Genetic Studies of Human DNA Repair Proteins Using Yeast as a Model System

Monika Aggarwal; Robert M. Brosh Jr.

doi:10.3791/1639

인간의 DNA 수리 단백질의 유전자 연구는 모델 시스템으로 효모를 사용하여

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Biology

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Genetic Studies of Human DNA Repair Proteins Using Yeast as a Model System

인간의 DNA 수리 단백질의 유전자 연구는 모델 시스템으로 효모를 사용하여

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14:09 min

March 18, 2010

DOI: 10.3791/1639-v

Monika Aggarwal¹, Robert M. Brosh Jr.¹

¹Laboratory of Molecular Gerontology,National Institute on Aging, NIH

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

효모의 유전자 연구는 세포의 DNA 대사에 인간 유전자의 분자 및 세포 기능을 조사하기 위해 고용 수 있습니다. 방법은 인간의 유전 특성에 대해 설명합니다

WRN 플라스미드는 제한 엔도뉴클레아제 세포 1 및 MLU 1로 절단하고 단편을 겔로부터 정제합니다. 세포 1 내지 MLU 1 WN 단편으로 절단된 이들 발현 벡터는 이어서 효모 벡터의 세포 1 내지 MLU 1 부위로 접합된다. 다중 복사 플라스미드에는 TRP one 선택 가능한 마커도 포함되어 있습니다.

W Rrn 작제물은 표준 프로토콜에 따라 효모로 형질전환되고 형질전환체는 트립토판이 결핍된 합성 완전 포도당 배지에서 선택됩니다. 이어서, 개별 형질전환체를 트립토판이 결핍된 합성 완전 글루코스 배지 상에 줄무늬를 만들고, 플레이트를 마스터 플레이트로부터 배양한다. WRN 변형 SGS에서 느린 성장 표현형 복원을 분석하기 위해 상위 3 개의 이중 돌연변이 균주 형질 전환체가 포도당 또는 갈락토오스 함유 플레이트에 줄무늬를 만듭니다.

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