초파리 Egg-Laying Preference Assay: A Method to Test Decision-Making in Flys(알낳기 선호도 분석: 파리의 의사 결정을 테스트하는 방법)

- 암컷 파리가 알을 낳는 장소 또는 산란 부위에 대한 선호도를 테스트하기 위해, 개별 암컷 파리에게 테스트 챔버 내에서 알을 낳을 두 가지 다른 기질 중에서 선택할 수 있도록 합니다. 파리는 사용 가능한 옵션을 비교하고 선호하는 사이트, 일반적으로 자손에게 가장 적합한 기질을 선택합니다.

파리가 많은 알을 낳을 준비가 되어 있는지 확인하여 각 시도에서 강력한 알 수가 있는지 확인하십시오. 실험이 끝나면 파리를 제거하고 각 기질의 알을 세어 파리의 산란 선호도를 결정합니다.

예시 프로토콜에서는 고처리량 분석을 사용하여 일반 또는 자당을 함유한 아가로스 기질에 대한 산란 선호도를 테스트할 것입니다.

- 이전에 구성된 아크릴 알을 낳는 챔버를 얻어 실험을 계속합니다. 플라스틱 시트를 상단에 삽입하고 챔버 조각을 바닥 표면으로 사용합니다.

다음으로, 이산화탄소 패드에서 암컷을 마취시키고 각 알을 낳는 경기장에 개별적으로 로드합니다. 파리가 이산화탄소에서 회복하고 새로운 환경에 적응할 수 있도록 30분 동안 기다립니다. 파리가 적응하는 동안 튜브에 아가로스를 10ml 표시까지 채웁니다. 그런 다음 750마이크로리터의 2몰 자당 용액을 튜브에 배치하여 150밀리몰 자당 기질을 준비합니다. 녹인 1% 아가로스 한 병을 수조에 보관하십시오.

같은 방법으로 일반 기질을 준비하되 자당 용액을 증류수로 교체하십시오. 다음으로, 챔버의 기질 조각과 피펫 1,000 마이크로 리터의 아가로 오스 기질을 각 트로프에 얻습니다. 아가로스를 30분 동안 굳히기 위해 따로 보관하십시오.

아가로스 기질과 파리가 준비되면 알을 낳는 챔버의 세 조각을 모두 조립한 다음 플라스틱 시트를 꺼냅니다. 챔버를 플라이 인큐베이터에 밤새 놓습니다.

챔버에 이산화탄소를 주입하여 암컷을 마취합니다. 챔버를 분해하고 마취된 파리를 버립니다. 마지막으로 기록 보관을 위해 계란 사진을 찍습니다.