Name: 도설 Forebrain의 Explants에 대한 성장 인자 - 코팅 비드 배정 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-01-30T00:00:00.000+00:00
Duration: 15 min 7 s
Description: 배우세요 발달 중인 대뇌피질 explants에 성장인자 코팅 비드를 배치하는 방법을. 젤 비드와 헤파린 아크릴 비드를 이용한 이 기술은 신경발생 연구에서 유전자 발현을 유도하는 데 활용됩니다.

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도설 forebrain의 explants에 대한 성장 인자 - 코팅 비드 배정

Growth Factor-Coated Bead Placement on Dorsal Forebrain Explants

이 동영상은 개발 대뇌 피질의 explants에 성장 인자와 함께 코팅했습니다 구슬을 준비하고 삽입을위한 두 가지 방법을 보여줍니다. 이 구슬은 forebrain의 explants 같은 신경 조직을 개발 공간 제한 유전자 발현을 유도하는 데 사용할 수 있습니다. 방법은 Affi - 젤 구슬과 헤파린 acryllic 구슬을 모두 사용 주어집니다.

도설 Forebrain의 Explants에 대한 성장 인자 - 코팅 비드 배정

이것들이 제가 사용할 첫 번째 유형의 비드입니다. 바로 젤 블루 젤 비드이며, 질감이 부드럽습니다.따라서 이 비드들을 X 위에 배치하기 위해 마우스 피펫 끝에 풀드 글라스 피펫을 연결하여 사용해야 합니다. 두 번째로 시연할 비드는 헤파린 아크릴 비드입니다. 이것들은 단단한 유형의 비드이며, 텅스텐 바늘을 사용하여 이 비드들을 X 외식물 위에 배치하겠습니다. 여기 있는 것들은 분젠 버너를 사용하여 먼저 녹일 글라스 모세관 튜브들입니다.그다음, 더 미세한 팁을 만들기 위해 관을 당겨줍니다. 모세관을 불꽃 중앙에 두고 관이 녹을 때 천천히 회전시킵니다. 이때 관이 부드러워지는 것이 느껴집니다.불꽃에서 꺼낸 다음 잡아당기겠습니다. 다이아몬드 팁 펜으로 모세관에 선을 그어 깨끗하고 직선으로 절단될 수 있도록 하겠습니다. 그 후 끝부분을 화염 연마하여 정리하겠습니다.모세관 끝을 다듬고 입구를 좁게 만들어, 비드가 모세관을 그냥 통과하지 않고 포집될 수 있도록 불꽃에 통과시키겠습니다. 주의할 점은 모세관을 불꽃 속에 너무 오래 두어서는 안 된다는 것입니다. 매우 빠르게 통과시켜야 하며, 그렇지 않으면 입구가 밀봉되어 버립니다.화염에 의해 팁 끝부분이 밀봉되는 경우가 많기 때문에 보통 여러 개를 만들어 둡니다. 이를 조절하기가 어렵기 때문에 여러 개를 제작하는 것이 좋습니다. 이것은 팁 끝부분이 밀봉된 사례입니다.이것은 성능이 좋은 피펫의 예시입니다. 이 에펜도르프 튜브에 아가로스 비드 250 µL를 분주했으며, 비드가 담겨 있던 azi 용액을 제거하기 위해 1 mL의 PBS로 5회 세척하겠습니다. 비드가 가라앉을 때까지 약 3분 동안 기다린 후, 과량의 PBS를 흡입하여 제거하고 이 과정을 4회 더 반복하겠습니다.비드가 아직 완전히 가라앉지 않았습니다. 비드가 가라앉으면 과량의 PBS를 흡입하여 제거하고 이 과정을 4회 반복하겠습니다. 마지막으로 300 µL의 PBS를 추가하여 비드 작업을 시작하겠습니다. 이것은 표준 마우스 피펫이며, 제가 뽑아낸 모세관을 피펫의 약 3분의 1 높이까지 밀어 넣겠습니다.먼저, 피펫을 PBS로 채웁니다. 일반적으로 모세관 현상만으로도 충분히 채워집니다. 여기 30mm 배양 접시의 뚜껑이 있으며, 그 위에 파란색 비드 한 방울을 떨어뜨려 놓았습니다.그 옆에는 PBS 한 방울이 있습니다. 그리고 여기 디쉬에는 5 µL의 단백질 용액 방울이 있습니다. 이 경우에는 BN P4를 사용했지만, 마이크로

growth-factor-coated-bead-placement-on-dorsal-forebrain-explants

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

성장 요인과 단백질의 다양한 세포가 개발하는 동안 다른 세포 운명을 맡을 유도하는 상호 작용. 여기 E2.5 여자의 배아에 구슬을 배치하여 개발에 서로 다른 단백질 간의 상호 작용 가능성을 해결하기 위해 비켜 준비의 사용을 보여줍니다.

초기 치킨 태아의 성장 팩터 - 코팅 비즈 배치

우리는 병아리 E4 statoacoustic 신경절 및 E6 척수의 explants을 해부하다 문화하는 방법을 보여줍니다. Explants는 24 시간 동안 3D 콜라겐 젤의 혈청 무료 조건에서 양식입니다. Neurite 대응은 성장 인자 - 보충 매체와 단백질 코팅 비즈와 함께 테스트됩니다.

Neurite 가지의 Assays에 대한 해부와 칙 Statoacoustic 신경절과 콜라겐 젤에서 척수의 Explants의 문화

에서 신경 Explant의 문화<em&gt; Xenopus laevis</em

이 비디오는 등쪽 뿌리 신경절 이식과 슈반 세포의 공동 배양 모델을 보여줍니다. 공동 배양 조건에서 아스코르브산은 슈반 세포가 수초화 형태로 분화되는 것을 촉진합니다. 슈반(Schwann) 세포는 축삭돌기를 여러 번 감싸 신경 기능에 필수적인 미엘린 수초(myelin sheath)를 만듭니다.

Neuron Myelination을 위한 Schwann Cells와 Dorsal Root Ganglion Explant의 공동 배양

이 프로토콜은 관련 개선 explant 절차를...

예 자궁 Electroporation 및 전체 반구의 Explants : 초기 두피 개발 연구 간단한 실험 방법

배아 신경 세포는 신경 튜브의 심실 영역에서 태어 났지만, 적절한 목표에 도달하기 위해 마이그레이션됩니다. 얼굴 branchiomotor (FBM) 신경 세포는 신경 세포의 이동을 연구하기위한 유용한 모델이다. 이 프로토콜은 FBM 이동을 조절하는 메커니즘을 조사하기 위해 마우스 배아 hindbrains의 wholemount 생체 문화를 설명합니다.

마우스 후뇌<em&gt; 전의 VIVO</em&gt; 문화 얼굴 Branchiomotor 신경 세포의 마이 그 레이션을 연구하는

성장 인자 또는 신호 전달 경로의 특정 억제제에 적신 구슬을 발달 중인 배아에 접목함으로써 생체 내에서 그 효과를 직접 테스트할 수 있습니다. 이 프로토콜에서는 비드를 사지 싹에 이식하여 이러한 분자가 유전자 발현 및 신호 전달에 미치는 영향을 확인합니다.

유전자 발현에 영향을 미치는 신호 전달 진학을 확인하기 위해 닭 배아 사지 개발에 구슬의 접목

제노푸스 배아에서 배반구의 지붕에 있는 세포는 만능이며 다양한 조직을 생성하도록 프로그래밍할 수 있습니다. 여기에서는 양서류 배반구 지붕 외식을 분석 시스템으로 사용하여 초기 신경 발달의 주요 생체 내 및 체외 기능을 조사하는 프로토콜에 대해 설명합니다.

줄기 세포처럼<em&gt; Xenopus의</em&gt; 배아의 Explants는 초기 신경 발달의 특징을 연구하는<em&gt; 체외</em&gt; 및<em&gt; 생체</em

상피에서 중간엽으로의 전이(EMT)는 암이 침습적이 될 수 있도록 합니다. EMT를 조사하기 위해 혈청과 효소가 없는 신경줄기세포(NSC) 기반 체외 모델을 설명합니다. 이 표준화된 시스템을 통해 세포 이동, 유전자 및 단백질 발현에 대한 정량적 및 정성적 평가를 수행할 수 있습니다. 이 모델은 신약 개발에 적합합니다.

약 발견에 적합 EMT 조사를위한 효소 - 및 혈청이없는 신경 줄기 세포 배양 모델

여기서 우리는 인간 신경교종 세포(hGC) 이동을 실시간으로 연구하기 위한 전 생체내 혼합 단층 배양 시스템을 제시한다. 이 모형은 구획화된 약실 내의 hGCs와 myelinated 및 비 myelinated 축색둘다 사이 상호 작용을 관찰하는 기능을 제공합니다.

등쪽 뿌리 신경절 축삭-올리고젠드로시트 공동 배양에 대한 인간 신경교종 세포 이동의 실시간 모니터링

배우세요 발달 중인 대뇌피질 explants에 성장인자 코팅 비드를 배치하는 방법을. 젤 비드와 헤파린 아크릴 비드를 이용한 이 기술은 신경발생 연구에서 유전자 발현을 유도하는 데 활용됩니다.

도설 Forebrain의 Explants에 대한 성장 인자 - 코팅 비드 배정

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