Name: 전기 분무 이온화 질량 분광법을 사용하여 효모 Lipidome의 양적 평가 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-08-21T12:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 43 s
Description: 학습하세요 전기 분무 이온화 질량 분광법을 사용한 효모 지질체의 양적 분석 방법을. 유리구슬 세포 파쇄와 클로로포름-메탄올 추출로 지질을 분리하고, 내부 표준을 이용해 민감도와 분석 속도를 높인 선진 기술입니다.

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우리는 귀중한 조언, 토론 및 기술 지원 알랭 테시어에 감사하고 있습니다. 우리는 뛰어난 서비스 콩코디아 대학에서 질량 분석법의 생물 학적 응용 프로그램을위한 센터를 인정합니다. 이 작품은 CIHR과 캐나다의 NSERC에서 보조금에 의해 지원되었다. VIT는 CIHR 새로운 인베스티게이터와 게놈의 콩코디아 대학 연​​구 위원장, 세포 생물학 및 노화입니다.

재료 및 방법 <ol><li> 효모 변종과 성장 조건 야생 형 변형 BY4742는 (MATα his3Δ1 leu2Δ0 lys2Δ0 ura3Δ0) (1 % 효모 추출물, 펩톤 2 %, 2 % 포도당) 풍부한 YEPD 매체에서 재배되었다. 전지는 30 ° C 회전이 5시 1분의 &quot;플라스크 볼륨 / 볼륨 매체&quot;비율 Erlenmeyer flasks의 200 rpm으로 잡고 교양되었습니다. </li><li> 지질 추출을위한 효모 세포의 스토리지 <ol><li> 세포의 50 ML 문화 5 분 동안 3,000 XG에서 원심 분리에 의해 수확했다. </li><li> 찬물로 두 번 씻어. <ol style=" list-style-type:lower-alpha;"><li> 25 ML 얼음 냉수에 Resuspend 펠릿 </li><li> 5 분 3,000 XG에 원심 분리기의 펠릿 세포 </li></ol></li><li> eppendorf 튜브에 펠렛 및 전송을 Resuspend </li><li> 원심 분리에 의해 펠렛, 2 분 16,000 XG, 사용할 때까지 -80 ° C에서 뜨는 및 동결을 제거하십시오. (우리는 이소 프로필 알코올의 비이커를 사용, 액체 질소도 사용할 수있는 -80 냉동실에 보관) </li></ol></li><li> 시약 생명 공학 등급 클로로포름과 메탄올은 시그마 - 알드리치에서 있었다. 자유 지방산과 triacylglycerols는 Larodan (말뫼, 스웨덴)에서 구입했다. phospholipids의 다양한 종류 - phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, phosphatidylinositol, phosphatidylserine, phosphatidic 산성 및 cardiolipins 포함하여 - 아반티 북극 지질 (엘라 베스터, AL, 미국)에서 얻은되었습니다. 테플론 늘어선 모자와 고속 유리 원심 분리기 튜브는 피셔에서 있었다. </li></ol> 지질 추출 이것은 블라과 다이어 8 시까지 설명한 프로토콜의 수정입니다. 추출 lipids로 모든 조작은 유리 pipettes이나 주사기를 사용하여 완료해야합니다, 그들은 클로로포름과 접촉하면 플라스틱이 큰 배경 신호를 생성합니다. MeOH - - 클로로포름에 대한 H 2 단계 3 O 및 2:2:1.8 - MeOH - H 2 O 7 단계에서 보존 아르 클로로포름에 대한 1:2:0.8의 비율이로 정확한 볼륨은 한 중요하지 않습니다. <ol><li> 얼음처럼 차가운 소주 H 2 O.의 1.6 ML에 냉동 세포를 Resuspend </li><li> 고속 유리 원심 튜브에 세포 현탁액의 1.6 ML을 전송합니다. </li><li> 클로로포름과 MeOH (1시 2분) 믹스와 세포 현탁액을 유리 구슬의 0.8 ML 6 ML을 추가합니다. </li><li> 유리 구슬 1 분 두 배와 함께 소용돌이 세포 현탁액을. </li><li> 클로로포름 2 ML을 추가하고 부드럽게 섞는다. </li><li> 가끔 혼합과 함께 실온에서 5 분 알을 품다. </li><li> 소주 H 2 O 2 ML을 추가하고 부드럽게 섞는다. </li><li> 가끔 혼합과 함께 실온에서 5 분 알을 품다. </li><li> 상온에서 3,000 XG에서 5 분 원심 분리기. </li><li> 새로운 고속 유리 원심 튜브에 전체 액상를 수집합니다. </li><li> 9 단계에서 세포 펠렛을 클로로포름 3.2 ML를 추가합니다. </li><li> 1 분 와동을 차례로 두 번. </li><li> 상온에서 3,000 XG에서 5 분 원심 분리기. </li><li> 10 단계에서 액상으로 뜨는을 추가합니다. </li><li> 상온에서 3,000 XG에서 5 분 원심 분리기. </li><li> 상단 (수성) 단계를 폐기하고 새로운 고속 유리 원심 관에 낮은 (유기) 단계를 전송합니다. </li><li> 상온에서 3,000 XG에서 5 분 원심 분리기. </li><li> 유리관에 전체 표면에 뜨는를 전송하고 질소하에 건조. </li><li> -20 ° C. 500 클로로포름의 μl와 저장소에있는 지질 필름을 디졸브 </li></ol> 질량 분석법에 의해 lipids 분석 0.1 %로 클로로포름 (1:1) (V / V) 암모늄 수산화 - 클로로포름의 지질 기준 주식 혼합은 표 1과 같은뿐만 아니라 MeOH의 재고 솔루션마다 미리 준비를해야합니다. <ol><li> 이전 주사로, 표 1에서 제공하는 lipids의 표준 혼합 10 μl와 샘플 10 μl을 결합. 1시 1분 클로로포름의 200μL의 경우 : 0.1 % NH 4 OH와 메탄올. <ul><li> 샘플 비율 표준은 필요에 따라 변경할 수 있습니다. </li></ul></li><li> 1 μl / 분 유량에서 나노 전기 분무 소스 운영 갖춘 Micromass Q - TOF이 질량 분석기를 사용하여 lipids를 해결합니다. <ul><li> 정확한 악기 매개 변수는 악기에서 악기로 달라질 수 있습니다. 나노 전기 분무 소스 갖춘 Micromass Q - ToF 2 (워터스, 밀퍼드, MA, 미국)의 설정 표 2를 참조하십시오. 우리는 질량 분석계의 Q - TOF 유형의 고해상도의 이점을 촬영했지만, 그것은 필수 요구하지 않습니다. </li></ul></li><li> 취득 후 질량 스펙트럼은 smoothed 있으며, 배경 빼는와 중심 후 정상 목록은 Excel로 내보 냈습니다. 각 지질 클래스의 봉우리는 다음의 내부 기준에 정상화됩니다. 응용 프로그램에 따라, 그것은 deisotoping 및 deconvolution 등 추가로 후처리 등을 수행 할 필요가있을 수 있습니다. </li></ol> 표 1. 내부 지질 기준, 그들의 농도에표준 믹스, 그들의 분석을위한 MS 모드. <table border="1" cellspacing="0" cellpadding="0"><tbody><tr><td> 지질 클래스 </td><td> 표준 체인 구성 </td><td> 표준 질량 </td><td> 농도 (μg / ML) </td><td> MS 모드 </td></tr><tr><td> Phosphatidic 수 소산 </td><td> 14시 / 14시 </td><td> 591.40 </td><td> 100 </td><td> 부정 </td></tr><tr><td> Phosphatidylethanolamine </td><td> 14시 / 14시 </td><td> 634.45 </td><td> 200 </td><td> 부정 </td></tr><tr><td> Phosphatidylinositol </td><td> N / A </td><td> N / A </td><td> N / A </td><td> 부정 </td></tr><tr><td> Phosphatidylserine </td><td> 14시 / 14시 </td><td> 622.37 </td><td> 40 </td><td> 부정 </td></tr><tr><td> Cardiolipin </td><td> 4x14 : 0 </td><td> 619.92 </td><td> 100 </td><td> 부정 </td></tr><tr><td> 자유 지방산 </td><td> 19시 </td><td> 297.28 </td><td> 100 </td><td> 부정 </td></tr><tr><td> Phosphatidylcholine </td><td> 14시 / 14시 </td><td> 650.48 </td><td> 100 </td><td> 긍정적인 </td></tr><tr><td> Triacylglycerols </td><td> 13시 / 13시 / 13시 </td><td> 698.63 </td><td> 200 </td><td> 긍정적인 </td></tr></tbody></table> 표 2. Micromass Q - ToF 2 (워터스, 밀퍼드, MA, 미국)의 인스 트루먼트 설정은 나노 전기 분무 소스와 함께 갖추고 있습니다. <table border="1" cellspacing="0" cellpadding="0"><tbody><tr><td></td><td> 유량 </td><td> 콘 전압 </td><td> 모세관 전압 </td><td> 충돌 가스 </td></tr><tr><td> 긍정 모드 </td><td> 1μl/min </td><td> -28 V </td><td> 3.0 KV </td><td> 10 </td></tr><tr><td> 부정 모드 </td><td> 1μl/min </td><td> 30 V </td><td> -3.2 KV </td><td> 10 </td></tr></tbody></table>

<ol><li>Cao, H., Gerhold, K., Mayers, J. R., Wiest, M. M., Watkins, S. M., Hotamisligil, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+a+lipokine%2C+a+lipid+hormone+linking+adipose+tissue+to+systemic+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Identification of a lipokine, a lipid hormone linking adipose tissue to systemic metabolism.</a> Cell. 134, 933-944 (2008).</li>
<li>Claypool, S. M., Oktay, Y., Boontheung, P., Loo, J. A., Koehler, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiolipin+defines+the+interactome+of+the+major+ADP%2FATP+carrier+protein+of+the+mitochondrial+inner+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Cardiolipin defines the interactome of the major ADP/ATP carrier protein of the mitochondrial inner membrane.</a> J. Cell Biol. 182, 937-950 (2008).</li>
<li>Guo, T., Gregg, C., Boukh-Viner, T., Kyryakov, P., Goldberg, A., Bourque, S., Banu, F., Haile, S., Milijevic, S., San, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+signal+from+inside+the+peroxisome+initiates+its+division+by+promoting+the+remodeling+of+the+peroxisomal+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">A signal from inside the peroxisome initiates its division by promoting the remodeling of the peroxisomal membrane.</a> J. Cell Biol. 177, 289-303 (2007).</li>
<li>Russell, S. J., Kahn, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endocrine+regulation+of+ageing%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Mol.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Endocrine regulation of ageing.</a> Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 8, 681-691 (2007).</li>
<li>Czabany, T., Athenstaedt, K., Daum, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis%2C+storage+and+degradation+of+neutral+lipids+in+yeast%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim.+Biophys.+Acta%22%5BJournal%5D)">Synthesis, storage and degradation of neutral lipids in yeast.</a> Biochim. Biophys. Acta. 1771, 299-309 (2007).</li>
<li>Br&uuml, gger, Erben, B., Sandhoff, G., Wieland, R., &amp, F. T., Lehmann, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+analysis+of+biological+membrane+lipids+at+the+low+picomole+level+by+nano-electrospray+ionization+tandem+mass+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Quantitative analysis of biological membrane lipids at the low picomole level by nano-electrospray ionization tandem mass spectroscopy.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 94, 2339-2344 (1997).</li>
<li>Schneiter, R., Brügger, B., Sandhoff, R., Zellnig, G., Leber, A., Lampl, M., Athenstaedt, K., Hrastnik, C., Eder, S., Daum, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrospray+ionization+tandem+mass+spectrometry+%28ESI-MS%2FMS%29+analysis+of+the+lipid+molecular+species+composition+of+yeast+subcellular+membranes+reveals+acyl+chain-based+sorting%2Fremodeling+of+distinct+molecular+species+en+route+to+the+plasma+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Electrospray ionization tandem mass spectrometry (ESI-MS/MS) analysis of the lipid molecular species composition of yeast subcellular membranes reveals acyl chain-based sorting/remodeling of distinct molecular species en route to the plasma membrane.</a> J. Cell Biol. 146, 741-754 (1999).</li>
<li>Bligh, E. G., Dyer, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rapid+method+of+total+lipid+extraction+and+purification%5BTitle%5D)+AND+%22Can.+J.+Biochem.+Physiol%22%5BJournal%5D)">A rapid method of total lipid extraction and purification.</a> Can. J. Biochem. Physiol. 37, 911-917 (1959).</li>
</ol>

이 방법은 쉽게 사용할 수, 저렴한 재료를 사용하여 효모 lipidome의 급속한 양적 평가를 수 있습니다. 이러한 lipids가 수산화 리튬과 수산화 암모늄을 대체하여 확인할 수 있지만이 방법은, diacylglycerols, ergosterols 및 ergosteryl 에스테르를 제외한 효모 세포에있는 지질의 종류 대부분의 신분증을 수 있습니다. 설명한 방법은 농도 선형성은 진​​도 2 ~ 3 주문 (지질 종류에 따라 다름) 이상의 확산과 함께 μg / ML로 낮은 농도에서 지질 식별 및 부량 수 있습니다. phosphatidylinositol에 적합한 기준이 상업적으로 사용할 수 없습니다 있지만,이 인지질의 서로 다른 분자 형태는 다른 인지질 수종에 대한 표준을 사용하여 평가하실 수 있습니다.

전기 분무 이온화 질량 분광법을 사용하여 효모 lipidome의 양적 평가

A Quantitative Assessment of The Yeast Lipidome using Electrospray Ionization Mass Spectrometry

Lipids은 biomolecules의 주요 클래스 중 하나이며 중요한 역할 막 역학, 에너지 저장을 재생하고, 신호<sup&gt; 1-4</sup&gt;. 신진 효모<em&gt; Saccharomyces cerevisiae</em&gt; 주석 게놈 매우 간단한 lipidome있는 유전자와 화학적으로 manipulable 단세포 진핵세포 생물은 다세포 eukaryotes 다양한 지질 종류의 생물 학적 기능을 연구를위한 귀중한 모델입니다<sup&gt; 2,3,5</sup&gt;.<em&gt; S. cerevisiae</em&gt; 체인 주로 16 또는 18 탄소 원자와 하나 영 길이 또는 unsaturation 중 하나 학위 lipids 10 주요 클래스를 가지고<sup&gt; 6,7</sup&gt;. 지질 식별 및 부량에 대한 기존 방법 - 같은 고성능 액체 크로마 토그래피, 박막 크로마 토그래피, 형광 현미경, 그리고 MS의 다음 기체 크로마 토그래피로이 - 잘 설립하지만, 낮은 감성, lipids의 충분 별도의 다양한 분자 형태가 이전의 지질 derivitization를 필요로 가지고 있습니다 분석하거나, 꽤 시간이 소요될 수 있습니다. 여기 우리는 효모 세포에서 lipids의 전체 보완의 식별 및 부량에 대한 조사 스캔 ESI / MS를 사용하여 이러한 고유의 한계를 해결하기 위해 실험적인 접근 방법에 대한 자세한 설명을 제시한다. 설명한 방법은 크게함으로써 데이터 수집 과정을 가속, 효모 세포에서 발견한 복잡한 지질 혼합물의 분리 색층을 필요로하지 않습니다. 이 방법은 G / ML로 낮은 농도에서 지질 식별 및 부량을 활성화하고 성공적으로 전체 효모 세포 및 정화 organelles의 lipidomes를 평가에 적용되었습니다. 지질 분석이 방법을 사용하기위한 전체 효모 세포에서 Lipids 추출 두세 시간 정도 소요됩니다. 이것은 나노 전기 분무 소스 갖춘 Q - TOF 질량 분석기를 추출하여 건조 lipids 각각의 예제를 실행하기 위해 다섯 10 분 걸립니다.

우리는 조사 스캔 전기 분무 이온화 질량 분광법 (ESI / MS)를 사용하여 효모의 수많은 지질 수종을 식별하기위한 새로운 양적 lipidomics 방법을 설명합니다. 이 방법은 현재 lipids, 감도 및 속도의 다양한 분자 형태를 해결하는 능력 지질 식별 및 부량 사용할 방법을 초과했습니다.

전기 분무 이온화 질량 분광법을 사용하여 효모 Lipidome의 양적 평가

지질은 주요 생체분자 클래스 중 하나이며 막 역학, 에너지 저장 및 신호 전달에서 중요한 역할을 합니다1-4. 출아 효모는...

본 프로토콜을 통해 효모 지질 층의 주요 성분을 빠르게 분석할 수 있습니다. 먼저 효모 세포를 수확하고 세척하는 과정으로 시작합니다. 세척된 세포를 클로로포름과 메탄올을 1:2 비율로 혼합한 용액에 넣고 유리 비드로 용해시킵니다.클로로포름과 물을 첨가하여 두 상을 분리합니다. 유기상을 수집하여 건조시킨 후, 질량 분석 전 보관을 위해 지질 막을 클로로포름에 녹입니다. 추출된 지질을 암모늄 하이드록사이드가 포함된 클로로포름과 메탄올에 희석하고, 내부 표준물질 혼합물을 첨가합니다.이제 지질 용액을 질량 분석기에 직접 주입할 수 있습니다. 안녕하세요, 저는 콩코르디아 대학교 생물학과 블라디미르 테코 연구실의 사이먼 보크입니다. 오늘은 질량 분석법을 이용하여 효모 지질을 정량하는 방법을 보여드리겠습니다.본 실험실에서는 다양한 성장 조건에 따른 효모 지질의 변화를 연구하기 위해 이 절차를 사용합니다. 그럼 시작하겠습니다. 이 절차를 시작하려면, 이전에 준비한 냉동 효모 펠릿을 1.6 milliliters의 ice-cold 증류수에 재현탁하고, 세포 현탁액 1.6 milliliters를 고속 유리 원심분리 튜브로 옮깁니다.이 절차 전반에 걸쳐 추출된 지질을 다루는 모든 조작은 유리 피펫이나 주사기를 사용하여 수행해야 합니다. 플라스틱은 강한 배경 신호를 생성하므로, 플라스틱이 클로로포름과 접촉하지 않도록 주의하십시오. 세포 현탁액에 1:2 비율의 클로로포름-메탄올 혼합액 6mL와 유리 비즈 0.8mL를 에이노르 튜브(einor tube)에 넣어 추가하여 지질 추출을 시작하십시오. 클로로포름, 메탄올, 물에 현탁된 효모의 비율이 1:2:0.8로 유지된다면 정확한 부피는 중요하지 않습니다. 볼텍싱하십시오.세포 현탁액과 유리 구슬을 1분씩 두 번 혼합한 후, 2 mL의 클로로포름을 추가하고 부드럽게 혼합한 다음 상온에서 가끔씩 섞어주며 5분 동안 배양합니다. 5분간의 배양 후, 2 mL의 증류수를 추가하고 부드럽게 혼합합니다. 그런 다음 다시 상온에서 가끔씩 섞어주며 5분 동안 배양합니다.여기에서도 특정 부피보다는 클로로포름, 메탄올, 물의 비율을 2:2:1.8로 유지하는 것이 더 중요합니다. 두 번째 배양이 완료되면, 상온에서 3000 Gs로 5분간 원심분리하고, 이 1차 추출물에서 상층액을 모두 새 고속 유리 원심분리 튜브에 수집한 후, 남은 세포 펠렛에 3.2 mL의 클로로포름을 첨가하여 2차 지질 추출을 수행합니다.클로

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생물학

여기 Saccharomyces cerevisiae의에서 단백질 단지를 식별하기위한 새로운 양적 proteomics 기술을 설명합니다. 본 연구에서는, 우리는 높은 특이성과 ER 단백질 Scs2p의 바인딩 파트너를 식별하는 탠덤 질량 분석계 다음 친화 정화와 함께 SILAC 방법을 사용했습니다.

S. cerevisiae의의 양적 proteomics와 단백질 단지의 식별

cryolysis, 요소의 solubilziation, HILIC 분류 및 phosphorylated 펩티드의 아이맥 농축을 사용하여 양적 인산화 과정에 대한 설명.

지방산의 정량 Phosphoproteomics은 자극 Saccharomyces cerevisiae</em

지질 방울은 C 형 간염 바이러스 (HCV) 등 여러 가지 병원균의 복제에 중요한 소기관이다. 우리는 관련 단백질의 양적 질량 분석에 대한 지질 방울을 분리하는 방법을 설명; 그것은 바이러스 감염, 환경 스트레스, 또는 약물 치료와 같은 조건의 다양한에서 사용할 수 있습니다.

양적 질량 분광법 분석을위한 지질 물방울 절연

여기에서, 우리는 핵분열과 신진 효모 세포의 형광 현미경 심상에 있는 지질 방울의 자동적인 탐지 그리고 정량적인 설명의 MATLAB 구현을 제시합니다.

자동 이미지 처리를 사용하여 핵분열 및 신진 효모의 지질 방울 함량 분석

우리는 Saccharomyces cerevisiae에있는 중요한 세포 지질을 확인하고 정량화하기 위하여 탠덤 질량 분광법과 결합된 액체 크로마토그래피를 사용하여 프로토콜을 제시합니다. 효모 세포 내의 주요 지질 클래스의 정량적 평가를 위한 설명된 방법은 다재다능하고, 견고하며, 민감하다.

탠덤 질량 분석과 결합 된 액체 크로마토그래피를 사용하여 사카로 미세화세세비시아의 세포 지질의 정량분석

우리는 효모 사카로미세스 세레바시아에있는 수용성 대사산물의 주요 클래스의 식별 그리고 양을 위한 프로토콜을 제시합니다. 설명된 방법은 다재다능하고 견고하며 민감합니다. 그것은 서로 수용성 대사 산물의 구조 이소목 및 고정 관형 형태의 분리를 허용한다.

탠덤 질량 분광과 결합 된 액체 크로마토그래피를 사용하여 사카로미세스 Cerevisiae의 정량적 Metabolomics

여기서, 중성 지질의 분리를 위한 얇은 층 크로마토그래피와 결합된 14C-아세트산을 가진 효모의 대사 라벨링을 위한 프로토콜이 제시된다.

대사 라벨링 및 얇은 층 크로마토그래피에 의한 사카로미세스 세레시아의 중립 지질 합성 분석

이 비디오는 매트릭스를 이용한 레이저 탈착 이온화 질량 분석법 (든 - MS)에 의해 펩티드와 단백질 분석을위한 울트라 얇은 매트릭스 / analyte 레이어의 준비를 보여줍니다.

든 샘플 준비 : 울트라 씬 레이어 방법

안정 동위 원소 표준 및 안티 펩타이드 항체 (SISCAPA) 각각의 단백질에 대한 surrogates으로 펩티드의 양적 측정을 제공하기 위해 안정 동위 원소 희석 질량 분석법 (MRM - MS)과 펩티드의 커플 선호도 농축하여 캡처합니다. 여기서 우리는 부분적으로 자동화된 형식으로 자기 입자를 사용하여 프로토콜을 설명합니다.

펩타이드 면역 친 화성 농축을 사용하여 단백질의 양을 정함은 질량 분광법과 함께

든 - TOF 질량 분석법을 성공적으로 단백질 키나제 Pak2 활성화에 아미드 수소 / 중수소 교환을 모니터 활용했다.

Pak2 활성화의 아미드 수소 / 중수소 교환 및 든 - TOF 질량 분광법 분석

학습하세요 전기 분무 이온화 질량 분광법을 사용한 효모 지질체의 양적 분석 방법을. 유리구슬 세포 파쇄와 클로로포름-메탄올 추출로 지질을 분리하고, 내부 표준을 이용해 민감도와 분석 속도를 높인 선진 기술입니다.

전기 분무 이온화 질량 분광법을 사용하여 효모 Lipidome의 양적 평가

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