실험실 기본 관리

생쥐와 쥐는 생물 의학 연구에 사용되는 동물의 90% 이상을 차지하기 때문에 이러한 유기체를 적절하게 돌보는 것이 실험 결과에 매우 중요합니다. 이러한 보살핌 절차는 선적 컨테이너에서 동물의 포장을 푸는 것부터 케이지 교체, 적절한 사육 조건 유지, 적절한 식단 제공 및 적절한 환경 보장에 이르기까지 시작됩니다. 실험실에서 대부분의 생쥐와 쥐에게 적용되는 일반적인 절차가 있지만 면역이 저하된 동물과 같은 일부 동물은 실험 목적으로 유지하기 위해 추가적인 주의가 필요합니다.

이 비디오는 면역 능력이 있는 동물과 면역이 저하된 동물 모두에 대한 표준 및 필수 관리 절차를 설명합니다. 마지막으로 과학자들이 다양한 연구 목적으로 이 지식을 어떻게 사용하는지 보여주는 몇 가지 예시 실험을 설명하겠습니다.

다른 기관에서 동물을 받는 것은 운송 중에 운송 상자가 병원체와 접촉할 수 있기 때문에 이미 시설 내에 수용되어 있는 동물에게 위험을 초래합니다. 따라서 선적 컨테이너의 포장을 풀 때 적절한 절차를 사용해야 합니다.

동물을 다루기 전에 적절한 개인 보호 장비(PPE)를 착용하는 것이 중요합니다. 착용해야 하는 최소 PPE는 실험실 가운, 장갑, 보안경, 먼지와 알레르기 항원에 대한 노출을 줄이는 수술용 마스크입니다. 다음 단계는 들어오는 동물을 위한 적절한 케이지를 선택하는 것입니다. 그런 다음 케이지에 적절한 침구와 둥지 재료를 제공하십시오. 그리고 준비된 케이지를 온도 조절이 가능한 수용실로 가져가 동물이 도착하기 전에 옮길 준비가 되도록 합니다.

배송이 도착하면 운송 상자를 수령실의 안전한 장소에 보관하십시오. 용기에 손상이 있는지 검사하고 외부 표면을 소독하여 유해한 병원체를 파괴하십시오. 제조업체의 권장 사항에 따라 소독제가 최소 15-30분 동안 상자와 접촉하고 있는지 확인하십시오. 그런 다음 컨테이너를 동물 이송 스테이션 또는 ATS에 놓습니다. 이 스테이션은 후드 내에서 필터링된 단방향 공기 흐름인 HEPA(고효율 미립자 공기)를 제공합니다. HEPA는 사용자를 알레르겐으로부터 보호하고 주변 실내 공기로부터 동물을 보호하여 오염 가능성을 최소화합니다. 다음으로 선적 컨테이너를 열고 설치류의 전반적인 건강을 평가합니다. 다치거나 아픈 것으로 보이는 동물을 기록해 두십시오. 그런 다음 이미 조립된 적절한 그룹 크기의 케이지에 넣고 케이지를 와이어 바 뚜껑으로 덮고 칸막이를 고정하여 두 영역을 만듭니다. 적절한 음식을 선택하여 한쪽에 놓고 두 번째 면은 열어 두어 공기 순환이 잘 되도록 합니다. 마지막으로, 동물을 자동 급수 랙에 올려 놓지 않는 경우 적절한 물 공급을 위해 물병을 추가하십시오. ATS는 각 세션이 끝날 때마다 소독해야 하며 소독할 때는 송풍기를 꺼야 합니다.

케이지 교체를 위해 두 개의 케이지(적절한 침구 재료가 있는 새 케이지와 동물이 있는 사용한 케이지)를 ATS에 배치합니다. 동물을 기존 우리에서 새 우리로 손으로 옮기거나 푹신한 집게를 사용하여 옮길 수 있습니다. 이 두 가지 방법 모두 이 컬렉션의 다른 비디오에서 논의되었습니다. 한 번에 하나의 동물 우리만 열 수 있음을 기억하십시오. 수컷 마우스 또는 새끼가 있는 암컷의 경우, 마우스의 둥지 영역을 클린 케이지로 옮기는 것이 동물의 전환을 돕는 것으로 입증되었습니다. 케이지 상단이 새 케이지에 배치되면 기존 케이지 상단에서 새 상단으로 음식을 옮기고 필요한 경우 더 많은 음식을 추가합니다. 그런 다음 배리어 상단을 놓고 케이지를 랙에 다시 놓습니다. 케이지 간 또는 그룹 간에 장갑을 교체하는 것이 좋습니다.

면역력이 저하된 동물의 포장 풀기 절차는 모든 것이 멸균되어야 하기 때문에 약간 다릅니다. 후드 내부의 송풍기는 사용하기 최소 24시간 전에 켜져 있는 것이 좋습니다. 면역 강화 동물과 마찬가지로 배송 도착 시 접수실에 소독액을 용기에 뿌리고 15-30분 동안 개봉하지 않은 상태로 두십시오. 면역이 저하된 마우스를 위해 지정된 ATS에서 동물을 조작하기 30분 전에 층류 후드에 70% 에탄올을 분사합니다. 이 포장 풀기 활동에는 두 사람이 참여하는 것이 이상적입니다 -- 한 사람은 무균 기술을 사용하여 동물을 다루기 위해 증기 멸균 가운과 이중 멸균 장갑을 착용한 멸균 기술자이고, 다른 한 사람은 깨끗한 격리 가운과 장갑 한 켤레를 착용하고 오염된 품목을 취급하는 비멸균 기술자입니다. 둘 다 마스크, 헤어 보닛 및 보안경을 착용해야 합니다.

후드 내부의 선적 컨테이너를 열기 전에 모든 소모품과 케이지를 여기에 넣고 외부에 알코올을 뿌립니다. 그리고 배송이 도착하면 받은 동물 상자를 후드에 넣고 70% 에탄올도 뿌립니다. 멸균 케이지에는 포장되어 증기 멸균된 표준 케이지 또는 공급업체의 방사선 조사를 사용하여 멸균된 일회용 장치의 두 가지 옵션이 있습니다.

멸균 식품을 개봉한 다음 운송 상자를 열어 포장 풀기 절차를 시작하십시오. 이 시점에서 핸들러는 첫 번째 멸균 장갑을 버려야 합니다. 다음으로, 비멸균 작업자는 멸균 케이지의 포장을 풀고 무균 상태로 동물 조련사에게 전달한 다음 보닛과 와이어 바 뚜껑을 제거하고 후드에 거꾸로 놓습니다. 그 후, 케이지의 시퍼 튜브는 후드에 위치한 스테이션에서 물로 채워집니다. 마지막으로, 동물 조련사는 동물을 우리에 넣고, 철사 막대 뚜껑으로 고정하고, 먹이를 추가하고, 보닛을 제자리에 놓습니다. 후드 송풍기는 멸균 환경을 유지하기 위해 항상 켜져 있어야 합니다. 마지막에는 비멸균 작업자가 후드에서 채워진 케이지를 제거하고 적절한 랙에 놓습니다. 그룹 간의 교차 오염 가능성을 방지하기 위해 동물 취급자는 각 선적 컨테이너 후에 장갑을 교체해야 합니다.

면역력이 저하된 동물의 케이지 교체를 위해 후드와 케이지 및 PPE를 준비하는 것은 이러한 동물의 포장을 푸는 것과 동일합니다. 그리고 전달 기술은 면역 능력이 있는 동물과 동일하지만 무균 상태입니다.

이제 필수 보살핌을 제공하는 또 다른 중요한 측면인 동물을 위한 적절한 주거 환경에 대해 논의해 보겠습니다. 생쥐와 쥐는 주로 침구 물질이 들어있는 단단한 바닥이있는 신발 상자 유형의 케이지에 수용됩니다. 일반적인 마우스 케이지는 75제곱인치의 바닥 공간을 제공하며, 이는 최대 5마리의 성인 마우스에 적합합니다. 반면에 쥐 케이지는 142제곱인치의 면적을 가지며 성인 쥐 2마리에게 적합합니다. 정적 케이지는 일반적으로 와이어 바 뚜껑으로 덮여 있으며 필터 재료는 케이지 상단 위에 보닛으로 추가됩니다. 개별 환기 케이지(IVC)에도 와이어 바 뚜껑과 보닛이 있지만 케이지로 공기 흐름을 제공하는 랙에 배치됩니다. 이렇게 하면 정적 케이지만큼 케이지를 자주 교체할 필요가 없어 면역력이 저하된 동물에게 도움이 될 수 있습니다.

모든 케이지 시스템에는 식량 및 물 공급이 제공됩니다. 동물 케이지 내에 모이통이 배치되거나 와이어 바 뚜껑의 일부가 식품 저장에 사용됩니다. 음식은 동물에 의해 더러워지지 않도록 놓아야 합니다. 물은 일반적으로 케이지 상단에 놓인 물병이나 동물 케이지에 내장된 구성 요소인 자동 급수 음용 밸브를 통해 공급됩니다. 음용 밸브 옵션의 경우, 케이지가 랙에 맞물릴 때 물은 동물 시설 전체에서 동물의 요구를 충족하도록 설계된 자동 급수 시스템을 위해 튜브로 운반됩니다.

실험실 동물의 관리 및 사용을 위한 가이드에는 모든 케이지 도구는 최소 2주에 한 번씩 소독해야 한다고 명시되어 있습니다. 일부 케이지 및 액세서리는 인클로저의 냄새와 암모니아 수준에 따라 더 자주 교체해야 할 수 있습니다.

이제 면역 능력이 있는 동물과 면역력이 저하된 동물을 위한 적절한 음식과 물 공급에 대해 이야기해 보겠습니다. 다양한 단백질, 탄수화물 및 지방 성분을 가진 상업적으로 이용 가능한 사료가 많이 있습니다. 이상적으로 사료는 단백질 15-19%, 탄수화물 44%, 지방 4-9%로 구성되어야 합니다. 면역력이 저하된 동물의 경우 사료가 살균되었는지 확인하십시오.

수돗물 또는 역삼투압, 즉 RO 물은 면역 능력이 있는 동물에게 사용할 수 있지만 면역 결핍 동물의 경우 물이 오염원이 될 수 있으므로 살균해야 합니다. RO 물 8리터에 12몰 염산 2방울을 첨가하여 물의 무균 상태를 유지하면 물을 pH 2.5-3으로 산성화하고 박테리아 성장을 제한할 수 있습니다. 그런 다음 개별 병에 물을 붓고 알루미늄 호일로 덮습니다. 시퍼 튜브가 있는 병 뚜껑을 오토클레이브 백에 따로 넣고 스팀 멸균을 위해 모든 것을 오토클레이브에 넣습니다.

이제 동물 관리에 필수적인 표준 환경 조건에 대해 논의해 보겠습니다.

우리 수준에서, 사회주택은 과학적으로 정당화되거나 동물이 다른 모든 동물과 양립할 수 없는 경우를 제외하고는 필수적이다. 종이 오두막과 둥지 재료로 환경을 풍요롭게 하면 동물들이 둥지를 짓고 굴을 파는 것과 같은 종 특유의 행동을 보일 수 있으며, 이는 차례로 스트레스 수준을 낮추고 동물의 전반적인 복지를 증가시킵니다. 둥지 재료는 또한 같은 우리에 있는 여러 수컷 쥐의 수용을 돕는 진정 페로몬으로 포화된 수면 공간을 제공합니다. 앞서 언급했듯이 케이지 변경 시 둥지 영역을 깨끗한 케이지로 옮기면 동물이 새로운 환경에 도입될 때 특히 수컷의 공격성을 방지하는 데 도움이 됩니다. 기분을 잃은 누드 동물의 경우, 체온 조절을 돕기 위해 케이지에 추가 침구와 파쇄된 종이 유형의 둥지 재료를 제공하는 것을 고려해야 합니다.

실내 수준에서 쥐와 쥐의 온도는 68도에서 79도 사이여야 합니까? F. 실내 습도 수준은 30-70%가 되어야 하며, 낮은 수준은 링테일로 알려진 상태를 초래할 수 있습니다. 세 번째 방 매개변수는 조명입니다. 여기에는 빛의 강도와 주기가 포함됩니다. 일반적으로 동물실은 12시간 조명/12시간 다크 주기로 설정되어 있습니다. 조명 강도는 방의 활동에 따라 달라져야 합니다. 기술자가 작업할 때 더 높은 조명 수준을 사용할 수 있습니다. 그러나 모든 활동이 끝나면 약 325lux로 낮춰야 합니다. 마지막으로, 실내 공기 흐름도 신중하게 제어해야 합니다. 매시간 10% 신선한 공기의 최소 15-100회 공기 변화가 발생해야 합니다. 이것은 동물 방의 미생물과 냄새를 줄입니다.

마지막으로, 연구자들이 실험에서 실험실 동물의 사육, 식단 및 환경 선호도에 대한 지식을 어떻게 사용하고 있는지 살펴보겠습니다.

앞서 논의한 바와 같이, 실험용 동물들은 일반적으로 스트레스를 줄이는 둥지를 짓는 행동을 보이며, 연구자들은 이를 동물 복지의 지표로 사용해왔다. 이 특정 실험에서 과학자들은 편향되지 않은 시스템을 개발하여 둥지가 만든 것에 점수를 매긴 다음 이를 사용하여 둥지를 짓는 행동에 대한 주변 온도의 영향을 연구했습니다. 보시다시피 온도 상승은 점수의 현저한 하락을 일으켜 동물 복지에서 주변 온도의 역할을 강조합니다.

생쥐와 쥐가 탄수화물을 좋아한다는 점을 감안할 때, 연구자들은 동물의 운동 기능을 테스트하기 위해 다양한 모양의 사료를 사용했다. 여기에는 다양한 유형의 식품 취급 작업 중 민첩성을 분석하고 외과적 또는 약리학적 개입에 따른 도달 행동을 조사하는 것이 포함됩니다.

마지막으로, 생쥐와 쥐는 야행성이며 조명이 켜진 곳을 선호하지 않는 것으로 알려져 있습니다. 과학자들은 이 지식을 사용하여 이 종의 불안을 연구할 수 있는 환경을 조성합니다. 예를 들어, 이 연구에서는 동물을 단순한 열린 들판에 도입하고 야생형 마우스와 녹아웃 마우스가 내부 및 외부 필드 영역에서 보낸 시간을 연구하여 불안과 같은 행동에 대한 유전자 넉다운의 영향을 분석했습니다.

생쥐와 쥐를 위한 필수 치료 절차에 대한 JoVE의 소개를 방금 시청했습니다. 이제 이러한 동물의 환경과 취급이 동물의 건강에 해를 끼치지 않도록 하기 위해 취해야 하는 조치에 대해 더 잘 이해해야 하며 연구자가 다양한 과학적 목표를 달성하기 위해 이러한 매개변수를 수정할 수 있는 방법도 알아야 합니다. 언제나 그렇듯이 시청해 주셔서 감사합니다!