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방법 논문

Double Antibody Sandwich Detection 기술을 기반으로 Helicobacter pylori 감염의 대변 항원을 신속하게 검출

1.7K 조회수

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DOI:

10.3791/68219

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2025년 5월 23일

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* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

본 연구에서는 헬리코박터 파일로리균에 감염된 대변 항원을 신속하게 검출할 수 있도록 이중 항체를 기반으로 한 샌드위치 검출 기법을 개발하였다.

초록

헬리코박터 파일로리는 위 점막에 기생할 수 있으며, 이는 감염 후 일련의 위장 질환을 유발할 수 있으며 위염, 위궤양 및 위암과 밀접한 관련이 있습니다. 의료 인프라가 열악하고 위생 시설이 불충분한 지역에서 헬리코박터 파일로리 감염의 높은 유병률은 여전히 중요한 공중 보건 문제로 남아 있습니다. 따라서 자원이 제한된 환경에서 H. pylori 검출을 위한 빠르고 간단하며 비용 효율적인 스크리닝 방법을 개발하는 것이 가장 중요합니다.

이 연구에서는 광둥(廣東)성 시탄(Shitan) 마을에서 지역사회 기반 검진을 실시했는데, 이 지역은 일반적으로 교육 수준이 낮고 약 300명의 거주자가 거주하는 외딴 저개발 지역이다. 우리는 H. pylori 분변 항원의 검출을 위해 이중 항체 샌드위치 분석을 사용했으며, 이는 자원이 부족한 환경에서 잠재적으로 적용할 수 있기 위해 선택된 방법입니다. 마을에서 총 261명의 참가자가 등록되었으며 이 기술을 사용하여 그들의 배설물 샘플을 분석했습니다. 비교 검증을 위해 동일한 샘플에 대해 정량적 중합효소연쇄반응(qPCR) 분석을 실시했습니다. qPCR 결과와 비교했을 때, 대변 내 헬리코박터 파일로리 항원 검출의 민감도와 특이도는 각각 60.24%와 80.08%였다. 그 결과 분변 항원 검출 방법과 qPCR(Kappa = 0.630) 간에 강력한 일치가 있음을 보여주었습니다.본 연구는 헬리코박터 파일로리 감염에 대한 분변항원 검출의 원리, 절차, 방법론 및 임상적 응용을 체계적으로 규명하고, 라텍스 기반 이중항체 샌드위치 기술을 탐구하고, 이를 보조진단하기 위한 새로운 전략과 실천 지침을 수립하는 것을 목표로 하였다.

서론

헬리코박터 파일로리균(H. pylori, Hp)은 미호기성, 나선형 모양의 그람 음성 박테리아1입니다. 인간의 위를 식민지화하고 만성적으로 감염시키는 능력으로 인해 이 병원체는 위 선암종 발병의 주요 병인학적 요인으로 확인되었습니다 3,4. 2015년 한 해 동안 전 세계에서 ~44억 명의 사람들이 헬리코박터 파일로리 감염으로 고통받았다5. 헬리코박터 파일로리 감염의 유병률은 상당한 지리적 편차를 보이며, 개발도상국은 선진국에 비해 감염률이 현저히 높습니다. 특히 저소득 국가와 특정 취약 인구 집단의 감염률은 75%6에 달할 수 있습니다.

위내시경 검사와 같은 전통적인 검출 방법은 정확하지만, 침습성, 높은 비용 및 낮은 환자 수용성으로 인해 대규모 선별 검사 및 일상적인 추적 관찰에 적용하는 데 한계가 있습니다7<....

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프로토콜

이 단면 연구는 광둥성 인민병원 윤리위원회(승인 번호: KY2024-445-01)의 승인을 받았으며 모든 연구 대상자의 개인 데이터는 연구 기간 동안 엄격하게 기밀로 유지되었습니다. 모든 참가자는 실험 전에 서면 동의서에 서명했습니다. 2024년 광둥성 칭위안시 시탄촌 주민들을 연구 대상으로 선정했으며, 연령과 성별에 대한 제한은 없었다. 아래에 설명된 이중 항체 샌드위치 분석(정성적 실험)은 지침에 따라 전문 의료 및 기술 인력에 의해 수행되었습니다. 이 연구를 위해 마을의 전체 영구 인구는 건강하거나 증상이 있는지 또는 위장 질환과 관련된 기존 질병이 있는지 여부에 관계없이 선택되었습니다.

1. 환자 선택

  1. 지난 1개월 동안 양성자 펌프 억제제 또는 비스무트, H2 수용체 차단제 또는 항생제를 사용한 적이 있는 환자는 제외합니다.
  2. 모든 참가자에게 익명으로 설문지를 작성하도록 요청합니다. 설문지의 내용은 5개의 질문으로 구성되어 있습니다: 세 끼를 규칙적으로 먹습니까? 술을 마시나요? 헬리코박터 파일로리균에 대해 알고 계신가요? H. pylori 검사를 수행해야 ....

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결과

설문지 설문조사
4세에서 99세 사이의 연령을 가진 여성 144명과 남성 117명으로 구성된 총 261명의 참가자가 연구에 등록되었습니다. 피험자의 평균 연령은 48.30세± 17.61세였다. 미성년자(0-17세) 17명, 성인 202명(18-64세), 노인 42명(>64세)이 참가자였다. 설문지 결과는 표 1에 나와 있습니다. 피험자의 대다수(90.8%)는 헬리코박터 파일로리 선별 검사가 필요하다고 생각했습니다.

이 마을의 분변 H. pylori 항원 검출 검사 결과
분변 헬리코박터 파일로리 항원 검사를 받은 261명의 참가자 중 52명(19.92%)은 양성, 209명은 음성이었다. 양성 판정을 받은 52명 중 여성이 32명으로 전체 여성 참가자의 22.22%를 차.......

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토론

헬리코박터 파일로리균은 전 세계적으로 가장 널리 퍼져 있는 세균 감염 중 하나이다15. 설문지 결과에 따르면 인구의 55.2%는 헬리코박터 파일로리균에 대한 인식이 부족한 반면, 90.8%는 헬리코박터 파일로리 선별 검사가 필요하다고 답했다. 이러한 결과는 경제적으로 취약한 외딴 지역에서 헬리코박터 파일로리 선별 프로그램을 시행하는 것의 중요성을 강조한다16. 요소호흡검사(UBT)는 일반적인 진단법이지만, 비용이 많이 들고 어린이와 임산부에게 적합하지 않아 적용이 제한된다17,18. 혈청 H. 파일로리 항체 검사는 환자의 혈청19에서 항체를 검출할 수 있습니다.......

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공개 사항

저자는 선언할 이해 상충이 없습니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
DNA 추출 키트장쑤성 두더지 생명 공학 유한 회사20230223없음
H. pylori 분변 항원 검출 키트항저우 nuohui 건강 기술 유한 회사20213401126없음
H. pylori 핵산 검출 키트장쑤성 두더지 생명 공학 유한 회사20230226없음
실시간 형광 정량 PCR상하이 홍시 의료 기술 유한 회사20183221659없음
통계 제품 및 서비스 솔루션IBM 회사없음없음

참고문헌

  1. Ali, A., AlHussaini, K. I. Helicobacter pylori: A contemporary perspective on pathogenesis, diagnosis and treatment strategies. Microorganisms. 12 (1), 222(2024).
  2. Kusters, J. G., van Vliet, A. H., Kuipers, E. J. Pathogenesis of Helicobacter pylori infection.

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재인쇄 및 허가

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