0 조회수 • 3:28 분 • April 30th, 2023
- 옥수수 가루 배지가 들어있는 바이알에 정해진 수의 수컷과 암컷 Drosophila melanogaster fruit flies를 함께 수용하는 것으로 시작하십시오. 이것은 자손의 일정한 밀도를 허용합니다.
암컷 파리가 알을 낳을 수 있도록 합니다. 그런 다음 성인 파리를 제거하십시오. 알은 유충, 번데기가 되고 마침내 10일 안에 성충이 됩니다. 코호트보다 일찍 출현하는 새로운 파리는 9일째 이전에 제거해야 합니다. 이제 동기화된 파리를 대조군 및 실험 조건에 대한 그룹으로 나눕니다. 수파리와 암파리를 함께 수용하면 짝짓기가 가능하여 수명에 영향을 미치는 변수를 제거할 수 있습니다.
며칠 후, 파리를 성별에 따라 그룹으로 분리하십시오. 해당 실험 조건에 동일한 수의 파리를 배치합니다. 3일마다 살아있는 파리를 새 유리병에 옮기고 죽은 파리의 수를 기록합니다. 모든 파리가 죽을 때까지 이 과정을 반복합니다.
최소 3번의 반복 실험 후, 일별 생존 파리의 평균 백분율을 표시하여 각 조건에 대한 평균 생존 곡선을 생성합니다. 이 예에서는 내분비 교란 화학 물질로 처리된 코호트에 대한 생존 곡선을 생성하는 방법을 볼 수 있습니다.
- 수명 프로토콜에서는 먼저 8마리의 암컷과 4마리의 수컷이 있는 20개의 바이알을 설정하고 각각 10ml의 옥수수 가루 식품으로 채워진 다음 섭씨 25도에서 보관합니다. 4일 후, 파리를 버리고 바이알을 다시 인큐베이터에 넣습니다. 9일째 늦은 오후에 바이알에서 새로 나온 파리를 모두 제거하고 바이알을 인큐베이터에 다시 넣습니다.
16시간에서 24시간 후, 생후 1일 된 암수 성충 파리 250마리를 가벼운 이산화탄소 마취 하에 4개 그룹으로 나누어 성체 배지 식품이 들어 있는 250ml 병, 다른 EDC 농도가 보충된 3개, EE2 용매만 있는 1개로 옮깁니다. 파리가 짝짓기를 할 수 있도록 섭씨 25도에서 2-3일 동안 유지합니다. 그런 다음 각 파리 코호트를 성별에 따라 두 그룹으로 정렬합니다. 남녀 모두에 대한 각 치료 조건 내에서 각 그룹을 바이알당 20명의 개체 밀도로 5개의 병렬 바이알로 무작위로 세분화합니다. 이전 전송에서 살아남은 파리의 수에서 죽은 파리의 수를 빼서 각 전송에서 생존자의 수를 자동으로 얻을 수 있도록 하는 수명 스프레드시트를 준비합니다.
3일 후, 마취 없이 파리를 해당 음식이 들어 있는 새 바이알로 동시에 옮기고 사망 여부를 확인합니다. 파리의 나이와 죽은 파리의 수를 기록하십시오. 모든 파리가 죽을 때까지 3일마다 이동을 반복합니다.