쥐의 심근 허혈-재관류 손상 모델링을 위한 최소 침습 이중 라이브 매듭 기술

요약

여기에서는 좌전하행 관상동맥(LAD) 표적 이중 활성 매듭 코일 결찰술에 의해 심근 허혈-재관류 손상을 유도하는 계획을 제안하며, 이는 2차 개흉술 없이 필요에 따라 재관류를 위해 시험관 내에서 방출될 수 있으며 최소 침습적입니다.

초록

심근 허혈-재관류 손상(MI/RI) 모델은 심근경색의 병태생리학적 기전을 탐색하고 관련 약물 개발을 촉진하는 데 큰 의미가 있습니다. 그러나 일반적으로 사용되는 모델링 방법 중 전통적인 폴리에틸렌 튜브 보조 관상동맥 결찰 방법에는 상당한 단점이 있습니다. 결찰을 풀기 위해 가슴을 다시 열어야 하는데, 이는 시간이 많이 걸릴 뿐만 아니라 실험 동물에게 상당한 손상을 입히고 쉽게 사망에 이를 수 있습니다. 본 연구의 목적은 개선된 모델 준비 방법을 도입하는 것이다. 이 방법에서는 좌전하행관상동맥(LAD)을 이중 라이브 매듭 코일을 사용하여 결찰하고 시험 관 내에서 라이브 매듭을 열어 재관류를 달성할 수 있으므로 두 번째 침습적 절차를 피할 수 있습니다. 심전도(ECG) 모니터링, M-모드 심초음파(ME) 측정, Evans Blue 및 2,3,5-트리페나이트-트라졸륨클로라이드 염색(EB-TTC)과 같은 평가 방법은 이 방법이 안정적인 MI/RI를 유도할 수 있음을 보여주었습니다. 이 개선된 MI/RI 모델 체계는 단순성과 속도가 특징이며 모델링 성공률은 매우 만족스럽습니다. 전반적으로 MI/RI 연구 분야에 종사하는 연구자들에게 실용적이고 가치 있는 지침을 제공합니다.

서론

세계보건기구(WHO)에 따르면 관상 동맥 심장 질환은 높은 발병률, 높은 사망률, 높은 합병증 발생률을 특징으로 하는 심혈관 질환의 전 세계 부담에서 중요한 위치를 차지하고 있습니다. 더욱이 이 질병은 점점 더 젊어지는 추세를 보이고 있습니다. 일부 선진국의 통계에 따르면 35세에서 40세 사이의 관상 동맥 심장 질환 발병률은 지난 10년 동안 약 15%-20% 증가했습니다. 약물 혈전용해술, 중재치료, 관상동맥우회술 등의 재관류 방법은 안전하고 효과적이며 널리 사용됩니다. 그러나 혈류의 갑작스러운 회복은 종종 허혈성 심근의 구조적, 기능적 손상을 악화시켜 일련의 부작용을 야기합니다. 여기에는 심근 세포 사멸 및 괴사, 부정맥 및 수축기 기능 장애가 포함되며 궁극적으로 심근 허혈-재관류 손상(MI/RI)^1,2로 절정에 이릅니다. MI/RI 손상의 발생률은 25%-30%에 달하며 그 메커니즘은 완전히 밝혀지지 않았습니다³. 따라서 효과적인 예방 및 치료 전략을 모색하는 것은 심혈관 분야에서 해결해야 할 주요 문제가 되었습니다.

동물 모델은....

프로토콜

실험 프로토콜은 ShaanXi University of Traditional Chinese Medicine의 실험 동물 사용 및 기관 동물 관리 및 사용 위원회 지침(기록 번호: SUCML20240820006)에 따라 수행되었습니다. 모든 동물 연구 데이터는 ARRIVE(Animal Research: Reporting In Vivo Experiments) 지침에 따라 문서화되었습니다. 체중이 250g ± 20g이고 생후 6-8주인 수컷 Sprague Dawley(SD) 쥐를 이 연구에 활용했습니다. 사용된 동물, 시약 및 장비에 관한 세부 사항은 재료 표에 나열되어 있습니다.

1. 수술 전 준비

1. 1.1.단식 수행: 쥐에게 물을 자유롭게 접근할 수 있는 8시간의 단식 기간을 가합니다.
2. 교정 및 계량: 전자 저울(0.1g 정확도)을 사용하여 체중을 정확하게 측정하여 마취 용량을 계산합니다.
3. 마취 유도: 멸균 2.5mL 주사기를 사용하여 체중 100g당 0.4mL의 용량으로 복강내 주사를 통해 20% 우레탄 용액을 투여합니다. 복부 정중선 측면 1cm를 주....

결과

심전도
심전도는 쥐 심장 결찰 전부터 허혈-재관류 후 120분까지 과정 전반에 걸쳐 기록되었습니다. 심전도 변화는 그림 2A에 나와 있습니다. 허혈 동안 ST 분절은 위쪽으로 아치형 융기를 보였고 T-파는 높고 최고조에 달했습니다. 재관류 후 ST 분절의 상승은 점차 하락했습니다.

저
심근 허혈-재관류 손상 후 일반적으로 좌심실 확장이 뒤따릅니다. 대조군 및 MI/RI 모델 그룹의 M 모드 심초음파(그림 2B1,B2)에서 LVIDd 및 LVID의 눈에 띄는 증가를 관찰할 수 있습니다(그림 2B5,B6).<.......

토론

심근 허혈-재관류 손상 모델을 확립하기 위한 고전적인 방법인 관상동맥 결찰술은 심혈관 질환 연구에서 큰 의미를 갖습니다¹². 1980년대부터 Yamamoto 등이 개척한 폴리에틸렌 튜브 보조 관상동맥 결찰법은 전 세계 과학 연구 실험실에서 널리 채택되었습니다. 이 방법은 제어 가능한 결찰력, 시각화된 작동, 허혈 시간의 정확한 조절 등 여러 가지 장점을 제공합니다. 이러한 특성은 심근경색의 병리학적 메커니즘에 대한 조사를 위한 강력한 기반을 제공했으며 수많은 중요한 연구 결과를 촉진했습니다. 그럼에도 불구하고 단점이 없는 것은 아닙니다. 이 방법으로 요구되는 개흉술은 필연적으로 실험 동물의 흉강 내 구조에 심각한 손상을 일으켜 수술 후 흉막 유착을 유발합니다. 흉막 유착은 실험 동물의 호흡 기능에 영향을 미칠 뿐만 아니라 심장 및 관련 혈관의 후속 관찰을 방해합니다^{14,15<.......}

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
0.5mL 인슐린 주사기	우시 Yushou 의료 장비 Co.	https://e.tb.cn/h.6NJ9o4dBdpXt4bT?tk=YobMVflhtgI	EB를 흡수하고 대동맥궁 를 통해 주입하는 데 사용됩니다.
2,3,5-트리페나이트-트라졸륨클로라이드	상하이 Yuanye 생명공학 Co., Ltd.	S19026	심장 염색용
2.5mL 일회용 멸균 주사기	Robust Ping An Medical Technology Co., Ltd.	20231230	복강내 주사로 쥐를 마취제를 흡인하고 마취하는 데 사용됩니다. 폐흉 수술 중 쥐의 흉강에서 공기를 추출하는 데 사용됩니다.
4% 파라포름알데히드	광저우 Viggs Biotechnology Co., Ltd.	SW002	색 후 심장 고정에 사용
4-0 봉합사	Shandong Haidike Medical Products Co., Ltd.		갈비뼈, 근육 및 피부 바누기용
6-0 봉합	Jiangsu Beiyueshen Medical Device Co., Ltd.	https://e.tb.cn/h.6NKQ9XNVD1J56np?tk=R8NKVfPJIUM	LAD 의 결찰용;
침술 바늘	베이징 Luoya Shanchuan 의료 장비 Co.	https://e.tb.cn/h.6NQZzrSfBLQ9OYZ?tk=yW5aVfPuXP3	쥐 팔다리의 피부를 뚫고 심전도 전극선을 연결하는 데 사용됩니다.
동물 제모제	Jinyun New Concept Household Products Co.	https://e.tb.cn/h.6NJe67IEMgxPfUt?tk=9boIVflb6mm	제모용
제모 크림	광저우 Miyanshe 브랜드 관리 유한 회사	https://3.cn/2fP-knZw	깊은 제모용
에탄올	천진 Tianli 화학 시약 Co., Ltd.	https://e.tb.cn/h.6NnxsK8EAvBV1Zu?tk=ja1XVflVhfM	소독용
Evans Blue	Sigma	E2129	심장 염색용
지혈 겸자	상하이 보좌관 의료 기기 Co.	https://e.tb.cn/h.6NQkHWD25dxnsv4?tk=xA1VVflTXjW	인슐린 주사기를 고정하고 대동맥궁의 혈액을 멈추는 데 사용됩니다
의료용 마이크로 가위	Nanjing Ji Xiaobao Trading Co.	https://e.tb.cn/h.6NJu33PgNRJCO1L?tk=smZjVflr730	기관과 갈비뼈를 자르는 데 사용됩니다
의료용 현미경 핀셋	Nanjing Ji Xiaobao Trading Co.	https://e.tb.cn/h.6Nqn2dyJIUjUN6n?tk=MEMaVflGK0b	결찰하기 위해 6-0 봉합사 꼬집기
	Shandong Boryuida Analytical Instrument Co.	https://e.tb.cn/h.6NJyfb9CWH5Sj32?tk=HW0kVflEyOL	EB-TTC 염색 중 심장 절단용
의료용 가위	Shandong Boryuida Analytical Instrument Co.	https://e.tb.cn/h.6NJCLzckQnXXEPe?tk=CtcTVflFJQw	쥐의 피부를 자르고 봉합하는 데 사용됩니다.
의료용 수술복	허난 Meideqi 의료 장비 Co.	https://e.tb.cn/h.6NqItN9yA0xttr9?tk=cCCIVflzFjr	멸균 수술 영역을 제공하는 데 사용됩니다
의료용 테이프	Zhejiang Aotai Medical Technology Co.	https://e.tb.cn/h.6N93etxLPPlJ9ZQ?tk=DfblVflAo5d	쥐 를 수정하는 데 사용됩니다.
의료용 핀셋	Jiangsu Videocon Medical Technology Co.	https://e.tb.cn/h.6NreHXQv2YTJkIl?tk=S1imVfO17QV	쥐의 마취 정도를 판단하고, 피부, 갈비뼈 및 기타 조직을 고정하고, 피하 근육과 심낭을 벗겨내는 데 사용됩니다.
의료용 초음파 커플링 에이전트	칭다오 하이누오 생물 공학 유한 회사	https://3.cn/2fPpwB-j	초음파 전송의 효율성을 향상시키는 데 사용됩니다.
생리 식염수	산동 Qidu 제약 유한 회사	https://e.tb.cn/h.6NMCUFJIti2EsiU?tk=FXBBVfOV1iN	잔여 제모 크림 세척에 사용
휴대용 컬러 도플러 초음파	VINNO Technology Co., Ltd.	빈노 6	쥐 의 M-모드 심초음파 측정에 사용;
포비돈 요오드	산동 안제하이테크 소독 기술 유한 회사	https://e.tb.cn/h.6NqAb4WsT3xjMb9?tk=mhFxVfO4G1G	소독용
쥐 수술 플레이트	Shandong Boryuida Analytical Instrument Co.	https://e.tb.cn/h.6NQyjjGNGInF3Eu?tk=qgQwVflHilH	쥐를 수정하는 데 사용됩니다
냉동 냉장고	Zhejiang Zhixing 초저온 기술 Co.	DL-78	심장을 얼리기 위해
실리카겔 튜브	Shandong Chengwu Sano Medical Equipment Co.	https://e.tb.cn/h.6N9L82XWNGlgDDG?tk=pWzCVfOQIgN	기관 를 지지하는 데 사용됩니다.
작은 동물 인공 호흡 기계	Anhui Zhenghua Biological Equipment Co., Ltd.	DW-3000H	개흉술 후 쥐의 호흡을 돕는 데 사용됩니다
멸균 면봉	칭다오 하이누오 생물 공학 유한 회사	https://e.tb.cn/h.6NJbKVmD0b7QhTf?tk=wMceVfOTrBX	에탄올 및 포비돈 요오드 소독 침지용
멸균 면봉	Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., Ltd.	https://e.tb.cn/h.6NMAQz1252EJHSM?tk=nyfLVfOUSBi	흉강의 잔류 혈액을 청소하는 데 사용됩니다
단열 담요	광동 Zhongke 생명 과학 및 테크놀로지(주)	https://e.tb.cn/h.6N9OyBVWuSXTUDy?tk=d6OqVfOSTlI	쥐의 수술 후 신체 단열용
개흉술 견인기	동 중ke 생명 과학 및 테크놀로지(주)	https://e.tb.cn/h.6NQra4Z9UG8dnvo?tk=6eFUVfllCFW	수술 시야를 노출시키는 데 사용
유형 II 리드 심전도 모니터	Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd.	BL-420N	심전도 모니터링용
우레탄	산동 Keyuan 생화학 유한 회사	U820333	마취된 쥐 에 사용;
물 항온 발진기	Shanghai Boxun Medical Biological Instrument Co., Ltd.	SHZ-B	심장 염색용

염사 LAD 의료용 메스를 광