자유롭게 걷는 파리 추적: 초파리의 이동을 평가하는 방법

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생물학

0 조회수 • 2:45 분 • April 30th, 2023

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- 지붕이 있는 경기장(예: 투명한 실리콘으로 채워진 페트리 접시)을 사용하여 파리가 자유롭게 걸을 수 있지만 지붕이 있으면 경기장 내부로 날아갈 수 없도록 합니다. 조명이 켜진 흰색 표면에 접시를 놓고 바로 위에 카메라를 배치합니다.

뚜껑을 연 상태에서, 마취된 파리를 접시 안으로 옮겨 담아 덮고 피험자가 회복할 수 있게 한다. 파리는 재판 기간 동안 경기장을 자유롭게 돌아다닐 수 있습니다. 이동을 평가하려면 시간 경과에 따른 각 파리의 위치를 추적하고 각 파리가 이동한 거리와 같은 이동을 특징짓는 파라미터를 계산합니다. 이 예제 프로토콜에서는 비디오 추적 소프트웨어를 사용한 분석 설정 및 분석의 시연을 볼 수 있습니다.

- 페트리 접시에서 파리의 움직임을 추적하려면 먼저 6cm 접시에 투명 실리콘 엘라스토머를 채워 추적 경기장을 만듭니다. 실리콘과 뚜껑 사이에 3mm의 간격을 두어 파리가 그 틈새를 자유롭게 걸을 수 있지만 날아갈 수는 없도록 합니다. 추적 경기장 아래에는 흰색 배경이 있습니다.

다음으로, 같은 치료 그룹의 파리 4마리를 마취하고 투기장에 놓습니다. 파리가 경기장에 한 시간 동안 적응하도록 하면 조명이 완전히 켜져 있어야 하고 섭씨 약 22도에서 실온보다 뜨겁지 않아야 합니다. 한 시간 후, 경기장 위에 위치한 전하 결합 장치 카메라를 사용하여 5분 동안 파리의 활동을 기록합니다.

5분 녹음 후 경기장의 파리를 마취하고 새 가정용 유리병에 다시 넣습니다. 그런 다음 경기장을 처분하십시오. 나중에 무료로 사용할 수 있는 Ctrax 소프트웨어를 사용하여 녹음을 분석합니다. 이 소프트웨어는 추적 데이터를 생성하며, 이 데이터는 MATLAB 형식과 같은 프로그래밍 가능한 언어 호환 형식으로 내보낼 수 있습니다.

데이터에서 프레임당 이동한 거리, 각 플라이의 평균 도보 거리, 플라이당 이동한 평균 거리를 계산합니다. 통계적 유의성을 위해 치료 그룹당 약 100마리의 파리를 검사할 것으로 예상됩니다.

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