사회적 위협-안전 테스트는 혐오적 조건 학습 및 사회적 위협-안전 차별 능력의 측정으로서 사회적 회피 발달을 동시에 평가할 수 있으며, 둘 다 만성적으로 사회적으로 패배한 수컷 쥐의 단일 그룹 내에서 스트레스에 취약하고 스트레스 탄력적인 개인을 식별하는 데 사용됩니다.
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이 논문에서
요약
초록
사회적 스트레스는 정신 장애 발병의 주요 원인이다. 전임상 연구의 중개 가치를 높이려면 사회적 스트레스 경험과 마우스에 대한 행동 영향이 인간과 비슷해야 합니다. 만성 사회적 패배(CSD)는 신체적 공격과 감각적 위협을 수반하는 일종의 사회적 스트레스를 활용하여 인간의 정서 장애와 유사한 정신 기능 장애를 유발합니다. CSD의 심리사회적 요소를 강화하기 위해 10일 CSD 프로토콜을 적용했는데, 이 프로토콜은 매일의 신체적 공격을 3번의 10초 에피소드로 표준화한 후 24시간 감각 단계를 수행했습니다. 10번째 감각 단계 후, CSD 프로토콜은 사회적 위협-안전 테스트(STST)라고 하는 정교한 행동 분석이 뒤따릅니다. 스트레스 후 행동 분석은 사회적 스트레스 요인이 행동에 어떻게 그리고 어느 정도 영향을 미쳤는지 결정해야 합니다. STST는 만성적으로 사회적으로 패배한 수컷 마우스가 2개의 새로운 수컷 개체(사회적 표적)와 상호 작용할 수 있도록 합니다: 하나는 CSD 기간 동안 발생한 공격 균주의 사회적 표적이고 다른 하나는 새로운 균주의 사회적 표적입니다. 둘 다 3개의 챔버가 있는 테스트 경기장의 다른 구획에서 동시에 제공됩니다. 이 테스트를 통해 사회적 회피 발달을 동시에 평가하여 성공적인 혐오 조건 학습과 사회적 위협-안전 차별 능력을 측정할 수 있습니다. 두 균주에 대한 사회적 회피의 발달은 일반화된 혐오 반응을 반영하며, 따라서 스트레스 감수성의 측정을 반영합니다. 한편, 공격하는 변종에 대한 사회적 회피의 발달은 위협-안전 차별을 반영하며, 따라서 스트레스 회복력의 척도이다. 마지막으로, 공격하는 변종에 대한 사회적 회피의 부재는 손상된 혐오적 조건학습을 반영한다. 이 프로토콜은 만성적으로 사회적으로 패배한 동물의 단일 그룹을 회복력과 감수성 하위 그룹으로 분류하기 위해 번역 기준, 특히 위협-안전 차별 및 혐오적 반응 일반화를 포함하여 현재 사용되는 스트레스 감수성/회복력 마우스 모델을 개선하여 궁극적으로 미래의 번역 접근 방식을 발전시키는 것을 목표로 합니다.
서론
스트레스는 신체적 또는 심리적 자극에 의해 야기되는 항상성의 붕괴로 정의된다1. 스트레스는 외상 후 스트레스 장애, 우울증 및 불안과 같은 정신 장애 발병의 주요 위험 요인으로 잘 알려져 있습니다 2,3. 특히 사회적 스트레스는 스트레스 관련 정신질환 발병의 주요 위험인자로 꼽힌다4. 연구에서 특히 중요시되고 있는 사회적 스트레스의 한 유형은 사회적 종속 스트레스(social subordination stress)5이다. 생쥐는 인간과 마찬가지로 다양한사회적 행동6을 할 수 있어 사회적 스트레스와 관련된 연구에 적합하다. 실험실 환경에서 성인 쥐가 집단 수용 될 때, 그들은 랭크7의 형성과 관련된 사회 구조를 확립합니다. 따라서, 콜로니 모델은 생쥐의 혼성 집단에서 자연적으로 확립된 사회적 위계의 효과를 연구하기 위해 고안되었다8. 수년에 걸쳐 사회적 종속 스트레스를 활용하기 위해 동성 그룹 모델, 사회적 불안정 모델 및 침입자-식민지....
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프로토콜
모든 절차는 실험 절차를 위한 동물의 관리 및 사용에 관한 유럽 공동체 이사회 지침에 따라 수행되었으며 지역 당국(Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz)의 승인을 받았습니다. 그림 1 은 도식 타임라인을 나타냅니다.
1. 시술
- 관심 동물: 생후 7주에 C57BL6/J 수컷 마우스를 확보하고, 도착 시 12시간 연한 주기(점등: 8:00, 소등: 20:00, 23°C, 습도 38%)로 온도 및 습도 조절 시설의 단독주택에서 음식과 물을 즉시 섭취합니다.
- 만성적인 사회적 패배(CSD)
- 치료군
- 1주일 동안 습관화한 후, CD-1 균주를 레지던트 균주로 사용하여 10일 연속으로 CSD 치료를 시행한다(자세한 프로토콜은 만성 사회적 패배 치료9 및 수정된 만성 사회적 패배 치료10 참조).
- C57BL6/J 마우스를 CD-1 마우스의 케이지에 넣고 10초의 물리적 공격을 계산합니다. 각각 다른 CD-1 마우스를 사용하여 이 에피소드를 세 번 반복하고 에피소드 간 간격을 15....
- 치료군
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결과
혐오적 조건 반응의 척도로서의 사회적 상호 작용 지수
사회적 상호 작용 지수 ≥1은 빈 메쉬 인클로저의 탐색과 비교하여 각 사회적 대상과의 더 큰 사회적 상호 작용을 반영합니다. 특정 균주의 특성화 형질에 대한 식욕 또는 혐오 경험이 없는 것으로 정의된 기준선 조건(여기서는 대조군에 대한 사회적 목표와 치료 그룹에 대한 129/Sv 사회적 목표 모두)에서 온전한 사교성 수준은 동일한 균주를 가진 사회적 상호 작용 지수≥1)에 반영됩니다. 한편, 특정 균주(여기서는 거주자의 균주, 즉 CD-1 균주)를 사용한 사회적으로 혐오적인 조건화 경험(여기서는 CSD 치료)에 이어 그 특성이 조건 자극으로 작용하는 특성과 함께, 올바른 혐오적 조건 반응의 측정으로서의 사회적 회피 발달은 동일한 균주를 가진 사회적 상호작용 지수<1)에 반영됩니다. CSD 스트레스 효과는 전체 치료 그룹 수준에서 가장 먼저 평가됩니다(프로토콜의 3.6단계 참조). 구체적으로, 스트레스 효과는 CD-1 균주에 대한 사회적.......
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토론
여기에서 행동 프로토콜은 CSD 치료 후 단일 그룹을 세 개의 다른 하위 그룹으로 나누는 데 사용되는 사회적 위협-안전 테스트를 설명하며, 스트레스 감수성 및 회복력의 기본 생물학을 조사하고 잠재적인 치료법을 테스트하는 방법 역할을 합니다. 철저한 실험 설계를 안내하기 위해 생물학적 맥락과 기술적 세부 사항을 신중하게 고려해야 합니다.
다양한 주거 환경에 따라 공격성 사교성 수준이 달라질 수 있으며, 이는 치료 후 검사에서 얻은 결과에 영향을 미칠 수 있습니다28,29,30. 이러한 조건에는 도착 시 및 치료 후 테스트 24시간 전에 모든 동물을 단일 수용하는 것과 치료 10일 동안 대조군을 단일 수용하는 것이 포함됩니다. 더욱이, CSD 스트레스 효과는 대조군이 우발적으로 스트레스를 받는 경우 손상될 수 있습니다.......
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공개 사항
저자는 공개할 것이 없습니다.
감사의 글
이 연구는 독일 국립 연구 재단(SFB1193, 회복력 신경생물학)과 베링거 인겔하임 재단(라이프니츠 회복력 연구 및 개별 표현형 및 고해상도 자동 행동 분석 연구소 보조금)이 자금을 지원하는 공동 연구 센터 1193, 하위 프로젝트 Z02의 지원을 받습니다. 기술적인 도움을 주신 Dr. Konstantin Radyushkin과 Mrs. Sandra Reichel, 그리고 영어 지원을 해주신 Mrs. Hanna Kim에게 감사드립니다. 자금 출처는 모델 설계에 관여하지 않았습니다. 데이터 수집, 분석 및 해석; 의정서 작성; 그리고 출판을 위해 프로토콜을 제출하기로 결정했습니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Arenas | Noldus, Sociability cage, Wageningen, 네덜란드 | https://www.noldus.com/applications/sociability-cage | 총 크기가 60cm x 40cm인 3개의 방이 있는 직사각형 모양, 투명 벽과 매끄러운 바닥으로 제작 |
| 비디오 녹화용 카메라 | Basler AG, 독일 An der Strusbek 60-62 22926 Ahrensburg | ace Classic acA1300-60gc | 자동 감지 프로그램을 사용하는 경우, 카메라가 호환되는지 확인하십시오 |
| 카메라 목표 | KOWA Kowa Optimed Deutschland GmbH Fichtenstr. 123 40233 뒤셀도르프: LMVZ4411 | 1/1.8" 4.4~11mm Varifokal Objektiv | 부품 번호 10504 | |
| 감지 프로그램/타이머 | Noldus, EthoVision-XT, Wageningen, 네덜란드 | https://www.noldus.com/ethovision-xt | 감지는 수동(타이머 또는 수동 채점 소프트웨어를 사용) 또는 자동으로 이루어질 수 있습니다 |
| . 케이지 하우징 | ZOONLAB GmbH, Hermannstraß e 6, 44579 Castrop-Rauxel | 3010010 | Type 2 케이지: 265 mm x 205 mm x 140 mm (l x w x h) 즉, 360 cm² 하단 영역. 폴리 카보네이트 (Makrolone©) 및 폴리 설폰으로 제작되었습니다. 뚜껑은 스테인리스 스틸로 만들어졌습니다. 최대 5마리의 마우스를 위한 유럽 표준 케이지 (20– 25g). 최대 134 °까지 오토클레이브 가능; C |
| 메쉬 인클로저 | 아레나 패키지의 일부 : Noldus, Sociability cage, Wageningen, 네덜란드 | https://www.noldus.com/applications/sociability-cage | 직경 100mm, 높이 200mm의 작은 아크릴 또는 금속 케이지 모양으로 10mm 크기의 개구부가 있습니다. 경기장당 2개의 메쉬 인클로저가 작동하지만 4개가 더 좋습니다(프로토콜의 포인트 2.5 참조) |
| 메쉬 벽 | 자체 제작 | N/A | 아크릴 또는 금속, 각 케이지에 하나씩. 크기는 사용하는 케이지에 따라 다릅니다. 벽은 두 동물이 신체 접촉을 할 수 없도록해야합니다 |
| 사회적 목표 : 균주 CD-1 및 129 / Sv의 마우스; 은퇴 한 남성 육종가 | Charles River에서 제공 한 생쥐 : 균주 이름 : CD-1 ® IGS 마우스 129S2/SvPasCrl | Crl:CD1(ICR); 129S2/SvPasCrl | CD-1 및 129/Sv 은퇴한 수컷 사육자, 단독 주택, 관심 동물에 대한 새로운 (알 수 없음) 동종. 은퇴 한 수컷 육종가를 사용할 수 없다면 두 균주에서 1 년 이상 된 수컷으로 충분합니다 |
참고문헌
- Hyman, S. E. How mice cope with stressful social situations. Cell. 131 (2), 232-234 (2007).
- Kessler, R. C. The effects of stressful life events on depression. Annual Review of Psychology. 48 (1), 191-214 (1997).
- Vos, T., et al.
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