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Encyclopedia of Experiments: Biology

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C. 예인대 고나드 압출

 
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C. 예인대 고나드 압출 : 빠른 해부 기술

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- M9 버퍼가 들어 있는 튜브에서 원하는 개발 단계에서 최대 150개의 헤르마프로디테 웜을 수집합니다.

시료의 손실을 방지하기 위해 상복부을 제거할 해부 현미경으로 튜브를 본다.

벌레의 머리와 인두 또는 개의 전구 모양의 구조를 포함하는 전구 또는 전구를 찾습니다. 두 개의 바늘을 사용하여 인두 뒤에 있는 벌레를 잘라냅니다.

큐티클이 중단되면, 고나드 팔은 벌레의 내부 압력으로 인해 몸밖으로 압출되거나 밀려나게 됩니다.

예에서는 면역 형광 분석을 위해 성인 웜에서 생식구를 해부할 것입니다.

- 원하는 발달 단계에서 100~150개의 벌레를 선택하고 M9 버퍼 100마이크로리터를 포함하는 1.5밀리리터 미세원심분리기 튜브에서 수집합니다.

해부 현미경하에서 M9 버퍼의 900 마이크로리터를 부드럽게 제거한 다음, 부착된 박테리아의 대부분을 제거하기 위해 2회 세척을 반복합니다.

다음으로, 200 마이크로리터 마이크로파이프 팁을 사용하여 M9 버퍼 100마이크로리터의 웜을 평평한 하단 유리 시계 접시에 옮기고, 0.1 개의 어금니 레바솔의 1~3 마이크로리터를 접시에 넣고 부드럽게 소용돌이시킵니다.

해부 현미경으로 바늘을 아래에 배치하고 움직임과 같은 가위를 사용하여 두 번째 인두 전구 근처의 웜에 미세하게 자른다.

- 요리에 담긴 동물의 해부를 5분 이내에 완성하는 것이 매우 중요합니다.

- 압출 된 고나드가 보이지 않는 경우, 동물을 건너 뛰기만 하면 됩니다.

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