제브라피시 심전도(ECG): 심장 기능을 평가하기 위한 최소 침습 분석

- 시작하려면 마취된 물고기 복부 쪽을 젖은 스펀지의 슬릿에 놓습니다. 양극을 구근 동맥 수준에서 물고기의 정중선에 삽입합니다. 다음으로, 심실 아래에 음극을 삽입하고 정중선 왼쪽으로 0.5-1mm 떨어진 곳에 삽입하여 전위의 차이를 측정할 수 있는 양극 리드를 만듭니다. 마지막으로 항문 부위 근처에 참조 전극을 삽입하여 전기 신호를 접지합니다.

기록을 시작하고 잠시 후 추적을 검토하여 네 가지 조건이 충족되는지 확인합니다. 모든 파형은 볼 수 있어야 하고 서로 구별되어야 합니다. 심방 탈분극을 나타내는 P파는 양수여야 합니다. 심실 탈분극을 나타내는 Q, R, S파의 순합은 양수여야 합니다. 마지막으로, 심방 재분극을 나타내는 T파는 양수여야 합니다. 기준이 충족되지 않으면 적절한 트레이스가 기록될 때까지 전극을 조정하십시오.

녹음 후 아가미나 물고기가 규칙적으로 움직이기 시작할 때까지 산소가 함유된 물에 물고기를 담그고 아가미 위로 물을 뿌려 물고기를 깨웁니다. 이 예에서는 성인 제브라피쉬에 대해 표면 심전도를 수행합니다.

- 실험 당일, 수족관에서 제브라피시를 실험실로 운반하세요. 생체 내 ECG 기록 시스템을 설정하려면 필수 장비를 연결하고 ECG 리드의 3가지 색상으로 구분된 스테인리스 스틸 전극을 ampliifier의 3가지 색상이 일치하는 액세스 포털. 레벨 4 마취를 유도하기 위해, 성인 제브라피시를 기관 동물 관리 및 사용 위원회(Institutional Animal Care and Use Committee)에서 승인한 가장 낮은 사전 결정 농도의 마취제 용액이 들어 있는 접시에 담그십시오.

제브라피쉬가 3초 동안 마취 수준을 유지하면 한 쌍의 뭉툭한 집게를 사용하여 3개의 ECG 전극을 배치하기 위해 슬릿 복부 표면이 위로 향하게 한 젖은 스펀지로 물고기를 즉시 옮깁니다. 수술실의 두 아래쪽 가장자리를 연결하는 가상의 선에서 1-2mm 위의 구근 동맥 수준에서 복부 정중선에 양극을 부드럽게 삽입합니다.

음극을 꼬리 방향으로 놓고 성체 제브라피시 심실의 최대 정점-기저 길이보다 큰 거리에서 양극에 측면으로 0.5-1mm 왼쪽에 배치합니다. 그런 다음 기준 전극을 항문 부위 근처에 꼬리 방향으로 배치합니다. ECG 기록을 위해 시스템을 시작하고 ECG 데이터 수집 프로그램을 엽니다. 드롭다운 메뉴에서 Range(범위), Low Pass(저역 통과) 및 High Pass(고역 통과)에 대한 원하는