방법 논문

Hippophae rhamnoides subsp. sinensis와 Hippophae gyantsensis의 다당류 함량 및 항산화 활성에 관한 비교 연구

DOI:

10.3791/68855

⸱

2025년 8월 15일

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 2School of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

이 논문에서

요약

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

본 연구는 온수 추출을 통해 얻은 Hippophae rhamnoides subsp. sinensis Rousi와 Hippophae gyantsensis (Rousi) Y. S. Lian의 다당류 함량을 비교하고 페놀-황산 비색법을 통해 정량화하였다. 우리는 또한 2,2-디페닐-1-피크릴히드라질 자유 라디칼 소거 실험을 통해 이 두 Hippophae 종의 다당류의 시험관 내 항산화 활성을 조사했습니다.

초록

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 논문은 연구 가치가 큰 두 Hippophae 종, 즉 Hippophae rhamnoides subsp. sinensis Rousi 및 Hippophae gyantsensis (Rousi) YS Lian의 다당류 수율, 함량 및 항산화 활성에 대한 잘 설계되고 심층적인 비교 연구를 보고합니다. H.rhamnoides subsp. sinensis 및 H. gyantsensis 의 총 다당류는 온수 추출을 통해 얻었습니다. 수율을 비교하고, 페놀-황산 비색법을 통해 다당류 함량을 정확하게 측정하여 비교하였다. 한편, 다당류의 항산화 활성은 2,2-디페닐-1-피크릴히드라질(DPPH) 자유 라디칼 제거를 통해 평가되었습니다. 그 결과 H.rhamnoides subsp. sinensis (1.18% ± 0.02%)의 다당류 수율(원료 대비 조추출물의 비율)은 H. gyantsensis (3.12% ± 0.06%)보다 유의하게 낮았습니다(P < 0.01). H.rhamnoides subsp. sinensis (352.97±1.07 mg/g)의 다당류 함량(추출물의 순수 다당류로 정의됨)은 H. gyantsensis (300.21 ± 1.49 mg/g)보다 유의하게 높았습니다(P < 0.01). H.rhamnoides subsp. sinensis 다당류의 DPPH 자유 라디칼 소거 활성의 절반 억제 농도(0.026 ± 0.004 mg/mL)는 H. gyantsensis 다당류(0.021 ± 0.004 mg/mL)보다 약간 낮았습니다. 그러나 두 Hippophae 종 사이에는 유의미한 차이가 발견되지 않았습니다(P > 0.05). 이 실험은 H.rhamnoides subsp. sinensis 와 H. gyantsensis 사이의 다당류 수율, 함량 및 항산화 활성의 차이를 명확히 했습니다. 이 연구는 바다 갈매 나무속의 품질 평가와 다당류 활성 성분의 추가 개발을 위한 과학적 근거를 제공할 수 있습니다.

서론

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

바다 갈매 나무속은 Elaeagnaceae 계통 식물의 말린 잘 익은 과일입니다. 비장을 활성화하여 소화를 돕고, 기침을 완화하고 가래를 배출하고, 혈액 순환을 촉진하고, 혈액 정체를 소멸시키는 특성으로 인해 중국에서 일반적으로 사용되는 약용 및 식용 재료일 뿐만 아니라 인도, 러시아, 핀란드 및 기타 유럽 국가에서 건강 보조 식품 및 건강 관리 제품의 중요한 공급원입니다1. 산자나무속은 플라보노이드, 페놀 화합물, 다당류, 배당체, 유기산 등 다양한 생리 활성 성분을 함유하고 있으며 한의학에 오랫동안 적용되어 왔습니다 2,3. 일반적으로 플라보노이드는 바다 갈매 나무속의 가장 중요한 생리 활성 화합물로 간주됩니다. 그러나 최근에는 다당류도 우수한 생리적, 약리학적 활성을 갖는 것으로 인식되어 과학연구자들의 주목을 받고 있다. 산자나무 다당류는 면역체계 조절, 간 보호, 지질 대사 장애 및 장내 미생물 조절뿐만 아니라 항산화, 항염증, 항종양 및 혈당 강하 효과가 있는 것으로 입증되었습니다 4,5,6. 이는 천연 항산화제 역할을 하여 새로운 기능성 식품 및 의약품의 개발을 가능하게 합니다. 한편, 바다 갈매 나무속 다당류는 위산에 의해 분해되기 쉬우므로 인체의 영양분 흡수 및 활용에 유익합니다 7,8.

온수 추출(HWE), 마이크로파 보조 추출 및 초음파 보조 추출은 바다 갈매 나무속 다당류 추출에 일반적으로 사용되는 방법입니다9. 다양한 추출 방법을 통해 얻어진 다당류의 구조는 단당류 조성, 분자량(Mw), 분지 정도, 우론산 함량, 글리코시드 결합 유형 및 삼나선 형태 측면에서10 다양합니다 11,12. 일반적으로 높은 Mw 다당류 용액은 점도가 높고 용해도가 낮아 생물학적 활성 및 응용 분야에 영향을 미칠 수 있습니다13. HWE는 단순성의 장점으로 인해 실험실 및 산업 환경에서 다당류 추출에 가장 일반적으로 사용되는 기술입니다14,15. 또한, 바다 갈매 나무속 다당류에 가장 일반적으로 사용되는 추출 방법 중 하나입니다9. 따라서 본 연구에서는 HWE를 통해 다당류를 추출하였다. 다당류 함량을 결정하는 주요 방법에는 페놀-황산 및 안트론-황산 방법 16,17,18,19가 포함됩니다. 페놀-황산법은 검출 절차가 간단하고 안정성이 우수하며 감도가 높기 때문에 광범위하게 적용됩니다20. Wen et al. 페놀-황산 방법21을 통해 바다 갈매 나무속에서 추출한 다당류의 함량을 결정했습니다. 따라서 본 실험에서는 페놀-황산법을 이용하여 다당류의 함량을 측정하였다. 페놀-황산 반응 후 형성된 주황색 화합물 용액의 깊이는 다당류의 함량에 비례하며 490nm의 파장에서 결정할 수 있습니다22.

천연 다당류는 생체 내 및 시험관 내에서 놀라운 항산화 활성을 나타냅니다. 라즈베리 다당류는 장내 미생물군을 조절하여 고지방 식단 모델에서 산화 스트레스를 완화할 수 있습니다23. 다당류는 푸에라리아 로바타의 주요 활성 성분이며 항산화를 포함한 다양한 생물학적 활성을 나타냅니다24. Douet al. 블랙베리 다당류가 항산화와 같은 생리적 기능을 가지고 있음을 발견했습니다25. 다당류의 항산화 활성은 일반적으로 2,2-디페닐-1-피크릴히드라질(DPPH), 하이드록실 및 슈퍼옥사이드 음이온 라디칼을 포함한 다양한 자유 라디칼을 제거하는 능력과 ABTS 라디칼 양이온 소거 능력을 기준으로 평가됩니다26. DPPH 분석은 수소 원자 전달을 통해 보라색 DPPH 라디칼을 옅은 노란색의 안정적인 분자로 환원시키는 항산화제의 능력을 측정하기 때문에 널리 사용됩니다27. 나머지 보라색 DPPH 라디칼은 항산화 활성을 결정하기 위해 약 515-520nm에서 자외선(UV)-가시광선(Vis) 분광 광도계를 사용하여 정량화됩니다28,29.

이전 연구에서는 바다 갈매 나무속 다당류의 함량과 항산화 활성을 조사했습니다21. 그러나 이러한 연구의 대다수는 Hippophae rhamnoides subsp. sinensis. 중국에서 가장 자주 이용되고 널리 분포되는 Hippophae 종이며 중국 약전에 공식적으로 기록되어 있습니다. 티베트 의학에서 자주 사용되고 쓰촨성 티베트 약재 카탈로그에 기록된 중국 시장 고유종인 Hipphophae gyantsensis에 대한 연구는 거의 보고되지 않았습니다. 또한 다양한 Hippophae 종의 다당류, 즉 H. rhamnoides subsp. sinensis 및 H. gyantsensis의 함량과 항산화 활성을 비교한 연구는 없습니다. 따라서 본 연구에서는 먼저 HWE를 통해 추출하고 페놀-황산 비색법을 통해 정량화된 H. rhamnoides subsp. sinensis와 H. gyantsensis의 다당류 함량을 비교한다. 이 두 Hippophae 종의 다당류의 항산화 활성은 DPPH 자유 라디칼 소거 분석을 통해 추가로 조사되었습니다. 본 연구는 상기 두 Hippophae 종의 활성 다당류 성분의 품질 평가 및 추가 개발을 위한 과학적 데이터를 제공할 것으로 기대됩니다.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

프로토콜

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. 샘플 및 재료

  1. Qinghai-Xizang Plateau에서 다양한 Hippophae 의 바다 갈매 나무속 샘플을 수집하십시오.
    참고: 샘플은 청두 중의학 대학의 Yue Liu 부교수가 식별했습니다. 바우처 표본은 청두 중의학 대학교 민족 의과대학에 보관되었습니다. 샘플링 정보는 표 1에 나와 있습니다. 본 연구에 사용된 시약 및 장비의 세부 사항은 재료표에 나열되어 있습니다.
  2. 샘플을 40°C의 오븐에서 72시간 동안 건조시킵니다.
  3. 각 바다 갈매 나무속 샘플 20g을 분말로 갈아서 3번 체에 통과시킵니다. 각 샘플을 3개의 병렬 반복실험으로 처리합니다. 체를 통과하지 않은 샘플을 계속 분쇄한 다음 모두 체질될 때까지 체질합니다.
  4. 후속 연구를 위해 샘플을 -20°C에서 보관합니다.

2. 바다 갈매 나무속 다당류 추출

참고: 이 연구는 다당류를 얻기 위해 약간의 수정을 가한 바다 갈매 나무속에 대해 이전에 확립된 추출 방법을 채택했습니다30.

  1. 바다 갈매 나무속 샘플 분말 5.0g의 무게를 달고 250mL 둥근 바닥 플라스크에 넣습니다. 분말에 무수 에탄올 50mL를 첨가하고 실온(RT; 25°C)에서 24시간 동안 담가 친유성 성분을 제거합니다. 각 샘플을 3개의 병렬 반복실험으로 처리합니다.
  2. 밤새 담근 샘플 분말을 Buchner 깔때기를 사용하여 걸러낸 다음 여과액을 버려 필터 잔류물을 얻습니다. 필터 잔류물을 50mL의 탈이온수로 3회 세척하고 40°C에서 일정한 중량으로 건조시킵니다.
  3. 탈지된 필터 잔류물을 건조된 250mL 둥근 바닥 플라스크에 옮기고, 탈이온수 150mL를 1:30(g/mL)의 고액 비율로 첨가하고, 80°C의 수조에서 매번 2시간 동안 환류 추출을 수행합니다. 여과액을 분리하여 조한 바다 갈매 나무속 다당류 용액을 얻습니다.
  4. 50°C에서 회전식 증발기를 사용하여 추출물을 1.5시간 동안 농축합니다. 나중에 사용할 수 있도록 농축 용액을 4°C의 냉장고에 보관하십시오.
  5. Sevage 시약: 조다당류 용액 부피비가 1:4인 조다당류 용액에 Sevage 시약(CHCl3:C4H9OH = 4:1, v:v)을 첨가한다. 마그네틱 교반기로 혼합물을 1050rpm의 속도로 20분 동안 저어줍니다.
  6. 액체를 50mL 원심분리기 튜브로 옮기고 4000×g에서 15 분 동안 원 심분리한 다음 상청액을 수집합니다. 두 상 사이의 계면에 흰색 응집 침전물이 나타나지 않을 때까지 위의 작업을 세 번 반복합니다.
  7. 단백질 제거 후 산자나무속 다당류추출물을 농축합니다. 무수 에탄올 침전을 위해 무수 에탄올을 부피비 1:3으로 첨가하고 혼합물을 4°C에서 밤새 둡니다.
  8. 무수 에탄올의 상층을 제거하고 혼합물을 50mL 원심분리기 튜브로 옮기고 4000×g에서 15 분 동안 원 심분리하여 침전물을 얻습니다. 침전물을 동결 건조하여 총 다당류를 얻습니다.
  9. 아래 방정식 (1)을 사용하여 총 다당류 수율을 계산합니다.
    figure-protocol-1
    참고: 방정식 (1)에서 m 은 바다 갈매 나무속 다당류의 무게(g)를 나타내고 M 은 바다 갈매 나무속 샘플의 질량(g)을 나타냅니다.

3. 다당류 함량 측정

  1. 용액 준비
    1. 페놀 시약 용액의 제조
      1. 페놀 3g의 무게를 정확하게 측정하여 갈색 부피 플라스크에 옮깁니다. 페놀을 용해시키기 위해 탈이온수 50mL를 첨가합니다.
      2. 혼합물이 균질해질 때까지 완전히 흔듭니다. 플라스크에 라벨을 붙이고 나중에 사용할 수 있도록 보관하십시오.
    2. 포도당 표준액의 제조
      1. 무수 포도당 10mg의 무게를 정확하게 측정하여 10mL 부피 플라스크에 옮깁니다. 탈이온수를 첨가하여 포도당을 녹이고 혼합물을 잘 흔듭니다.
      2. 혼합물을 탈이온수로 원하는 부피로 희석하여 포도당 표준 용액을 얻습니다.
    3. 테스트 샘플 용액의 준비.
      1. 동결 건조된 산자나무 다당류(ZG1-ZG5 및 JZ1-JZ5) 5mg을 부피 플라스크(n = 10)에 정확하게 계량합니다. 각 플라스크에 탈이온수를 최종 부피 50mL까지 추가합니다.
      2. 다당류가 완전히 용해될 때까지 혼합물을 20 분 동안 초음파 처리합니다. 각 샘플을 3개의 병렬 반복실험으로 처리합니다.
  2. 표준 곡선의 구성
    참고: 페놀-황산 방법에서 다당류는 진한 황산과 반응하여 푸르푸랄 유도체를 생성한 다음 페놀과 응축하여 주황색-노란색 화합물을 형성합니다. 이 화합물의 최대 흡수 파장은 약 490nm입니다. 따라서 본 실험의 검출 파장은 490nm22로 설정하였다.
    1. 표준 포도당 용액을 탈이온수로 0.1mg/mL의 농도로 희석합니다. 마이크로피펫을 사용하여 200, 300, 400, 500, 600 및 700μL의 포도당 표준 용액을 6개의 개별 깨끗한 시험관에 조심스럽게 옮깁니다. 총 부피 1.0mL의 순수한 물을 첨가한 다음 각 용액을 부드럽게 혼합하여 균일하게 희석되도록 합니다.
    2. 위에서 언급한 시험관에 6% 페놀 용액 1.0mL와 황산 5.0mL를 첨가합니다. 잘 섞고 식힌 다음 RT에서 30분 동안 그대로 둡니다.
      참고: 페놀은 독성 화합물이며 진한 황산은 부식성이 있습니다. 페놀 및 황산 용액을 준비할 때는 장갑을 착용해야 하며, 절차는 흄 후드 내부에서 수행되어야 합니다.
    3. 앞서 언급한 샘플을 큐벳으로 옮기고 샘플 대신 순수한 물을 블랭크로 사용합니다. UV-Vis 분광 광도계와 3회 반복으로 490nm에서 흡광도를 측정합니다.
    4. 포도당 농도를 x축으로, 흡광도 값을 y축으로 하는 표준 곡선을 그립니다. 회귀 방정식을 구하고 상관 계수(R²)를 계산합니다.
      알림: UV-Vis 분광 광도계는 30분 전에 미리 예열해야 합니다. 이 단계에서 흡광도를 측정할 때 흡광도는 0.2에서 0.8 사이여야 합니다. 따라서 샘플의 농도를 정량화해야 합니다.
  3. 방법론 연구
    1. 정밀 테스트:
      1. JZ2를 취하여 3.1.3단계에서 설명한 방법에 따라 시험액을 준비합니다. 3.2.2단계에 설명된 방법에 따라 페놀-황산 비색을 수행합니다.
      2. 그런 다음 3.2.3단계에 설명된 절차에 따라 흡광도를 결정합니다. 이 절차를 6회 반복하고 상대 표준 편차(RSD)를 계산합니다.
    2. 안정성 테스트:
      1. 3.1.3단계에 설명된 방법에 따라 JZ2 샘플 용액을 준비합니다. 시료 전처리 후 0, 2, 4, 6, 8 및 10시간에 3.2.2단계에 지정된 방법에 따라 페놀-황산 비색을 수행합니다.
      2. 그런 다음 3.2.3단계에 설명된 절차에 따라 흡광도를 결정하고 RSD를 계산합니다.
    3. 반복성 테스트:
      1. 3.1.3단계에 설명된 방법에 따라 JZ2 샘플 용액을 준비합니다. 6개의 반복실험을 병렬로 준비합니다. 3.2.2단계에 지정된 방법에 따라 페놀-황산 비색을 수행합니다.
      2. 그런 다음 3.2.3단계에 설명된 절차에 따라 흡광도를 결정하고 RSD를 계산합니다.
    4. 회복 테스트:
      1. JZ2를 취하여 3.1.3단계에서 설명한 방법에 따라 시험액을 준비합니다. 9개의 반복실험을 병렬로 준비합니다. 샘플 내 총 다당류 함량의 80%, 100% 및 120%에 해당하는 참조 용액을 추가하고 3개의 평행 샘플을 준비합니다.
      2. 3.2.2단계에 지정된 방법에 따라 페놀-황산 비색을 수행합니다. 그런 다음 3.2.3단계에 설명된 절차에 따라 흡광도를 결정하고 방정식 (2)을 사용하여 회수율을 계산합니다.
        figure-protocol-2
        참고: 방정식 (2)에서 A 는 바다 갈매 나무속 샘플 용액의 포도당량을 나타내고, B 는 첨가된 포도당의 양을 나타내며, C 는 포도당을 함유한 용액과 바다 갈매 나무속 샘플 용액의 측정값을 나타냅니다.
  4. 내용 결정
    1. 3.1.3단계에 설명된 대로 샘플 용액을 준비하고 3.2.2단계에서 지정된 방법에 따라 페놀-황산 비색을 수행합니다.
    2. 3.2.3단계에 설명된 절차에 따라 흡광도를 결정하고 표준 곡선 방법을 사용하여 다당류 함량을 계산합니다. 각 샘플에 대해 이러한 작업을 병렬로 세 번 수행합니다.

4. DPPH 라디칼 소거 활성31,32

  1. 빈 50mL 부피 플라스크에 2.7mg의 DPPH를 정확하게 계량합니다. 이를 무수 에탄올 50mL에 용해시켜 농도 0.054mg/mL의 DPPH 원액을 제조하고 DPPH 작용액을 얻습니다.
    알림: DPPH 용액은 어두운 곳에 보관해야 합니다.
  2. 빈 10mL 부피 플라스크에 5mg의 비타민 C(Vc)를 정확하게 계량하고 10mL의 탈이온수에 녹여 농도 0.5mg/mL의 Vc 용액을 준비합니다. 연속적으로 희석하여 0.5, 0.125, 0.03125, 0.0078125 및 0.001953 mg/mL의 농도로 Vc 테스트 용액을 준비합니다.
  3. 각 산자나무 다당류(ZG1-ZG5 및 JZ1-JZ5)의 무게를 정확하게 측정합니다. 각 샘플을 탈이온수 10mL에 용해시켜 농도 0.5mg/mL의 바다 갈매 나무속 다당류 샘플 용액을 준비합니다. 위의 용액을 연속적으로 희석하여 0.5, 0.125, 0.03125, 0.0078125 및 0.001953 mg/mL의 농도로 바다 갈매 나무속 다당류 시험 용액을 제조합니다.
  4. DPPH 용액을 기질로 사용하여 96웰 플레이트에 다음 그룹을 준비합니다: 음성 대조군 A0 (물 150μL 및 DPPH 용액 50μL), 샘플 그룹 A1 (샘플 또는 Vc 용액 150μL 및 DPPH 용액 50μL) 및 샘플 대조군 A2 (샘플 150μL 및 무수 에탄올 50μL). 이 절차를 세 번 수행합니다.
  5. 어둠 속에서 30분 동안 반응을 진행합니다. 다음으로 517nm에서 흡광도를 측정합니다. 실험을 세 번 반복하고 방정식 (3)을 사용하여 DPPH 자유 라디칼 제거율을 계산합니다.
    참고: DPPH 용액의 흡광도는 0.7 ± 0.02로 유지되어야 합니다. 농도가 지나치게 높거나 낮으면 흡광도 판독값이 부정확하여 최종 실험 결과에 영향을 미칠 수 있습니다.
    figure-protocol-3
    식 (3)에서 A0 은 탈이온수와 DPPH 용액의 흡광도, A1 은 시료 또는 Vc 및 DPPH 용액의 흡광도, A2 는 시료와 무수 에탄올의 흡광도입니다.
  6. 반억제 농도 계산(Ic50)
    1. 반응 시험 화합물 농도(0.5, 0.125, 0.03125, 0.0078125 및 0.001953 mg/mL)와 해당 백분율 반응 값 간의 상관관계를 보여주는 시각적으로 구성된 데이터 테이블을 생성합니다.
    2. 비선형 곡선 피팅(GraphPad Prism 포함)을 사용하여 IC50 및 표준 오차를 결정합니다.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

결과

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

조다당류의 수율
다당류는 HWE를 통해 추출되었습니다. 수조 환류는 보충 그림 1에 나와 있습니다. 다당류 추출물 용액의 농도는 보충 그림 2에 도시되어 있다. 탈단백 후 원심분리 층화 효과는 보충 그림 3에 제시되어 있습니다. H. rhamnoides subsp. sinensis 의 5개 배치는 0.89% ± 0.01%, 0.78% ± 0.02%, 1.63% ± 0.03%, 1.50% ± 0.01%, 1.12 ± 0.03%이며 평균 수확량은 1.18% ± 0.02%입니다(표 2). 2.5단계에서 H. gyantsensis 의 5개 배치의 다당류 수율은 2.65% ± 0.07%, 3.94% ± 0.06%, 3.53% ± 0.05%, 2.63% ± 0.08%, 2.83% ± 0.05%이며, 평균 수율은 3.12% ± 0.06%이...

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

토론

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

바다 갈매 나무속은 티베트 전통 약입니다. 다당류는 바다 갈매 나무속의 중요한 구성 요소입니다. 다당류 함량 및 항산화 활성의 결정에 대해 많은 연구가 수행되었습니다21. 그러나 약용 종인 H. rhamnoides subsp. sinensis 및 H. gyantsensis와 같은 다양한 Hippophae 종의 다당류 함량과 항산화 활성을 비교한 사람은 소수에 불과합니다. 따라서 본 연구에서는 페놀-황산 비색법을 통해 두 종의 Hippophae 종의 다당류 함량을 결정하고 DPPH 자유 라디칼 소거 분석을 통해 항산화 활성을 평가했습니다.

이 실험의 주요 단계는 다음과 같습니다. 첫째, 페놀-황산 비색법을 사용하여 다당류 함량을 결정할 때 시약 첨가 순서를 바꿔서는 안 됩니다. 샘플을 먼저 첨가한 다...

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

공개 사항

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

저자는 공개할 이해 상충이 없습니다.

감사의 글

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 작업은 중국 국가자연과학재단(제82374145호), 쓰촨성 자연과학재단(제2025ZNSFSC0608호), 중국국가자연과학재단(제U23A20520호)의 재정 지원을 받았습니다

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
분석 저울(정밀도 0.0001 g)Sartorius Scientific Instruments (Beijing) Co., Ltd.BSA224S-CW
분석 저울(정밀도 0.00001 g)Sartorius Scientific Instruments (Beijing) Co., Ltd.CPA225D
탁상용 저속 원심분리기상하이 Zigui 악기 Co., Ltd.TD4K-Z
DPPH상하이 Yuanye Bio-Technology Co., Ltd.CAS 1898-66-4
에탄올청두 Kelong 화학 제품 Co., Ltd.CAS 64-17-5
EP 튜브후난 BKMAK 홀딩 유한 회사BS-20-M2 밀리리터
동결 건조기랩콘코 코퍼레이션랩콘코
포도당 무수청두 Kelong 화학 제품 Co., Ltd.CAS 50-99-7참조 표준
그래프패드  프림 9.5.0 GraphPad 소프트웨어해당 사항 없음IC50 값과 P 값을 결정합니다.
열풍 순환 건조 오븐상하이 Yiheng 기술 기기 Co., Ltd.NB-DGG-9070A
L-아스코르브산베이징 Labgic 기술 Co., Ltd.CAS 50-81-7양성 대조군 약물
마이크로플레이트 리더상하이 Shanpu Biotechnology Co., Ltd.최대 읽기 1500
96웰 플레이트베이징 Labgic 기술 Co., Ltd.11512
오리진프로 2025오리진랩해당 사항 없음정리율 꺾은선형 차트 만들기
피펫 팁베이징 Labgic 기술 Co., Ltd.BS-200-T200 & 무; L
피펫 팁베이징 Labgic 기술 Co., Ltd.T-1000-B1000 & 무; L
페놀청두 Kelong 화학 제품 Co., Ltd.CAS 108-95-2
회전식 증발기  BUCHI 실험실 장비 무역(상하이) Ltd.부치 R-100
표준 시약형 순수 시스템칭다오 Flom 기술 Co., Ltd.FBZ2001-up-p
온도 조절 디지털 디스플레이 수조Guan'an Scientific Instruments (Zhejiang) Co., Ltd.WB100-6F
UV-가시광선 분광 광도계상하이 마파다 악기 유한 회사 V-1100D
초음파 세척기Sheng Zheng ChaoJie 산업 Co., Ltd.CJ-060SD초음파 세척기 360W 50Hz

참고문헌

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chinese Pharmacopoeia Committee. Pharmacopoeia of the People's Republic of China. 1, Chinese Medical Science and Technology Press. (2025).
  2. Su, S. Y., et al. Structure elucidation, immunomodulatory activity, antitumor activity and its molecular mechanism of a novel polysaccharide from Boletusreticulatus Schaeff. Food Sci Hum Wellness. 12 (2), 647-661 (2023).
  3. Wang, Y. X., et al. Utilizing relative ordered structure theory to guide polysaccharide purification for structural characterization. Food Hydrocoll. 115, 106603(2021).
  4. Zhang, W., et al. Seabuckthorn berry polysaccharide protects against carbon tetrachloride-induced hepatotoxicity in mice: via anti-oxidative and anti-inflammatory activities. Food Funct. 8 (9), 3130-3138 (2017).
  5. Wang, X., et al. Seabuckthorn berry polysaccharide extracts protect against acetaminophen induced hepatotoxicity in mice via activating the Nrf-2/HO-1-SOD-2 signaling pathway. Phytomedicine. 38, 90-97 (2018).
  6. Zhao, L., et al. Proteomic analysis reveals the molecular mechanism of Hippophae rhamnoides polysaccharide intervention in LPS-induced inflammation of IPEC-J2 cells in piglets. Int J Biol Macromol. 164, 3294-3304 (2020).
  7. Chen, J. H., Chen, X., Zhou, G. H., Xu, X. L. Ultrasound: a reliable method for regulating food component interactions in protein-based food matrices. Trends Food Sci Technol. 128, 316-330 (2022).
  8. Pundir, S., et al. Ethnomedicinal uses, phytochemistry and dermatological effects of Hippophae rhamnoides L.: A review. J Ethnopharmacol. 266, 113434(2021).
  9. Teng, H., He, Z. G., Hong, C. Z., Xie, S. Z., Zha, X. Q. Extraction, purification, structural characterization and pharmacological activities of polysaccharides from sea buckthorn (Hippophae rhamnoides L.): A review. J Ethnopharmacol. 324, 117809(2024).
  10. Niu, H., et al. Pectin-stabilized emulsions: Structure-emulsification relationships, covalent and non-covalent modifications, and future trends. Trends Food Sci Technol. 159, 104986(2025).
  11. Dou, Z. M., Chen, C., Huang, Q., Fu, X. The structure, conformation, and hypoglycemic activity of a novel heteropolysaccharide from the blackberry fruit. Food Funct. 12 (12), 5451-5464 (2021).
  12. Niu, H., et al. Multiscale combined techniques for evaluating emulsion stability: A critical review. Adv Colloid Interface Sci. 311, 102813(2023).
  13. Yuan, D., Li, C., Huang, Q., Fu, X. Ultrasonic degradation effects on the physicochemical, rheological and antioxidant properties of polysaccharide from Sargassum pallidum. Carbohydr Polym. 239, 116230(2020).
  14. Chen, R., et al. Extraction, structural characterization and biological activities of polysaccharides from mulberry leaves: A review. Int J Biol Macromol. 257, 128669(2024).
  15. Lei, J., et al. Pressurized hot water extraction, structural properties, biological effects, and in vitro microbial fermentation characteristics of sweet tea polysaccharide. Int J Biol Macromol. 222 (Pt B), 3215-3228 (2022).
  16. Chen, F., Huang, G. L. Antioxidant activity of polysaccharides from different sources of ginseng. Int J Biol Macromol. 125, 906-908 (2019).
  17. Chen, Y. F., Yang, H., Shen, Z. Z., Ye, J. R. Whole-genome sequencing and potassium-solubilizing mechanism of Bacillus aryabhattai SK1-7. Front Microbiol. 12, 722379(2022).
  18. Yun, Y. H., et al. A green method for the quantification of polysaccharides in Dendrobium officinale. RSC Adv. 5, 105057-105065 (2015).
  19. Kim, J. M., et al. Quantitative determination of fucoidan using polyion-sensitive membrane electrodes. Anal Chim Acta. 877, 1-8 (2015).
  20. Ogura, I., Sugiyama, M., Tai, R., Mano, H., Matsuzawa, T. Optimization of microplate-based phenol-sulfuric acid method and application to the multi-sample measurements of cellulose nanofibers. Anal Biochem. 681, 115329(2023).
  21. Wen, J., et al. Polysaccharides from sea buckthorn - Ultrasound-assisted enzymatic extraction, purification, structural characterization, and antioxidant activity analysis. Food Chem X. 26, 102265(2025).
  22. Yue, F. F., et al. Effects of monosaccharide composition on quantitative analysis of total sugar content by phenol-sulfuric acid method. Front Nutr. 9, 963318(2022).
  23. Dou, Z. M., et al. Pectin-type polysaccharides from raspberry (Rubus idaeus L.): structure characterization and activity against DSS-induced colitis. Carbohydr Polym. 364, 123710(2025).
  24. Li, Q., et al. α-D-1,3-glucan from Radix Puerariae thomsonii improves NAFLD by regulating the intestinal flora and metabolites. Carbohydr Polym. 299, 120197(2023).
  25. Dou, Z. M., Chen, C., Fu, X. Digestive property and bioactivity of blackberry polysaccharides with different molecular weights. J Agric Food Chem. 67 (45), 12428-12440 (2019).
  26. Zhou, S. Y., Huang, G. L., Huang, H. L. Extraction, derivatization and antioxidant activities of onion polysaccharide. Food Chem. 388, 133000-133009 (2022).
  27. Musa, K. H., Abdullah, A., Kuswandi, B., Hidayat, M. A. A novel high throughput method based on the DPPH dry reagent array for determination of antioxidant activity. Food Chem. 141 (4), 4102-4106 (2013).
  28. Garcia, E. J., et al. Antioxidant activity by DPPH assay of potential solutions to be applied on bleached teeth. Braz Dent J. 23 (1), 22-27 (2012).
  29. Wei, A., Shibamoto, T. Antioxidant/lipoxygenase inhibitory activities and chemical compositions of selected essential oils. J Agric Food Chem. 58 (12), 7218-7225 (2010).
  30. Song, Y. C. Extraction, purification and modulation of mice gut microbiota by sea buckthorn polysaccharides. , Xihua University. (2022).
  31. Dong, N., et al. Exploring quality variations of Polygonati Rhizoma during nine-steaming and nine-drying process through color-polysaccharides-antioxidant activity linkages. Chin Tradit Herbal Drugs. 56 (2), 476-486 (2025).
  32. Rumpf, J., Burger, R., Schulze, M. Statistical evaluation of DPPH, ABTS, FRAP, and Folin-Ciocalteu assays to assess the antioxidant capacity of lignins. Int J Biol Macromol. 233, 123470(2023).
  33. Zhang, C. C., et al. Research progress in microevolutionary process of excellent traits and quality of Dao-di herbs. Chin Mater Med. 48 (22), 6021-6029 (2023).
  34. Li, X. W., Zhang, H. T., Zhang, Z. J. The relation between contents of flavonoids in leaves of Hippophae tibetana Schlecht. and ecological factors. J Ecological Environ. 27 (02), 239-245 (2018).
  35. Li, C., et al. Characterization, antioxidant and immunomodulatory activities of polysaccharides from Prunella vulgaris Linn. Int J Biol Macromol. 75, 298-305 (2015).
  36. Cao, C., et al. Physicochemical characterization, potential antioxidant and hypoglycemic activity of polysaccharide from Sargassum pallidum. Int J Biol Macromol. 139, 1009-1017 (2019).
  37. Li, Q. Y., et al. A comparison study on structure-function relationship of polysaccharides obtained from sea buckthorn berries using different methods: antioxidant and bile acid-binding capacity. Food Sci Hum Wellness. 13 (1), 494-505 (2024).

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재인쇄 및 허가

이 JoVE 논문의 텍스트 또는 그림 재사용 허가 요청

허가 요청

태그

DPPH

관련 논문