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방법 논문

마우스의 기증자 특이적 면역 내성을 평가하기 위한 2차 이종성 심장 이식을 위한 커프스 없는 봉합선 기반 자궁경부 모델

463 조회수

⸱

DOI:

10.3791/69966

⸱

2026년 3월 13일

 ,  ,  , 
1Center for Transplantation Sciences, Massachusetts General Hospital

* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

이 프로토콜은 마우스에서 커프가 없고 봉합 기반인 경추 이종성 심장 이식 기법을 제시하여, 이물질 간섭이 최소화된 생리학적 조건에서 기증자 특이적 면역 관용을 평가하기 위해 두 번째 이종성 심장 이식편을 신뢰성 있게 배치할 수 있도록 설계되었습니다.

초록

마우스 이종 소성 심장 이식은 동종 이식 거부 반응과 면역 관용을 연구하는 잘 확립된 모델입니다. 내성 연구에서는 기증자 특이성을 평가하기 위해 두 번째 이종성 심장 이식편을 삽입하는 것이 종종 필요하며, 경추 부위가 이상적인 해부학적 부위를 제공합니다. 커프 기반 기법은 혈관 문합을 단순화하지만, 인공 물질을 도입해 근절 주변 염증을 촉진하고 혈역학을 변화시키며 면역학 분석을 혼란스럽게 할 수 있습니다. 또한, 유전적 변형, 면역억제 치료, 고령 수혜자 연령, 만성 실험적 상태로 인한 혈관 협착은 소구경 혈관에서 커프 삽입을 기술적으로 어렵게 만들 수 있습니다. 여기서는 마우스에서 자궁경부 이종성 심장 이식을 위한 커프가 없는 봉합 기반 기법을 소개합니다. 이 방법은 인트라루날 폴리머 사용을 피하고, 생리적 혈류를 보존하며, 변화된 흐름 역학과 관련된 합병증을 줄여줍니다. 프로토콜에는 기증자와 수혜자 혈관의 세심한 준비, 경동맥과 외경정맥의 종단 간 미세 문합, 수술 중 개폐성 평가, 그리고 수술 후 모니터링 전략이 포함됩니다. 인공 재료 사용을 최소화하고 소구경 혈관에 적응함으로써, 이 커프프리 기법은 2차 심장 이식을 위한 생리학적이고 재현 가능한 플랫폼을 마련합니다. 이 접근법은 마우스 심장 이식 모델에서 기증자 특이적 내성에 대한 엄격한 기전 연구를 가능하게 합니다.

서론

심장 이식은 말기심부전 환자들에게 생명을 구하는 중재입니다. 심장 동종 이식편 수혜자는 거부 반응을 예방하기 위해 평생 면역억제 치료가 필요합니다. 면역억제에도 불구하고 장기 이식편 생존율은 급성 및 만성 거부, 특히 항체 매개 거부(AMR)와 심장 동종 혈관병증(CAV)으로 인해 여전히 저하됩니다3. 또한, 이러한 요법은 신독성, 대사 증후군, 감염, 악성 종양 등 이식편과 환자 생존율을 모두 감소시키는 심각한 부작용을 동반합니다 2,4. 이러한 도전은 면역 관용의 긴급한 필요성을 강조하며, 이는 수혜자의 면역 체계가 평생 면역억제 없이도 기증자 이식편을 받아들이는 상태입니다. 내성을 달성하면 약물 관련 독성이 제거되고 감염 및 악성 위험을 줄이며 만성 동종면역 손상을 예방하고 스테로이드 금단을 허용하여 대사 조절을 개선하고 이식 기능을 보존할 수 있습니다. 혼합 키메리즘, 코자극 차단, 조절 세포 주입, 유전자 표적 접근법 등 다양한 내성 전략이 동물 모델에서 가능성을 보였지만, 임상 번역은 여전히 제한적입니다 6,7,8,9. 중요한 장벽은 기증자 특이적 내성을 엄격히 테스트하는 신뢰할 수 있는 생체 내 모델의 필요성입니다.

쥐 이종 심장 이식은 동종이식 거부 반응과 내성 메커니즘을 연구하는 강력하고 널리 사용되는 실험 모델입니다 10,11,12,13,14. 유전적으로 정의된 마우스 계통과 형질전환 모델의 가용성은 이식편 손상과 조절에 관여하는 면역 경로를 엄격히 분석할 수 있게 합니다 9,15,16. 내성 연구에서는 기증자 특이성 면역 조절 특이성을 평가하기 위해 기증자 매칭 또는 제3자 이식 두 번째 이종 심장 이식이 종종 필요합니다13, 17, 18. 경추 부위는 이 두 번째 이식에 이상적인 해부학적 부위로, 직접적인 수술적 접근, 촉진 또는 영상을 통한 신뢰할 수 있는 이식편 모니터링, 그리고 조직 후행 면역학 및 조직학적 분석을 위한 효율적인 조직 채취를 제공합니다 8,19. 이러한 특징들은 경추 모델을 다양한 이식 환경에서 관용 유도 및 거부 기전을 조사하는 데 특히 유용합니다.

지난 30년간 봉합사를 이용한 여러 경추 이종 심장 이식 기법이 기술되어 왔습니다. 초기 연구는 목이 이식 이식 및 기증자의 혈관과 수혜자의 경동맥 및 경정맥 사이의 봉합 기반 종단 간 문합을 통한 직접적인 기능 모니터링 부위임을 입증했다20. 다른 연구단에서는 기증 폐동맥 또는 대동맥을 경추 혈관에 고정하는 대안으로 커프프리 슬리브 구성을 보고했다21. 원래의 경동맥 연속성을 보존하고 표준 복부 끝에서 옆으로 이어지는 문합의 기하학을 보다 근사하기 위해 새로운 종합 봉합 기반 경추 모델이 제안되었습니다22. 이 방법들은 경추 부위의 유연성을 강조하고, 기술적 복잡성, 혈역학, 문합 경계부의 이물질 양 사이의 필수적인 절충관계를 보여줍니다.

쥐 경추 심장 이식에서 널리 적용되는 혈관 문합 기법 중 하나는 23,24,25,26 인트라루날 커프 기법입니다. 커프 기반 경추 기법은 미세혈관 문합을 단순화하고 특히 경험이 적은 미세외과 의사에게 기술적 성공률을 높이기 위해 하루내(intraluminal stent)을 도입합니다. 커프 기반 접근법은 혈관 연결의 기술적 어려움을 단순화하지만, 이 기술은 문합 부위에 이물질을 유입시킵니다. 고분자의 존재는 근합 주변 염증을 촉진하고 국소 혈역학을 변화시키며, 면역 분석을 혼란시킬 수 있습니다27,28. 더불어, 유전자 변형 마우스 품종, 면역억제 치료, 고령 수혜자 연령, 만성 실험 질환 등으로 인해 수혜기 혈관의 좁아짐은 소구경 혈관에서 커프 삽입이 기술적으로 어려울 수 있습니다29.

이러한 한계를 해결하기 위해 우리는 경추 이종성 심장 이식을 위한 완전 커프스 없는 봉합 기반 기법을 개발했습니다. 이 구성에서는 수용 경동맥이 기증자 상행 대동맥과 끝에서 끝까지 맞물리고, 수혜자 외경정맥은 기증자 폐 줄기와 끝에서 끝까지 맞물리어 관상동맥 관류를 위한 단순한 유입 및 유출을 제공합니다(그림 1A). 인트라루날(intraluminal) 합성 물질의 사용을 최소화함으로써 이 접근법은 문합 부위에서 고분자-혈액 접촉을 피하며, 국소 면역 및 염증 반응에 초점을 맞춘 연구에 개념적으로 매력적입니다. 이 방법은 기증자와 수혜자 혈관 모두를 세심하게 준비하고, 경동맥과 외경정맥의 끝에서 끝까지 미세문합을 포함합니다. 또한 수술 중 개폐성 평가와 수술 후 모니터링이 수행됩니다. 실제로, 이 커프 없는 자궁경부 모델은 장기 생존이 가능한 복부 이식 후 기증자 특이적 내성을 테스트하기 위해 2차 심장 이식이 필요할 때 적용되며, 특히 소구경 혈관을 가진 형질전환 또는 면역억제 마우스에서 그렇습니다. 하지만 이 기법은 고급 미세수술 전문 지식과 수술용 현미경 접근이 필요합니다; 경동맥 결찰 및 수혜자 선택과 관련된 추가 제한 사항은 아래에서 논의합니다. 재현 가능한 플랫폼을 제공함으로써 이 기술은 2차 이식 모델의 신뢰성을 높이고 마우스 시스템에서 기증자 특이적 내성에 대한 기전적 연구를 지원합니다. 이 프로토콜은 수혜자 경동맥을 기증자 상행 대동맥과 연결하고, 수혜자의 외경정맥을 기증자 폐 줄기와 연결하여 이식편에 견고한 관상동맥 관류를 제공하는 종단 간 문합을 사용합니다(그림 1B). 종단 간 문합은 관상동맥 관류를 신뢰성 있게 지원하는 단순한 유출 패턴을 만듭니다.

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프로토콜

쥐는 잭슨 연구소에서 구입했습니다. 이 연구에는 6주에서 10주 사이의 수컷과 암컷 마우스, 첫 복부 심장 이식 당시 체중 20-30g이 포함되었습니다. 기증자와 수혜자는 매사추세츠 종합병원 설치류 시설에서 특정 병원체 없는 SPF 조건 하에 수용되었습니다. 모든 절차는 NIH의 실험동물 관리 및 사용에 관한 지침에 따라 인도적으로 시행되었습니다. 모든 동물 실험은 매사추세츠 종합병원의 기관 동물 관리 및 사용 위원회(IACUC)의 승인 및 감독 하에 수행되었습니다(프로토콜 번호 2020N000125). 재료표 에는 이 프로토콜에 사용되는 모든 시약, 기기, 장비가 나열되어 있습니다. 실험을 시작하기 전에 IACUC 승인이 필요합니다. 모든 쥐는 기관 지침과 관련 규제 기준에 따라 보관 및 관리합니다.

1. 동물과 기구 준비

  1. 수술 전에는 모든 기구를 250°F(121°C)의 포화 증기에 20분간 압력 가해 멸균하세요. 필요한 미세수술 기구는 그림 2에 나와 있습니다. 미세수술 기구의 끝부분을 보호하여 손상을 방지하세요. 부러지거나 변형된 기구는 즉시 교체하여 최적의 수술 성공률을 유지하세요.
  2. 수혜자 수술 전 관리
    1. 이 프로토콜은 이전에 복부 이종성 심장 이식편 10,11,12를 이식한 수혜자 마우스를 사용합니다. 수혜자가 건강한지, 주요 절개 부위가 완전히 치유되어 감염이 없는지, 복부 이식이 계속 뛰고 있는지 확인하세요. 복부 이식 후 수술 후 50일에서 100일 사이에 이 2차 자궁경부 이식을 시행합니다. 복부 이식편이 제대로 된 수혜자만 사용하세요. 이는 내성 프로토콜 8,17입니다.
    2. 흡인 위험을 최소화하기 위해 시술 1-2시간 전부터 수혜자 쥐를 단식시키세요. 진통을 위해 Ethiqa XR(서방형 부프레노르핀, 3.25 mg/kg)과 멜록시캄(5 mg/kg)을 피하 투여하여 진통을 돕습니다. 에티카 XR은 최대 72시간30분까지 지속 진통을 제공합니다.
  3. 기증자 준비
    1. 연구 설계에 따라 적절한 균주의 성별과 연령이 일치하는 기증자 마우스를 선별합니다. 심장 동종이식편 면역 관용 연구에서 기증자 그룹은 수혜자와 동일한 균주인 공동 기증자, 주요 복부 심장 이식 기증자와 동일한 계통인 동종 기증자, 그리고 주 기증자와 수혜자 모두와 다른 균주인 동종 제3자 그룹이 포함될 수 있습니다.
    2. 마취 전 모든 기증자와 수혜자 쥐의 건강 상태와 적절한 적응 기간을 확인하세요.

2. 마취

  1. 마취 유도 및 지원
    1. 유도 챔버 내 정밀 증발기를 사용하여 산소 내 1% - 2.5% 이소플루란(분당 1-2 L/분)으로 마취를 유도합니다. 코 콘이나 기관내관을 통해 마취를 유지하세요. 마취 하에 각막이 건조해지는 것을 방지하기 위해 쥐의 양쪽 눈에 수의용 안과 윤활제를 바르세요.
    2. 페달 철회 반사가 없으면 마취 깊이를 확인하세요. 시술 내내 체온을 유지하기 위해 동물을 온열 패드 위에 올려놓으세요.

3. 기증자 심장 수확

  1. 기증자 노출
    1. 기증 쥐를 누운 자세로 눕히고 팔다리를 테이프로 고정하세요. 털을 제거하고 70% 이소프로필 알코올 면봉으로 피부를 3회 소독하세요.
    2. 복강과 흉강을 노출시키기 위해 가위를 사용해 정중 흉골 절개술을 시행하세요. 적은 거즈로 장을 왼쪽으로 부드럽게 움직이세요. 장 아래에 식염수 적신 거즈를 깔아 수분 유지를 하세요.
  2. 관류 및 기증자 심장 채취
    1. 냉간 헤파린화된 식염수(125 IU/mL)를 준비하고 0.2 - 0.3 mL를 0.5 mL 주사기에 주입하세요.
    2. 하대정맥에 26-30G 바늘이나 카테터를 부드럽게 캐뉼레이로 삽입하세요. 30초 동안 2-3mL의 차가운 헤파린화된 생리식염수를 천천히 관류합니다. 간파린화를 최적화하려면 최소 1-2분을 기다리세요.
    3. 양측 흉강절개술을 시행하여 최대한 시야가 확보된 심장을 노출시키세요. 앞가슴 케이지를 등쪽에서 분리하고 위쪽으로 반사하여 바늘이나 클램프로 고정합니다.
    4. 상행 대동맥(AA)과 폐 줄기(PT) 사이의 결합 조직을 무딘 상태로 해리합니다; 그림 3A).
    5. 심장 가까이에 8-0 나일론 봉합사로 하정맥과 상정맥을 결찰하고, 결렬 부위에 위치한 결찰된 혈관을 절단합니다. PT를 최대한 말리까지 직설적으로 해부하세요.
    6. 좌우 폐정맥을 6-0 나일론 봉합사로 결합하고, 결찰 부위 쪽의 결찰된 혈관을 절단합니다.
    7. 심장을 절제하여 상완두동맥 기원과 PT의 기원에서 절단하여 AA의 적절한 길이를 보존하세요. PT의 앞벽은 가능한 한 오래 보존하세요. AA와 PT를 절단하여 안전한 문합을 보장합니다(그림 3B).
    8. 심장을 60mm 세포 배양 접시에 넣고 냉정한 생리식염수로 채운 후, 기증자 심장에 1mL의 차가운 헤파린화된 생리식염수(125 IU/mL)를 부드럽게 다시 관류하여 잔류 혈액을 세척합니다. 심근부종이나 혈관 손상을 예방하기 위해 고압 주사는 피하세요. 필요에 따라 냉각판 위의 용기를 다듬으세요.
    9. 심장을 착상할 때까지 차가운 링어스 락테이트 용액에 얼음 위에 넣어 보관하세요. 기증 심장은 냉 허혈 발생 후 90분 이내에 착상하는 것이 가장 좋으며, 120분 이상 보존해서는 안 됩니다.

4. 수혜자의 경추 노출

  1. 절개 및 혈관 격리
    1. 유도 챔버 내 정밀 증발기를 사용하여 산소 내 1% - 2.5% 이소플루란(분당 1-2 L/분)으로 마취를 유도합니다. 코 콘이나 기관내관으로 마취를 유지하세요. 페달 철수 반사가 없어 마취 깊이가 적절한지 확인하세요. 수액 보충을 위해 수혜자의 등쪽 부위에 0.5 mL의 따뜻한 생리식염수를 피하 주입합니다.
    2. 체온을 유지하기 위해 받는 사람을 온열 패드 위에 올려놓으세요. 경추 전체를 면도하세요. 쥐를 꼬리가 조작자를 향하도록 누운 자세로 배치하세요. 머리, 팔다리, 꼬리를 테이프로 고정하여 과도한 스트레칭 없이 고정을 확실히 하세요. 건조를 방지하기 위해 양쪽 눈에 안과 윤활제를 한 방울씩 발라주세요. 자궁경부 피부는 70% 이소프로필 알코올 면봉으로 3회 소독하세요.
    3. 흉골에서 오른쪽 하악각까지 목 위에 역방향 T자 모양의 세로 피부 절개를 합니다(보충 그림 1A).
    4. 오른쪽 내측 쇄골에서 주요 합류점까지 오른쪽 외경정맥(EJV)을 둔하게 움직이게 합니다. EJV의 작은 가지를 지혈하고 횡단하세요(그림 4B).
    5. 갑상선의 오른쪽 엽을 분리하여 지혈 수술로 절단하세요. 흉골돌기근을 지혈하여 오른쪽 경동맥(CA)을 노출시킵니다.
    6. 오른쪽 CA를 경동맥 분기점 위쪽으로 최대한 강하게 움직입니다(그림 4C).
    7. CA 근위 부위에 작은 혈관 클램프를 부착하세요. 경동맥 분기점 높이의 원위 부분에 10 - 0 나일론 결찰을 감아 혈류를 막으세요.
    8. CA 클램프 높이의 EJV 근위부에 10 - 0 나일론 결사를 붙이세요. EJV가 확장되면 이전에 지져서 절단한 작은 가지 부위의 출혈을 멈추세요. EJV가 확장될 때 하악후정맥과 후방 이이정맥의 합류 지점을 확인하고, 이 합류점에 작은 혈관 클램프를 눌러 폐색 흐름을 차단합니다.
  2. 혈관 문합 준비
    1. 가는 가위로 결사와 클램프 사이의 EJV와 CA를 절단하세요.
    2. 혈관을 생리식염수로 세척하여 혈액과 혈전을 제거하세요. 이식 수술 내내 수술 부위를 촉촉하게 유지하세요.

5. 이식편 이식

  1. 이식편 배치
    1. 기증자 심장 이식편을 수혜자 경추 부위에 거꾸로 놓고, PT는 측면에, 상행 대동맥(AA)은 내측에 위치시킵니다.
    2. 이식편을 촉촉한 거즈로 덮고, PT와 AA는 노출된 상태로 두세요. 거즈는 이식편을 보호하고 안정시키면서 시각성을 향상시킵니다.
  2. 혈관 문합
    1. 슬리브 기법으로 11-0 나일론 봉합사를 사용해 기증자의 AA 표면 교합을 수혜자의 CA에 맞춰 기증자의 AA 끝과 끝을 맞춥니다. 과도한 긴장을 피하세요(그림 4D).
    2. 슬리브 기법으로 11-0 나일론 봉합사를 사용해 기증자의 피상 교합 자국을 수혜자의 EJV에 맞춰 기증자 PT를 끝에서 끝까지 맞물리는 법을 적용합니다. 과도한 장력을 피하세요(그림 4E).
    3. 원위 EJV 클램프를 제거하세요. 혈류를 회복하기 위해 근위 CA 클램프를 제거하세요(그림 4F). 이식편은 즉시 혈액으로 채워지고 붉어지며 1-2분 이내에 수축해야 합니다 (보조 영상 1). 수축성 회복을 돕기 위해 37 °C 따뜻한 생리식염수 몇 방울을 이식에 바르세요.
    4. 면봉으로 문합 부위를 부드럽게 압박하여 지혈을 유도하세요.
  3. 포켓 폐쇄
    1. 혈관과 기관을 비틀거나 압박하지 않고 자궁경부 주머니 안에 이식편을 안전하게 위치시키세요.
    2. 경추 절개를 6-0 흡수성 봉합사로 단순 중단 봉합으로 봉합합니다(보완 그림 1B). 수술 부위를 붕대로 덮지 마세요; 공간을 공기에 노출시키세요.

6. 수술 후 관리 및 모니터링

  1. 즉각적인 모니터링
    1. 동물을 따뜻한 회복실에 최소 1시간 이상 넣어두세요. 방향 감각 상실, 떨림, 보행 장애 등 비정상적인 행동을 관찰하세요.
    2. 체액 교체를 위해 0.3mL의 따뜻한 생리식염수를 피하 주사하세요. 수혜자를 영양 젤이 포함된 멸균된 새 케이지로 옮기세요. 이식된 동물은 개별적으로 집을 사육하며, 정상적인 이동성과 행동을 확인할 수 있는 완전한 회복 전까지는 집단 보호소로 돌려보내지 않습니다.
    3. 멜록시캄(5 mg/kg, 피하 투여)은 수술 후 72시간 동안 12시간마다 투여합니다. 외과의사와 수의사는 회복 기간 동안 동물을 정기적으로 검사합니다.
    4. 동물>이 20% 체중 감소, 수술 부위의 심한 부종, 감염 징후, 무기력, 기타 고통의 징후가 있을 경우 기관 지침에 따라 CO₂ 흡입을 사용하여 인도적으로 안락사하십시오.

7. 실험적 종점

  1. 조직 채취
    1. 조직병리학 또는 면역학 분석을 위해 예정된 시점에 이식편을 채취합니다. 유세포검사 및 조직병리학의 경우, 예비 실험을 바탕으로 이식편 맥박이 멈추기 2-3일 전에 조직을 채취하세요.
    2. 연구 설계에 따라 이식편, 비장, 림프절, 혈액 샘플을 채취하세요.
  2. 생존 분석
    1. 기록된 이식편 생존 시간, 즉 만져지는 맥박이 사라지는 날로 정의됩니다. 2차 자궁경부 심장 이식에서 장기 생존(관용)을 이식 후 50일 이상 지속되는 기증자 이식편 맥박으로 정의하며, 조직병리학적 결과 큰 괴사 부위가 없음을 확인한다.
    2. Kaplan-Meier 분석을 이용한 그래프 생존 곡선을 그래프 작성.

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결과

커프프레스 없는 이종 경추 이종성 심장 이식 수술의 개요는 그림 1에 나와 있습니다. 혈관 문합의 현미경 시점은 그림 1A에 나타나 있는데, 여기서 기증 상행 대동맥은 수혜자 경동맥과 끝에서 끝까지 맞물리고, 기증자 폐 줄기는 수혜자의 외경정맥과 끝에서 끝까지 맞물리고 있습니다. 그림 1B 는 이식편을 통한 혈류 패턴을 보여줍니다. 혈액은 수혜자 경동맥에서 기증자 상행 대동맥으로 들어가 관상동맥을 통해 심근을 관상동맥에 관류시키고, 관상동을 통해 우심방과 심실로 돌아와 폐간으로 배출되어 수혜자의 외경정맥으로 배출됩니다. 이 순환은 생리적 관상동맥 관류를 모방합니다.

시술에 필요한 미세수술 기구와 수술 장비는 그림 2

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토론

쥐 심장 이식 모델은 이식 면역학에 대한 이해를 진전시키는 데 중요한 역할을 해왔습니다. 원래의 이종성 복부 모델 개발 이후, 이 시스템들은 거부 반응의 세포 및 분자 기전을 특성화하고, 새로운 면역억제 요법을 시험하며, 기증자와 수혜자 균주 8,17,31 모두에서 유전적 변형을 평가하는 데 활용되어 왔습니다. 근친교배 및 유전자 변형 마우스를 사용할 수 있는 능력은 통제된 환경에서 면역 경로를 해부할 수 있는 독특한 기회를 제공합니다. 쥐 모델에서의 결과는 대동물의 전임상 연구와 초기 임상 시험 모두에 영향을 미쳤습니다32. 이 틀 안에서 쥐 2차 심장 이식 모델은 기증자 특이적 내성과 동종면역 기억 반응을 직접 평가할 수 있게 합니다. 여기서 설명한 자궁경부...

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공개 사항

저자들은 상충하는 이해관계가 없다고 선언한다.

감사의 글

이 연구는 미국심장협회의 보조금(23CDA1049388)의 지원을 받아 T.J.B.와 국립보건원(NIH)의 R01AI143887보조금으로 지원받았습니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
0.5ml 인슐린 시린지코비디엔8881600350피하 주사
0.9% 염화나트륨 주입BD1727170103정맥 주사
10-0 나일론 봉합사AROS 서지컬 인스트루멘트T04A10N07-13쥐 현미경 수술
11-0 나일론 봉합사에티콘9016G쥐 현미경 수술
1ml 주사기BD309659정맥 주사
30G X 1/2 바늘BD305106정맥 주사
3ml 주사기BD309657정맥 주사
6-0 나일론 봉합사에티콘J212H쥐 현미경 수술
60mm 세포 배양 플레이트팔콘353002접목 보존을 위해
컬러 알루미늄 케이스파인 사이언스 툴즈20330-04쥐를 위한 현미경 수술 기구 소독
코튼 팁피셔브랜드14-960-3M출혈 멈춰
듀몽 #5 겸자파인 사이언스 툴즈11251-20쥐 현미경 수술
에티카 XR 부프로페노르 (CIII) VIRX 제네릭스86084010030진통과;
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피베탈 알록세이트 (멜록시캄)피베탈21294589진통과;
휴대용 지혈 기기 키트맥케손 아르젠트42295143쥐 현미경 수술
링거' S 젖산 완충 용액써모 사이언티픽AAJ67572AP접목 보존을 위해
소동물 온열 패드K& 안부;HM10쥐 수술을 위해
트랜스포어 화이트 수술용 테이프3M7100115870시술 중에 쥐의 사지, 머리, 꼬리를 고정하세요
베살 클램프파인 사이언스 툴즈00398-02쥐 현미경 수술

참고문헌

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