광점 분석: 초파리 광전술 거동을 조사하는 방법

- 배양 배지에서 유충 형태 중 가장 큰 세 번째 instar 유충을 선택하고 물로 씻어 먹이를 제거하는 것으로 시작합니다. 유충의 눈 또는 볼위그 기관은 유충의 앞쪽 위쪽에 있기 때문에 유충을 동물 위의 광원이 있는 한천 판의 중앙에 놓습니다. 실내 조명을 끄고 유충이 어둠에 적응하도록 합니다.

가시광선으로 만들어진 광점에서는 유충을 거의 감지할 수 없으므로 적외선 LED 조명을 켜서 카메라를 위해 동물을 비춥니다. 동물이 곧장 기어 다니기 시작할 때까지 기다렸다가 경로를 제어하십시오. 그런 다음 유충이 밝은 곳을 향해 직접 기어 가도록 플레이트를 회전합니다. 동물이 빛 속으로 기어 들어간 다음 밝은 지점에서 멀어지는 것을 기록하십시오. 이 빛 회피 전술은 유충이 먹이 속으로 굴을 파고 들어가 포식자를 피하는 데 도움이 됩니다.

다음 예에서는 광점 분석을 수행하여 초파리 유충의 다양한 유전적 균주가 빛을 탈출하는 능력을 테스트합니다.

- 유충을 이미징 설정에 도입하기 전에 조명 위치에 대한 짧은 비디오를 획득하고 필터링되지 않은 제어 배경 비디오의 이름을 "lightarea1"로 지정합니다. 필터를 카메라 렌즈에 다시 끼우고 실험 장치에서 멀리 떨어진 조명을 가능한 한 낮은 설정으로 켜면서 유충을 명확하게 관찰할 수 있도록 합니다. 숟가락을 사용하여 배양 배지에서 유충을 제거하고 세 번째 instar 유충을 부드럽게 선택합니다.

유충을 증류수로 씻고 한천 플레이트의 중앙에 유충을 놓습니다. 유충에서 여분의 물을 부드럽게 제거하고 실내 조명을 끕니다. 적외선 LED 조명을 켜기 전에 유충이 어두운 환경에서 2분 동안 적응하도록 합니다. 다음 빛 회피 행동 실험은 어둠 속에서 수행해야 합니다. 시연의 편의를 위해 밝은 빛 속에서 촬영했습니다.

유충을 접시 중앙까지 부드럽게 빗질합니다. 유충이 똑바로 기어 다니기 시작하면 플레이트를 회전시켜 유충이 밝은 점으로 향하도록 합니다. Capture(캡처), Setup(설정) 및 Video Capture(비디오 캡처)를 클릭하여 저장 경로를 선택합니다. 그리고 녹음 시작을 클릭하여 녹음합니다. 용암이 시야에서 거의 벗어날 때까지 밝은 점을 향해 기어가고, 들어가고, 떠날 때까지 허용한 다음 기록 중지를 클릭합니다.

필터를 카메라에서 멀리 옮기고 광점의 위치에 대한 짧은 비디오를 획득합니다. 그런 다음 게시물의 이름을 필터링되지 않은 동영상인 "lightarea2"로 지정하고 이 동영상을 "lightarea1" 동영상과 비교하여 광점 위치가 변경되지 않았는지 확인합니다.