Name: (과일 파리) Drosophila의 침략을 유학 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-02-25T00:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 6 s
Description: 학습하세요 Drosophila 공격 행동 연구 방법으로 고립 배양관 준비와 통제된 전투 환경 설정을 포함합니다. 이 기법은 신경생물학 및 유전적 행동 메커니즘 연구에 활용됩니다.

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1. 챔버 벽면 조립 <ol><li> 두 일반 유리 슬라이드를 타고 두 가장자리에서 중앙을 표시하고 가이드로 직선 깨끗 통치자를 사용하여 다이아몬드 커터로 유리를 점수. </li><li> 당신이 사장을 때릴 때의 소리를들을 때까지 앞뒤로 몇 번 다이아몬드 커터 슬라이드. </li><li> 유리를 세척하고, 깨진 유리 콘센트에 두번 종이 수건 들고, 득점 측면과 함께 득점 라인에 부드러운 압력을 적용 닫기 이 반쪽으로 슬라이드를 끊어야 할 당신을 멀리 직면. </li><li> 넉넉한 유리 한 조각의 가장자리를 따라 유리 접착제를 적용하고 첫 번째 작품에 직각에 접착제에 대한 유리의 두 번째 부분을 밀어. 평평한 표면 (알루미늄 호일, 종이 또는 일반 용지를 끝날)에 아래 장소와 적어도 한 시간에 대해 설정할 수 있습니다. </li><li> 한 시간 후, 사각형 챔버를 형성하고 하룻밤을 강화 수 있도록 접착제 단계의 응용 프로그램을 반복합니다. <img src="/files/ftp_upload/old/155_2008_9_3_3/155_figure-01.png" alt="그림 1" width="358" height="266" /> </li></ol> 2. 배양 접시에있는 벽에 배치 <ol><li> 페트리 접시의 상단을 받아 2퍼센트 아가로 오스 (탈이온수에 전자렌지 아가로 오스는 완전히 녹이고까지)의 가열 솔루션 최소한 5mm의 깊이로 입력합니다. </li><li> 몇 분 만요, 그래도 해산하면서 접시의 중앙에있는 챔버 벽을 배치. 페트리 접시의 바닥을 가지고, 그것까지 바닥 면을 넣습니다. 불꽃 - 온수 직선 해부 바늘을 사용하여 환기를위한 접시의 중앙에 작은 구멍 세트를 (&gt; 1mm)합니다. 실로 파리를 소개하는쪽으로 약간 큰 구멍 (~ 4mm 직경)을 확인합니다. 큰 구멍을 통해 이동식 라벨 테이프의 조각을 넣으십시오. <img src="/files/ftp_upload/old/155_2008_9_3_4/155_figure-02.png" alt="그림 2" width="447" height="207" /> <img src="/files/ftp_upload/old/155_2008_9_3_5/155_figure-03.png" alt="그림 3" width="328" height="211" /> </li></ol> 3. 식품 컵 만들기 <ol><li> 음식 녹아있는 지점까지 비행 식품의 병을 열. 상단에있는 평평한 표면을 형성하기 위해 그것을 채우는 섬광 유리 폐쇄에 음식을 전송하는 파스퇴르 피펫을 사용합니다. 공기 방울을 방지하고 냉각하도록주의하십시오. </li><li> 건조 효모와 박격포와 유봉에 물을 몇 방울의 작은 금액을 연마하여 신선한 효모 붙여넣기를합니다. 일관성 작은 ​​볼 드롭이 이쑤시개로 데리러와 식품 표면의 중심에 적용할 수 있도록 충분한 두께가 될 때까지 더 누룩이나 물을 추가합니다. </li><li> 챔버의 중앙에 음식의 병을 놓고 양쪽가되고 챔버 상단에보기를 왜곡하지 않도록 거꾸로 페트리 접시의 바닥을 놓으십시오. 상단에있는 큰 구멍을 통해 챔버로 흡인하여 두 3~5일 오래된 파리를 소개합니다. 테이프가있는 구멍을 커버하고 상단 접시에에 2cm 구멍 컷 검은색과 필터 종이를 넣으십시오. </li><li> 그것은 챔버를 가열하고, 그것이 음식의 표면을 밝히는되도록 위치하지 않을 멀리 떨어진 챔버 위에 책상 램프를 놓습니다. 전체 어셈블리가 이상적으로 22-25의 높은 습도와 온도 ° C.있는 환경에 배치되어야합니다 <img src="/files/ftp_upload/old/155_2008_9_3_6/155_figure-04.png" alt="그림 4" width="284" height="212" /> </li></ol> 4. 모두 파리 foodsurface에있는 때 챔버의 앞에 벽을 통해 찍고 시작합니다.

(과일 파리) drosophila의 침략을 유학

Studying Aggression in Drosophila (fruit flies)

침략 자원을 방어하거나 획득의 프레임 워크의 진화 타고난 동작입니다. 이 복잡​​한 사회 문제는 유전, 호르몬과 환경 요인에 의해 영향을받습니다. 많은 생물에서 침략도 점점 중요 해지고있다 뚜렷한 상황에서 생존하지만, 제어 및 억제 침략하기 위해 중요합니다. 최근에는 무척추 동물이 복잡한 사회적 행동의 유전적 및 시스템 생물 학적 기초 조사를위한 모델 시스템으로 점점 쓸모가있다. 이 부분에서이 생물에 의해 전시 행동의 다양한 레퍼토리로 인한 것입니다. 수반 동영상에서 우리는 중요한 설계 환경 ethological 제약을 포함 Drosophila의 침략을 분석하는 방법을 설명합니다. 세부 정보에 대한 단계를 포함 싸움 챔버 만들기, 파리를 분리하고 그림, 전투 실에 파리를 추가하고, 비디오 테이핑의 싸움. 이 접근법은 현재 침략의 중요한 후보 유전자를 식별하는 데 사용하고의 연결 회로를 elaborating에 침략과 다른 사회적 행동의 출력을 underlies되고 있습니다.

(과일 파리) Drosophila의 침략을 유학

공격성은 자원을 방어하거나 획득하기 위한 체계 내에서 진화한 선천적 행동입니다. 이러한 복잡한 사회적 행동은 ...에 의해 영향을 받습니다.

제 이름은 Sarah Ertel이며, 하버드 의과대학 신경생물학과의 Ed Kravitz 교수님 연구실에서 박사후 연구원으로 재직 중입니다. 제 이름은 Sibu입니다. 저는 독일에서 온 의대생이며, 이곳 Kravitz 연구실에서 연구 로테이션을 수행하고 있습니다.초파리의 공격성을 설정하고 연구하는 방법을 보여드리겠습니다. 가장 먼저 수행할 작업은 격리 바이알을 준비하는 것으로, 초파리 먹이를 전자레인지로 가열한 후 먹이가 응고되면 배양 튜브에 1.5 mL를 넣습니다. 그다음 면솜으로 입구를 막습니다.첫 번째 단계는 다른 파리를 접해본 적이 없는 사회적으로 순진한 파리를 준비하는 것입니다. 이를 위해 우리가 연구하려는 종류의 파리에서 후기 번데기를 채취하며, 핀셋을 사용하여 바이알에서 번데기를 조심스럽게 꺼냅니다.준비된 분리 바이알에서 솜을 제거하고 퍼피(puy)를 조심스럽게 넣은 다음, 뚜껑을 닫고 바이알에 라벨을 붙입니다. 이 퍼피들을 주야 주기 제어 배양기에 다시 넣습니다. 그리고 다음 날 퍼피가 우화했는지 확인한 후, 파리가 우화한 날짜를 기록합니다.그 다음 3~5일 동안 숙성시키며, 이 기간 동안 초파리 복부 뒷면에 페인트를 칠해 개체를 식별할 수 있도록 합니다. 이제 실제 싸움이 이루어질 챔버를 제작하겠습니다. 이를 위해 일반 현미경 슬라이드 2장을 사용하며, 중앙을 측정하고 다이아몬드 커터 핀으로 표면을 긁어 표시를 합니다. 그런 다음 가장자리를 찾으면 현미경 슬라이드가 쉽게 반으로 쪼개질 것입니다. 좋습니다.그 다음, 슬라이드 가장자리를 접착제로 붙입니다. 이어서 두 부분을 서로 붙여 상자 형태로 만듭니다. 70% ethanol과 물로 세척하여 손지문을 제거합니다.챔버 바닥에 1% agar를 채우고 챔버를 내부에 고정합니다. 이는 초파리에게 습도를 제공하기 위함입니다. 그다음, 초파리들이 서로 다툴 만한 요소를 제공하고자 합니다.따라서 챔버의 실제 크기가 영역으로 간주될 수 있음에도 불구하고, 우리는 파리들에게 먹이를 제공합니다. 이때 먹이는 신틸레이션 바이알(scintillation vial)에 담아 넣어줍니다. 이는 한 마리의 파리가 방어하고자 할 수 있는 추가적인 수준의 영역성을 제공하게 됩니다.이제 갓 전자레인지로 가열한 먹이를 푸드 컵에 채우겠습니다. 이 푸드 컵은 실제로 신틸레이션 캡(scintillation caps)이며, 나중에 초파리들이 싸우게 될 투기장이 됩니다. 전체 표면을 제대로 관찰할 수 있도록 표면을 약간 볼록하게 만드는 것이 중요합니다. 또한 기포가 생기지 않도록 해야 하는데, 기포가 있으면 초파리들이 푸드 컵 위를 걸을 때 방해물이 되어 초파리들을 푸드 컵으로 유인하는 데 지장을 줄 수 있기 때문입니다.또한 먹이 컵 중앙에 효모 페이스트 한 방울을 추가하겠습니다. 먼저 효모 페이스트를 준비해야 합니다. 살아있는 효모 페이스트를 가져와 먹이 컵에 넣은 다음, 물 한 방울을 추가하고 페이스트 상태가 될 때까지 섞어줍니다.먹이 컵이 식으면, 효모 페이스트를 넣거나 소량의 페이스트를 먹이 컵 중앙에 떨어뜨립니다. 현재 저희는 두 개의 행동 실험실 중 한 곳인 행동 실험실에 있습니다. 이 방은 모든 조명을 켜더라도 완전히 어두운 상태를 유지하며, 습도와 온도가 제어됩니다.따라서 온도는 25°C로 유지하고 습도는 40% 이상으로 유지하여, 최대한 많은 조건에 대해 초파리를 제어하고자 합니다. 이제 초파리를 배치하겠습니다. 앞서 준비한 먹이 컵들을 가져왔으며, 이를 챔버 안에 넣겠습니다.초파리들을 챔버의 중앙에 배치하십시오. 뚜껑을 다시 닫습니다. 이제 흡입기를 사용하여 정확히 한 쌍의 초파리를 흡입하겠습니다.이제 초파리 두 마리를 선택해 이곳으로 흡입한 다음 챔버 안에 넣겠습니다. 이제 바이알을 이렇게 잡겠습니다. 초파리는 중력을 거슬러 빛을 향해 이동하는 성질이 있어 위쪽으로 올라가는 경향이 있기 때문입니다.이렇게 하면 면솜을 제거할 때 파리를 더 쉽게 잡을 수 있습니다. 보시는 것처럼, 현재 아토어(ator) 안에 두 마리의 파리가 모두 들어 있습니다. 또한 이들은 표시된 파리들이므로, 표시된 파리 한 마리와 표시되지 않은 파리 한 마리를 각각 선택해야 합니다.또는 두 가지 색상을 사용하여, 하나는 한 가지 색으로 칠하고 다른 하나는 다른 색으로 칠하되 유전자형은 동일하게 설정할 수 있습니다. 이제 이를 위해 챔버에 삽입합니다. 그다음 왁스 볼을 제거합니다.파리를 넣을 수 있는 작은 구멍이 있으며, 탭을 칠 때 파리가 탈출하지 못하도록 뚜껑의 위치를 조정합니다. 파리들이 약간 아래로 떨어지면, 너무 세게 불면 파리들이 불안해할 수 있으므로 부드럽게 바람을 불어넣습니다. 파리들이 챔버 내 환경을 살피고 안정을 찾는 데까지는 약 3분에서 40분 정도가 소요됩니다.그러면 개체들이 먹이 컵을 차지하기 시작하면서 싸움이 시작될 것입니다. 이제 챔버 전체를 들어 카메라 앞에 놓겠습니다. 이때 먹이 컵 전체가 보일 수 있도록 약간의 각도에서 촬영하고, 먹이 컵 전체에 초점이 맞도록 높이를 조정해야 합니다.또한 이러한 공격성 분석 실험이 설정되는 공간이 중요합니다. 이곳은 통행과 소음이 차단된 격리된 방입니다. 온도는 25 °C로 유지하며, 해당 상황에서 초파리가 건강하고 안정적인 상태를 유지할 수 있도록 습도를 45%에서 55% 사이로 유지하고자 노력합니다.또한, 먹이 컵의 빛이 초파리를 유인할 수 있도록 천장 조명을 낮춥니다. DFA를 모델 시스템으로 사용하고 이러한 유형의 설정을 활용함으로써, 공격성의 강도뿐만 아니라 우리가 관찰하는 공격성의 구체적인 패턴까지 살펴볼 수 있습니다. 특히 우리는 뇌가 발달 과정에서 어떻게 연결되며, 이러한 연결이 학습되지 않은 성체에서 어떻게 행동으로 나타나는지에 대해 매우 깊은 관심을 가지고 있습니다.따라서 그들은 다른 파리들과 상호작용을 시작하는 것을 보는 즉시 바로 나옵니다. 그들은 어떻게 돌진하는지, 어떻게 공격적으로 행동하는지를 알고 있습니다. 그래서 우리는 이러한 행동들이 파리의 신경계에 어떻게 연결되어 있으며, 이후에 어떻게 제어되는지를 알고자 합니다.

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Research

연구

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Biology

생물학

공격성은 타고난 행동이며 이전의 전투 경험은 전투 전략과 이후 파리 대회의 결과에 영향을 미칩니다. 이 비디오는 초파리의 공격적인 행동을 연구하는 데 사용되는 분석법을 설명합니다. 예시 프로토콜은 파리 취급을 제거하여 동물의 스트레스를 줄이는 설정에서 수행되는 분석을 특징으로 하며, 그렇지 않으면 피험자의 성능에 영향을 미칠 수 있습니다.

초파리 공격성 분석: 파리의 행동 가소성을 테스트하는 방법

이 비디오 문서에서는, 우리는 초파리 비행 성인 과일의 후각에 의존 식품 검색 행동에 대한 배고픔이나 포만감의 효과를 측정 할 수있는 자동화 된 분석을 설명합니다.

먹이 찾아 돌아다 행동에 대한 단일 비행 분석에 초파리

여기에서는 스트레스를 받는 개인의 회피를 정량화하는 프로토콜을 제시합니다. 이 패러다임은 강력하면서도 사용자 친화적이며 Drosophila melanogaster의 한 종류의 사회적 상호 작용에 대한 유전자와 환경의 영향을 평가하는 데 사용할 수 있습니다.

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과일 동안 행동 패턴은 역학 싸움, 관찰 및 관련 학습과 기억은 실험 조건에 의해 영향을 받는다, 싸움을 비행. 여기에 제시된 프로토콜은 전체 실험 기간 동안 파리의 처리를 제거하는 새로운 절차를 설명합니다. 이 싸움 역학을 개선하고 강력한 "패자"효과의 형성을 할 수 있습니다.

침략 유학을위한 처리 제거하는 새로운 접근하고 &quot;낙오자&quot;효과<em&gt; 초파리</em

우리는 보람 유도 및 보상 상태의 변화에 대한 조치로 자발적인 에탄올 소비를 사용하여 초파리 (Drosophila의 melanogaster의) 경험을 nonrewarding위한 프로토콜을 설명합니다.

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학습과 기억의 척도 로서의 Drosophila Courtship 컨디셔닝

플라이펍 분석은 과일이 에탄올의 영향으로 드로소필라 멜라노가스터가 표시하는 행동을 측정합니다. 이 분석은 모든 수준에서 실험자에 의해 쉽게 마스터되고 다양한 기화 자극에 적용되어 약물 남용 및 중독 연구를 용이하게 할 수 있습니다.

플라이펍, 에탄올 유발 행동 억제 및 과민성 연구

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초파리 연관적 역경 학습을 연구하는 새로운 패러다임으로서의 수동적인 회피 행동

자폐 스펙트럼 장애(ASD)는 사회적 및 의사소통 행동의 장애 및 반복적 행동의 출현과 관련이 있습니다. 초파리 모델에서 ASD 유전자와 행동 결핍 사이의 상관 관계를 연구하기 위해 이 논문에서는 사회적 간격, 공격성, 구애, 그루밍 및 습관화 행동을 분석하기 위한 5가지 행동 패러다임을 설명합니다.

자폐 스펙트럼 장애의 초파리 모델에서 행동 평가를 위한 패러다임

학습하세요 Drosophila 공격 행동 연구 방법으로 고립 배양관 준비와 통제된 전투 환경 설정을 포함합니다. 이 기법은 신경생물학 및 유전적 행동 메커니즘 연구에 활용됩니다.

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