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플라이 클라이밍 분석: Drosophila melanogaster에서 일반 운동을 테스트하는 방법
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Fly Climbing Assay: A Method to Test General Locomotion in Drosophila melanogaster

플라이 클라이밍 분석: Drosophila melanogaster에서 일반 운동을 테스트하는 방법

Protocol
13,010 Views
02:33 min
April 30, 2023
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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Transcript

-우선, 성충 초파리를 정해진 수만큼 확보합니다. climbing assay를 위한 테스트 챔버는 테이프로 연결된 두 개의 바이알로 구성됩니다. 이 바이알 중 하나에는 선으로 표시해야 합니다.

등반 동작을 손상시킬 수 있는 이산화탄소 마취가 없으면 정해진 수의 파리를 테스트 챔버로 옮깁니다. 파리가 미리 결정된 시간 동안 회복할 수 있도록 합니다. 챔버의 표시된 면이 아래로 향하게 하여 단단한 표면에 놓인 마우스 패드에 챔버를 단단히 두드립니다. 이렇게 하면 파리가 챔버 바닥으로 가라앉을 것입니다. 등반 분석은 중력을 거슬러 위로 올라가는 초파리의 자연적인 경향, 즉 네거티브 지오택시(negative geotaxis)라고 하는 행동을 이용합니다.

시험 기간 동안 파리는 포토택시 행동이나 빛 자극에 대한 반응으로 움직임을 보일 수 있으므로 파리가 직사광선에 노출되어서는 안 됩니다. 선에 도달하거나 선을 통과하는 파리의 수를 기록하십시오. 그런 다음 이 숫자를 테스트한 총 파리 수로 나누어 통과율을 구합니다. 실험을 반복하기 전에 파리가 회복될 때까지 기다립니다. 이 예에서는 화학적 돌연변이 유발 후 초파리 운동 기능을 평가하는 데 사용되는 플라이 클라이밍 분석을 관찰할 것입니다.

-시작하려면 두 번째 염색체에 매핑된 초파리 돌연변이의 ENU 돌연변이 유발 컬렉션에 속하는 라인에서 동형접합 파리를 수집합니다. 10일에서 12일 된 파리를 마취 없이 한 번에 한 줄씩 검사실에 넣고 5분 동안 회복할 수 있도록 합니다.

5cm 선을 아래로 표시한 상태에서 단단한 표면에 놓인 마우스 패드를 챔버를 강제로 세 번 두드려 모든 파리가 바닥에서 분석을 시작하도록 합니다. 10초 동안 파리의 움직임을 관찰합니다. 이 시간 내에 5cm 선에 도달하거나 통과하는 파리의 수와 테스트된 총 파리 수를 기록합니다. 두 번째 평가판을 시작하기 전에 1분 정도 기다립니다. 라인당 최소 3번의 시험 반복을 반복합니다.

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