방법 논문

레이저 반점 조영 영상을 이용한 쥐발 피부의 폐색 후 반응성 충혈 평가

DOI:

10.3791/68986

2025년 10월 3일

* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

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이 프로토콜은 레이저 반점 조영 영상 및 침습적 혈압 측정을 사용하여 마취된 쥐의 피부에서 폐색 후 반응성 충혈의 매개변수를 평가하는 방법을 제시합니다.

초록

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LSCI(Laser Speckle Contrast Imaging)는 인간과 실험 동물의 미세혈관 관류를 평가하기 위한 현대적인 비침습적 기술입니다. LSCI와 침습적 혈압(BP) 측정 및 혈관 폐색 검사의 조합은 폐색 후 반응성 충혈(PORH)을 연구하여 미세혈관 혈류 예비력 및 혈관 반응성을 평가할 수 있도록 합니다. 이 기사에서는 LSCI를 사용하여 전신 마취 하에 쥐의 뒷발에서 PORH를 기록하고 시각화하는 기술을 보여줍니다. 특수 공압 커프를 팽창시켜 경골 수준에서 일시적인(180초) 혈관 폐색을 생성합니다. 후속 PORH(최대 충혈 및 동역학 지수)의 평가는 연구 중인 병리학적 과정(순환 쇼크, 심부전, 고혈압 등)의 메커니즘 및 중증도에 대한 추가 정보를 제공하거나 휴식 시 관류를 평가할 때 명백하지 않은 신약의 혈관 효과를 식별할 수 있습니다. 침습적 혈압 모니터링을 통해 피부 혈관 전도도를 계산하고 전신 혈역학의 변화를 고려할 수 있으며, 이는 중대한 질병의 실험 모델에서 특히 중요합니다. 출혈성 쇼크의 쥐 모델에서 미세혈관 기능 장애를 식별하기 위해 이 접근법을 사용하는 것도 시연될 것입니다.

서론

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미세혈관 기능 장애는 많은 심혈관, 내분비 및 기타 질병의 병인에 관여하여 조직 관류 및 산소 공급을 손상시키고 전신 혈역학의 혈관 운동 조절 메커니즘을 방해합니다(예: 고혈압)1. 미세순환 장애는 또한 외상, 패혈증 및 다양한 유형의 쇼크(출혈성, 패혈성, 심인성 등)가 있는 중환자의 장기 기능 장애 메커니즘에서 병태생리학적 중요성이 큽니다.2.

현재 조직 관류 및 미세혈관 기능의 비침습적 평가를 위한 임상 및 전임상 연구에는 레이저 도플러 유량계(LDF), 레이저 도플러 영상(LDI/LDPI) 및 레이저 반점 조영 영상(LSCI)과 같은 여러 레이저 기반 방법이 사용됩니다. 그 중 LSCI는 클리닉에서 피부 관류의 비침습적 평가에 가장 유망합니다. 이 방법은 실행에 적용하기 쉽고 높은 공간 및 시간 해상도로 전체 조사 영역의 시각화를 제공하기 때문에 LDF 및 LDI/LDPI에 비해 분명한 이점이 있습니다3. LSCI는 레이저 광을 사용하여 반점 패턴을 생성한 다음 이를 분석하여 혈류 역학을 시각화하는 기술입니다. 임상 및 실험 환경 모두에서 신경과학4, 복부 수술5, 피부과6 및 기타 혈관 연구 7,8과 같은 다양한 연구 분야에 필수적인 미세 순환에 대한 실시간 고해상도 평가가 제공됩니다.

휴식 시 피부 관류 값에 대한 간단한 평가는 종종 미세혈관 장애를 식별하는 데 유익하지 않습니다. 이는 피부 순환의 본질적인 기능적 특성(높은 변동성, 온도에 대한 의존성, 스트레스 및 기타 요인)과 신체의 보상 반응 중 "잘못 정상적인" 조직 관류(예: 패혈성 쇼크 초기 단계에서 심박출량 증가) 때문입니다. 표준 기능적 부하를 추가로 사용하면 미세 순환을 더 잘 평가하고 휴식 조건에서 숨겨진 미세혈관 기능 장애를 식별할 수 있습니다1. LSCI는 약리학적 자극9 하에서 피부 미세순환을 평가하는 데 유용한 것으로 알려져 있습니다.

LSCI와 혈관 폐색 검사의 조합은 미세순환의 중요한 기능적 매개변수, 특히 혈류 예비력 및 미세혈관 구조의 반응성을 반영하는 폐색 후 반응성 충혈(PORH) 현상을 비침습적으로 평가할 수 있습니다10. 이 접근법은 기준선 관류 측정에서 명백하지 않은 기능적 미세순환 이상을 식별하기 위한 임상 연구에서 널리 사용되지만11 PORH 평가는 전임상 동물 연구에서 드뭅니다12,13. 임상 연구와 비교하여 생체 내 실험에서 혈관 폐색 테스트를 사용하면 연구자에게 PORH의 메커니즘, 중증 질환의 병인 및 혈관활성 약물의 약력학을 평가할 수 있는 추가 기회를 제공합니다. 물론 이러한 기회는 동물에 대한 인도적인 대우에 대한 현대 생명윤리 기준의 한계 내에 있어야 합니다.

이 프로토콜은 LSCI 및 침습적 혈압 측정을 사용하여 마취된 쥐의 피부에서 PORH 매개변수를 평가하는 방법을 제시합니다. 후자는 쥐의 경동맥 카테터 삽입을 포함하며 평균 동맥압(MAP) 및 맥박수를 측정할 수 있습니다. 또한 실험실 테스트(예: 동맥혈 가스 분석). 이 프로토콜은 주로 실험 절차(예: 치명적인 질병 모델링)가 완료된 후 동물을 마취에서 깨우는 것을 포함하지 않는 급성 실험을 지향한다는 점은 주목할 가치가 있습니다. 쥐의 미세순환을 평가하기 위해 우리가 제안하는 방법은 비교적 간단하며 내피 기능 장애 평가를 포함한 비교 혈관 생리학 및 병태생리학 연구와 새로운 혈관작용제의 전임상 테스트에 특히 유용할 것입니다.

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프로토콜

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아래에 설명된 절차는 중환자실 의학 및 재활학의 연방 연구 및 임상 센터의 윤리 검토 위원회에서 승인한 프로토콜의 일부로 수행되었습니다.

1. 혈관 폐색을 위한 공압 커프의 준비

  1. 쥐를 위한 비침습적 혈압(NIBP) 측정 시스템의 공압 커프를 사용하여 쥐의 뒷발에 일시적인 혈관 폐색을 만듭니다.
  2. 커프를 아네로이드 압력계와 인간의 혈압을 측정하기 위한 기존 기계식 안압계의 고무 펌프에 연결합니다. 투명 3mm 플라스틱 튜브 3개 세그먼트(그 중 1m는 NIBP 시스템에 포함됨)와 적절한 크기의 T-커넥터를 사용합니다(그림 1).
  3. 동물에게 사용하기 전에 조립된 공압 시스템의 기능과 견고성을 확인하십시오. 팽창 시 커프 압력이 몇 분 동안 200-220mmHg로 유지되는지 확인하십시오.

2. 동맥 카테터, 워크스테이션 및 수술 기구의 준비

  1. 작업 영역을 70% 알코올로 처리하십시오. 수술대를 멸균 드레이프로 덮습니다. 가스 멸균 카테터 및 기구(생존 절차 및 만성 실험에서).
  2. 경동맥 카테터 삽입의 경우 끝에서 25mm 떨어진 잠금 링이 있는 길이 12cm의 PE-50 카테터(OD 0.9mm, ID 0.6mm)를 사용합니다. 동맥 천공을 방지하려면 가장자리가 매끄러운 카테터를 사용하십시오.
  3. 무딘 바늘 22G과 헤파린 처리 식염수(5IU 헤파린/1mL)로 채워진 2mL 주사기를 카테터 바깥쪽 끝에 부착합니다. 헤파린 처리 식염수(0.1-0.2mL)로 카테터를 세척하여 개통을 보장하고 혈전 형성을 방지합니다.

3. 마취 및 수술 전 처리

참고: 모든 마취제는 호흡과 순환을 억제할 수 있습니다. 치명적인 과다 복용을 방지하려면 동물 종, 균주, 연령 및 건강 상태에 따라 적절한 투여가 중요합니다. 직원은 동물 마취 및 활력 징후 모니터링에 대한 교육을 받아야 합니다. 절차는 관련 기관 동물 관리 및 사용 위원회(IACUC) 또는 이에 상응하는 윤리 기관의 승인을 받아야 합니다. 바늘, 메스 및 기타 날카로운 도구를 다룰 때는 주의해야 합니다. 즉시 폐기하려면 항상 날카로운 용기를 사용하십시오. 바늘을 다시 캡핑하지 마십시오. 인수공통전염병을 전염시키거나 신체적 외상을 유발할 수 있는 바늘 찔림 부상의 위험에 유의하십시오.

  1. 틸레타민(10mg/kg) + 졸라제팜(10mg/kg) 2% 식염수 용액 및 자일라진(5mg/kg) 0.5% 식염수 용액의 혼합물을 복강내(IP) 주사하여 쥐를 마취합니다. 반사 신경(발가락 꼬집기)이 없는지 확인하여 마취가 적절한지 확인하십시오.
  2. 목의 앞쪽과 뒤쪽 부위(견갑간 부위 포함)의 털을 면도합니다. 이 부위의 피부를 피부 소독제(70% 알코올)로 치료하십시오. 가열된 수술대에 동물을 바로 누운 자세로 눕힙니다.
  3. 마취 깊이(자발적인 움직임, 고통스러운 자극에 대한 반응), 호흡 패턴(빈도, 깊이, 리듬, 쌕쌕거림), 피부 및 점막의 색상을 정기적으로 평가하여 마취된 동물의 상태를 모니터링합니다. 필요에 따라 틸레타민 + 졸라제팜 10mg/kg IP를 추가로 주사하십시오.
  4. 가열 테이블과 단열 담요를 사용하여 동물의 직장 온도를 36.5-37.0 °C로유지하여 심각한 저체온증을 피하십시오.

4. 좌경동맥 카테터 삽입

  1. 목의 복부 표면에 2cm 정중선 피부 절개를 합니다. 지혈제와 겸자를 사용하여 목의 근육과 근막을 세로로 무뚝뚝하게 해부하여 왼쪽 경동맥을 노출시키고 혈관의 5-7mm 부분을 분리합니다. 미주 신경을 경동맥에서 조심스럽게 분리하여 손상을 입지 않도록 하십시오.
  2. 4-0 실크 봉합사를 사용하여 동맥의 꼬리 부분에 느슨한 넥타이를 놓고 혈관의 두개골 끝을 결찰합니다. 동맥 아래에 놓인 미세수술 겸자의 턱을 사용하여 절개 후 출혈을 방지하기 위해 부드럽게 늘립니다.
  3. 두개골 방향으로 45° 각도의 미세 수술 가위를 사용하여 두 결찰사 사이의 동맥에 가로 절개를 합니다(혈관 직경의 절반 이하 깊이).
  4. 동맥을 작은 절개한 후 겸자를 사용하여 고정 링까지 심장 쪽으로 카테터를 삽입합니다. 카테터를 혈관 내강에 고정한 상태에서 꼬리 결찰을 조이고 카테터의 고정 링 위에 추가 매듭을 묶습니다.
  5. 주사기에 소량의 혈액을 흡인하여 카테터의 개통성을 확인하고 카테터를 다시 세척하십시오. 고정 링에서 2-3cm 떨어진 매끄러운 바늘 홀더로 카테터를 고정합니다. 카테터에서 무딘 바늘과 주사기를 제거합니다.
  6. 쥐를 엎드린 자세로 조심스럽게 돌립니다. 수술용 가위를 사용하여 견갑골 사이에 0.5-1.0cm 정중선 피부 절개를 합니다. 지혈 클램프를 등쪽 절개를 통해 복부 절개 쪽으로 피하로 터널링합니다. 카테터의 바깥쪽 끝을 잡고 조심스럽게 피하 터널을 통과시켜 견갑간 부위로 가져옵니다.
  7. 카테터 바깥쪽 끝에 부착된 2mL 주사기가 있는 무딘 바늘을 삽입합니다.
  8. 비외상 바늘과 4-0 모노필라멘트 봉합사를 사용하여 복부 및 등쪽 수술 상처를 봉합합니다.

5. 침습적 혈압 측정

  1. 침습적 혈압 측정 시스템에서 보정된 변환기에 헤파린 처리 식염수(5 IU 헤파린/1mL)를 채웁니다.
  2. 동물을 복부 위치에 놓습니다. 무딘 바늘에서 2mL 주사기를 분리하고 카테터를 변환기에 연결합니다(그림 2). 카테터에서 클램프를 제거하고 0.1-0.2mL의 헤파린 처리 식염수로 혈압선을 세척합니다.
  3. 데이터 수집 시스템을 사용하여 혈압과 심박수를 측정하고 기록합니다. 혈압 파형(진폭 10-15mmHg 이상)에서 잘 정의된 맥동은 카테터의 개통 및 올바른 위치를 나타냅니다.
    알림: 혈압을 정확하게 측정하려면 변환기를 동물의 심장 높이에 위치시켜야 합니다. 혈압 측정 라인에 기포가 나타나면 내부 장기의 공기 색전증을 방지하기 위해 기포를 제거하십시오.
  4. 평균 동맥압(MAP) 및 기타 기본 생리학적 변수를 측정하기 전에 마취된 동물을 15-20분 동안 안정화시킵니다.
  5. 데이터 수집 소프트웨어 응용 프로그램을 엽니다. 파일 메뉴에서 새로 만들기를 선택합니다.
  6. 올바른 물리적 입력(예: 입력 1)이 선택되었는지 확인합니다. 해당 채널(예: 채널 1) 헤더에서 드롭다운 메뉴 화살표를 클릭하고 채널 설정을 선택합니다.
  7. 대화 상자에서 예상 신호를 수용하도록 전압 범위(±100mV)를 조정합니다. 표시 단위를 mmHg로 설정합니다.
  8. 샘플링 속도 조정: 도구 모음에서 샘플링 속도 버튼을 클릭합니다. 침습성 혈압의 경우 샘플링 속도를 200Hz(200샘플/초)로 설정합니다. 연구 목표에 맥파 형태 분석이 포함된 경우 샘플링 속도를 1kHz로 높입니다.
  9. 시작 버튼을 클릭하여 실험 데이터 기록을 시작합니다.
  10. 원하는 데이터 세그먼트가 캡처되면 중지 버튼을 클릭합니다. 파일 | 다른 이름으로 저장... 고유한 파일 이름을 지정하십시오.

6. LSCI를 이용한 피부 관류 측정

  1. 쥐의 뒷발의 발바닥 표면을 물에 적신 거즈로 닦아 피부를 깨끗이 닦습니다.
    알림: 피부 충혈을 유발할 수 있는 알코올이나 기타 용액을 사용하지 마십시오.
  2. 경골과 비복근 높이에서 쥐의 뒷발에 공압 커프를 놓습니다.
    알림: 커프의 내강을 통해 손가락과 발목을 삽입할 때 팽창식 멤브레인이 손상되고 무릎의 연조직이 압박되지 않도록 주의하십시오.
  3. 쥐의 발을 거즈 조각 위에 놓고 움직임 아티팩트를 최소화하기 위해 접착 테이프 스트립으로 발가락을 추가로 고정합니다(그림 2).
  4. LSCI 방법을 사용하여 피부 관류를 기록하기 위해 데이터 수집 하드웨어 및 소프트웨어를 준비합니다.
    참고: 제시된 작업에서 하드웨어는 고속 근적외선(NIR) 흑백 카메라, 카메라 대물렌즈, NIR 선형 편광판 및 디퓨저 세트가 있는 레이저 소스로 구성됩니다. 소프트웨어는 지정된 프레임 속도(초당 90프레임)노출 시간(11ms)으로 프레임을 캡처하는 비디오 녹화 도구로 구성됩니다. 카메라의 시야각인 영역의 실제 크기는 16 x 16mm입니다.
  5. 관심 영역(족근 및 중족골)이 카메라 대물렌즈의 초점에 있는지 확인하십시오.
  6. 조명이 전체 관심 영역에 걸쳐 균일하고 과도하지 않도록 레이저 소스를 조정하십시오.
  7. 측정 대상체의 정반사가 최소화되도록 선형 편광판을 조정합니다.
  8. 비디오 녹화 도구의 매개변수가 올바르게 설정되었는지 확인한 다음 캡처 버튼을 클릭하여 원시 흑백 이미지를 30초 동안 녹화합니다(기준 녹화, 다소일 수 있음). 이미지를 사용하여 Speckle Perfusion 값을 계산합니다(아래 공식 (2) 참조).
    참고: 이 연구에서는 특별히 개발된 실험 설정이 사용되었지만 LSCI 방법을 구현하는 상업적으로 이용 가능한 모든 장치를 활용하여 이 프로토콜에 따라 측정을 수행할 수 있습니다. 얻은 결과에 대한 외부 조명의 영향을 최소화하기 위해 어두운 방에서 LSCI 측정을 수행하는 것이 좋습니다.

7. 혈관 폐색 검사 및 PORH 평가

  1. 고무 펌프의 릴리프 밸브를 닫으십시오.
  2. 기본 피부 관류(휴식 시)를 캡처한 후 동물의 사지에 있는 공압 커프를 동물의 수축기 혈압보다 더 높은 압력으로 빠르게 팽창시킵니다(사지 손상을 일으키지 않고 동맥 및 정맥 혈류를 안정적으로 차단하기 위해 보통 200-220mmHg).
  3. 혈관 폐색을 확인하고 이후에 반점 관류의 "생물학적 영점"을 결정하기 위해 180초(연구 목적에 따라 30-300초) 동안 피부 LSCI 신호를 계속 기록합니다.
  4. 목표 폐색 시간에 도달한 후 커프를 빠르게 수축시키고 PORH 역학을 기록하기 위해 180초(다소일 수 있음) 동안 피부 LSCI 신호를 계속 기록합니다.
  5. 혈관 폐색 전, 도중 및 후에 피부 관류 평가와 동시에 침습성 동맥압 파형을 기록합니다. 이 데이터를 사용하여 MAP 및 피부 혈관 전도도를 계산합니다(아래 참조).
  6. 소프트웨어 환경에서 작성된 알고리즘을 사용하여 Speckle Perfusion 값을 얻습니다. 첫 번째 단계는 원시 흑백 이미지를 반점 대비 이미지로 변환하는 것입니다. 공식( 1)을 사용하여 평균 반점 대비를 계산합니다.
    figure-protocol-1    (1)
    여기서 강도는 주어진 시간에 각 픽셀의 강도입니다.
    참고: 대비가 계산되는 이미지 수는 처리 결과에 큰 영향을 미칠 수 있습니다. 본 연구에서는 평균 90개 이상의 이미지를 포함하는 시간적 LSCI 알고리즘을 사용하였다.
  7. 공식(2)을 사용하여 Speckle Contrast 값을 Speckle Perfusion 값으로 변환합니다.
    figure-protocol-2  (2)
  8. 반점 관류 값(이 직사각형 영역 내부)을 평균화하기 위한 관심 영역(족근 및 중족골)을 포함하는 직사각형 영역을 선택합니다. 연구된 매개변수의 추가 계산을 위해 이러한 절차에 의해 얻은 Speckle Perfusion의 시간 진화(그래프)를 사용하십시오.
  9. 측정된 피부 관류 값을 기반으로 주요 PORH 매개변수를 계산합니다( 그림 3).
  10. 공식 (3)을 사용하여 피부 혈관 전도도(CVC)를 계산합니다.
    figure-protocol-3   (3)
    여기서 LSCI휴식 은 기준선에서 기록된 피부 반점 관류의 평균값입니다(임의 단위 = AU). MAP는 같은 기간 동안 기록된 평균 동맥압(mmHg)입니다.
  11. 공식( 3)을 사용하여 최대 피부 혈관 전도도(CVCmax)를 계산하고 최대 충혈(LSCImax) 및 MAP에 대한 적절한 값을 대체합니다.

8. 실험 절차 및 반복 측정

  1. 기준선에서 피부 관류, PORH 및 기타 관심 있는 생리학적 변수를 기록한 후 승인된 연구 프로토콜에 따라 실험적 개입을 수행합니다(예: 병리학적 과정의 모델링 및/또는 혈관작용 약물의 투여).
  2. 시뮬레이션된 병리학적 과정의 개발 또는 투여된 약물의 효과 달성 후 다음 연구 시점에서 PORH 및 기타 생리학적 변수를 재평가합니다.

9. 실험 종료

  1. 급성 실험이 완료되면 깊은 전신 마취(틸레타민 + 졸라제팜 및 자일라진) 하에 2% 리도카인(2mL)을 동맥내 주사하여 쥐를 안락사시킵니다. 현지 법률 및 프로토콜에 따라 IACUC(Institutional Animal Care and Use Committee)에서 승인한 실험실 설치류에 대한 인도적 안락사의 대체 방법을 사용하십시오.
    참고: 생존 절차 및 마취에서 동물의 계획된 회복을 위해 저체온증 예방 및 적절한 수술 후 진통제(예: 케토프로펜 5-10 mg/kg IM)를 포함하여 동물의 상태에 대한 적절한 관리 및 정기적인 평가를 제공하십시오.

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결과

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위에서 설명한 미세혈관 기능 평가 방법은 체중 250-300g의 Wistar 수컷 쥐에서 출혈성 쇼크(계산된 혈액량의 35%의 실혈)를 모델링하는 일련의 실험에 적용되었습니다. 출혈이 있는 동물 그룹(HS, n = 13)에서 출혈 완료 후 30분 후에 침습성 혈압의 동시 모니터링과 함께 PORH 매개변수 평가를 수행했습니다. 가짜 수술 동물(가짜, n = 10)의 대조군에서는 출혈이 유도되지 않았지만 비슷한 기간 동안 동일한 측정이 수행되었습니다. 그룹 간 차이는 Mann-Whitney U 테스트를 사용하여 분석되었습니다. 결과는 중앙값과 사분위수 범위로 표현됩니다.

그림 4는 동물의 대조군과 비교하여 급성 실혈에 의해 유발된 PORH(혈관 폐색 180초 후)의 변화를 보여줍니다. 실혈 후 출혈...

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토론

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여기에서 우리는 설치류의 생체 내 실험에서 피부 미세 순환 및 혈관 반응성을 평가하기 위한 현대화된 기술을 설명합니다. 생리학적 및 약리학적 연구에서 이 방법을 성공적이고 표준화하여 사용하려면 몇 가지 추가 고려 사항을 고려해야 합니다. 위의 프로토콜에서 쥐는 틸레타민 + 졸라제팜 + 자일라진의 조합으로 마취되며, 이는 주로 실험 동물 작업에 대한 현지 표준과 부프레노르핀, 케타민 및 기타 일반적으로 사용되는 주사 가능한 진통제 및 마취제에 대한 접근이 제한되어 있습니다. 경미한 수술과 관련된 약리학적 연구의 경우 적절한 장비를 사용할 수 있는 경우 이소플루란/세보플루란 단일 마취가 선호됩니다. 서로 다른 마취 요법이 혈역학적 매개변수에 영향을 미칠 수 있지만 이 연구에서는 주사 마취와 흡입 마취 사이의 직접적인 비교가 수행되지 않았습니다. 모든 실험 그룹에서 동일한 주사 프로토콜을 사용하여 일관성이 유지되었습니다."

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공개 사항

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저자는 선언할 이해 상충이 없습니다.

감사의 글

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이 작업은 프로젝트 24-25-00310에 따라 러시아 과학 재단의 지원을 받았습니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
외과용 봉합사 나일론이 있는 무외상 바늘, 4C-0.5x16-4/0-NMedtekhnika, 러시아해당 사항 없음파랑. 길이 75cm. USP 4/0(MP1.5). 수술 상처 봉합용
뭉툭한 끝 주사기 바늘이 있는 쥐 경동맥용 카테터 22GSciCat, 러시아 해당 사항 없음PE-50, 길이 12cm, OD=0.9mm, ID=0.6mm. 고정 링 1개 포함
Deltran 일회용 압력 변환기유타 메디컬 프로덕츠, US 606912인치 케이블
주입 요법 및 모니터링을 위한 DiscofixC 3방향 마개B. 브라운, 독일 16494C
덤플링을벨메드프레파라티, 벨로루시 해당 사항 없음헤파린 나트륨 5000 IU/ml, 앰플 5 mL
리도카인Velpharm, 러시아해당 사항 없음주사용 용액 20 mg/mL, 앰플 2 mL
공압 커프 "수축기"뉴로보틱스, 러시아해당 사항 없음설치류를 위한 비침습적 혈압 측정의 일부. 유형 5-10mm 꼬리 (쥐)
소금Pharmasyntez, 러시아 해당 사항 없음주입 용액 0,9%, 250mL
소프트웨어 실험실차트8 ADInstruments, 오스트레일리아해당 사항 없음버전 8.1.13
소프트웨어 MATLAB MathWorks Inc., 미국해당 없음 버전 R2019b
일회용 멸균 주사기, 1 mL, 3액형Huaian City Hengchun Medical Product Co. Ltd., 중국해당 없음 27G 바늘
일회용 멸균 주사기, 2 (2.5) mL, 3액형Vogt Medical Vertrieb GmbH, 독일131052423G 바늘
봉합사 SILK-S폴리테크메드, 러시아 해당 사항 없음비흡수성, 꼰, 실리콘 코팅이 된 천연 실크로 제작되었으며 카세트에 검은색이 있습니다. USP 4/0(MP1.5). 길이 100m. 혈관 결찰용
자일라Interchemie, 네덜란드해당 없음 자일라진 20 mg/mL, 50 mL
졸레틸 100Virbac, 프랑스 해당 없음 틸레타민 HCl 50 mg/mL, 졸라제팜 HCl 50 mg/mL, 5 mL

참고문헌

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Roustit, M., Cracowski, J. Non-invasive assessment of skin microvascular function in humans: an insight into methods. Microcirculation. 19 (1), 47-64 (2012).
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