습니다(그림 3). 0.1-10 μg/mL TMA 표준용액의 선형 범위를 측정하고, TMA 농도를 가로좌표로, 피크 면적을 세로좌표로 하여 표준 곡선을 그렸습니다. 선형 회귀 방정식은 y = 2522482x + 24255로 얻었으며 상관 계수 (R2) = 0.9998로 양호한 선형 관계를 나타냅니다. LOD와 LOQ는 각각 S/N=3, S/N=10으로 계산되었습니다. LOD는 0.03mg/kg이었고 LOQ는 0.11mg/kg이었습니다. 이 방법의 정밀도를 조사하기 위해 TMA(0.1μg/mL)의 함량을 5.84%의 상대 표준 편차(RSD)와 병렬로 6번 측정하여.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
동물 유래 의약품은 전신, 장기 또는 조직, 생리학적 또는 병리학적 산물, 배설물 또는 분비물, 동물의 가공 제품에서 유래합니다. TMA는 동물성 의약품에서 비린내를 유발하는 중요한 원인입니다. 후각 역치가 매우 낮고(0.000032 × 10-6 V/V) 강한 비린내를 풍기는 전형적인 악취 물질이다13. 현재 일반적으로 사용되는 HS-GC-MS 방법은 동물 유래 의약품에서 TMA를 안정적이고 정확하게 검출할 수 없습니다.
이 프로토콜은 여러 측면에서 개선된다: (1) TMA는 더 극성이고 알칼리성이다. 이 프로토콜에서는 TMA 검출을 위해 휘발성 아민 가스 크로마토그래피를 위한 특수 컬럼을 선택하여 TMA 검출의 정확성과 감도를 보장합니다. (2) 샘플 GB5009.179-2016의 HC-GC-MS 방법의 준비 과정에서 고농도 수산화나트륨 용액을 밀봉된 헤드스페이스 바이알10.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
저자는 공개 할 것이 없습니다.
이 작업은 중국 국립 자연 과학 재단(82173991)과 쓰촨 과학 기술 프로그램(2022YFS0442)의 보조금으로 지원되었습니다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 원심 분리기 | Beckman Coulter Trading (China) Co. | SSC-2-0213 | |
| 한약 분쇄기 | Zhejiang Yongkang Xi'an 하드웨어 및 제약 공장 | HX-200K | |
| 대류 오븐 | Sanyo Electric Co., Ltd | MOV-112F | |
| 20mm 알루미늄 캡용 디캡퍼 | ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc | V1750004 | |
| 전자 저울 | Shimadzu Corporation 일본 | ||
| 가스 크로마토 그래피 질량 분석기 | Shimadzu Corporation 일본 | TQ-8050 NX | |
| 헤드 스페이스 바이알 | ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc | 25760200 | |
| 균질화 기 | 상하이 biaomo 공장 | FJ200-SH | |
| 사전 조립 캡 | ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc | L4150050 | |
| 샘플 체 | Zhenxing Sieve Factory | / | |
| SH-Volatile Amine | Chengdu Meimelte Technology Co., Ltd | 227-3626-01 | |
| 수산화나트륨 | Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd | 2022101401 | |
| 고체 파라핀 왁스 | Shanghai Hualing Kangfu 장치 공장 | 20221112 | |
| 트리클로로아세트산 | Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd | ||
| 트리메틸 아민 염산염 | Chengdu Aifa Biotechnology Co., Ltd | AF22022108 | |
| 초순수 시스템 | 쓰촨성 Youpu Ultrapure Technology Co., Ltd | UPR-11-5T |
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
이 JoVE 논문의 텍스트 또는 그림 재사용 허가 요청
허가 요청An erratum was issued for: An Improved Technique for Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace Gas Chromatography-Tandem Quadrupole Mass Spectrometry. The Authors section was updated from:
Hui Ye1
Xuemei Liu1
Haozhou Huang2
Lin Huang1
Yang Bao1
Hongyan Ma1
Junzhi Lin3
Xiaoming Bao4
Dingkun Zhang1
Runchun Xu1
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, Pharmacy School, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
2Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
3TCM Regulating Metabolic Diseases Key Laboratory of Sichuan Province, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
4Shimadzu (China) Co., Ltd
to:
Hui Ye1
Xuemei Liu1
JiaBao Liao2
Haozhou Huang3
Lin Huang1
Yang Bao1
Hongyan Ma1
Junzhi Lin4
Xiaoming Bao5
Dingkun Zhang1
Runchun Xu1
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, Pharmacy School, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
2China Resources Sanjiu Modern Chinese Medicine Pharmaceutical Co., Ltd
3Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
4TCM Regulating Metabolic Diseases Key Laboratory of Sichuan Province, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
5Shimadzu (China) Co., Ltd