비염증 조건에서 마우스 pks+ 대장균에 의한 정착

Claire McCartney; Manuela  M. Santos

doi:10.3791/70204

이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.

방법 논문

비염증 조건에서 마우스 pks+ 대장균에 의한 정착

347 조회수

⸱

DOI:

10.3791/70204

⸱

2026년 3월 10일

Claire McCartney¹ , Manuela M. Santos¹^,²

¹Nutrition and Microbiome Laboratory, Institut du Cancer de Montréal, Centre de recherche du Centre hospitalier de l’Université de Montréal (CRCHUM), ²Department of Medicine, Faculty of Medicine, Université de Montréal

이 논문에서

요약

이 프로토콜은 비염증 조건에서 pks+ 대장 균 쥐를 정착하는 데 필요한 절차와, 대변 내 pks+ 대장균 확장의 비침습적 확립 및 평가 방법을 설명합니다.

초록

pks+ 대장균은 특히 조기 발병 CRC를 가진 젊은 환자들 사이에서 대장암(CRC) 발생에 점점 더 연관되어 있습니다. pks+ 대장균 균주는 제노톡신 콜리박틴을 생성하는데, 이는 CRC와 관련된 세포 증식 및 분화 경로에서 이중 가닥 DNA 절단과 돌연변이를 일으키는 것으로 알려져 있습니다. 이 글에서는 박테리아 접종체 준비부터 집락화 검증까지 비염증 조건에서 쥐의 pks+ 대장 균 정착 방법을 자세히 설명합니다. 하룻밤 잠복 후, pks+ 대장 균 대장균 NC101 을 항생제 조건 상태의 마우스에 경구 관개 를 통해 투여합니다. 대변 내 콜로넌화는 유당 발효 그람 음성 콜로니 형성 단위(CFU)의 수를 정량화하고 정량적 PCR 증폭을 통해 평가합니다. 이 프로토콜을 사용하면, C57BL/6 마우스에 대 장균 NC101이 성공적으로 정착된 후, 식이섬유 이눌린 보충이 pks+ 대장균의 성장을 촉진했으며, 이는 CFUs 회복 증가, 장관박테리아과(Enterobacteriaceae ) 계열 개체 증가, clbP 수치 증가로 나타난다 진. 요약하자면, 이 모델은 CRC 발달에 관여하는 주요 병리체를 표적으로 하는 예방 및 치료 치료의 연구를 가능하게 합니다.

서론

장내 미생물군집은 숙주 건강과 질병에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있으며, 장내 미생물 군집 불균형, 즉 특정 잠재적 병원성 박테리아(pathobionts)의 과증식은 심혈관 질환, 염증성 장질환(IBD^{), 암 1} 등 여러 질병 상태의 특징으로 확인됩니다. pks+ 대장균은 IBD² 및 대장암(^CRC) 환자의 대장 조직 샘플에서 건강한 사람과 비교해 풍부하게 관찰되는 병원체입니다. pks+ 대장균의 종양 촉진 활성은 폴리케티드 합성효소(pks) 유전자 클러스터의 발현과 제노톡신 콜리박틴⁴의 생성과 연관되어 있습니다. 콜리박틴은 대장 상피세포의 핵으로 이동하여 이중 가닥 DNA 절단⁵와 CRC 관련 주요 경로⁶의 돌연변이를 형성합니다. pks+ 대장균 정착은 대장염 관련 CRC(CAC) 전임상 모델에서 종양 발생⁷과 종양 진행³....