0 조회수 • 2:25 분 • April 30th, 2023
- 예쁜꼬마선충은 두 가지 유형의 근육을 가지고 있습니다. 단일 육근 또는 줄무늬가 없는 근육에는 인두와 외음부에 있는 근육이 포함됩니다. 여러 개의 육종 또는 비스듬히 줄무늬가 있는 근육은 마름모꼴 모양의 체벽 근육으로, 미오신 섬유의 규칙적인 줄무늬 패턴에 따라 명명되었습니다.
그들은 단면에서 본 웜 바디의 4 사분면에서 세로로 향하는 4 개의 다발로 엇갈린 쌍으로 배열되어 있습니다. 각 세포에는 피하부와 표피에 균일하게 배치된 많은 부착점이 있습니다. 이 배열은 근육 수축의 파동을 부드러운 운동으로 변환하는 데 도움이 됩니다.
이러한 근육을 시각화하기 위해 형광 컨포칼 현미경으로 유전자 변형 GFP 표지 미오신 (myosin)을 가진 고정된 벌레를 이미지화합니다. 분석 소프트웨어를 사용하여 줄무늬 근육 세포의 영역과 해당 세포의 섬유 패턴에 있는 모든 간격을 측정합니다. 근섬유 조직의 간극은 섬유 분해 또는 세포 파편의 축적으로 인한 파괴를 나타낼 수 있습니다. 전체 면적에 대한 갭 영역의 비율을 계산하여 중단의 양을 정의합니다. 예시 프로토콜에서는 피지를 사용하여 체벽 근육 형태를 정량적으로 평가합니다.
- 근육 세포 면적을 측정하려면 피지 소프트웨어에서 이미지를 열고 다각형 선택을 사용하여 단일 비스듬한 근육 세포 주위를 주의 깊게 추적합니다. 앵커 점을 드래그하여 끝에 있는 다각형의 선을 조정하여 추적을 개선합니다. 소프트웨어 상단의 Analyze(분석) 탭으로 이동하고 Measure(측정)를 클릭하여 선택한 영역을 계산합니다.
퇴화되거나 누락된 영역이 있는 근육 세포의 경우 다각형 선택 도구를 사용하여 누락된 영역을 추적하고 측정을 다시 클릭합니다. 간격이 여러 개 있는 경우 각 간격을 개별적으로 추적합니다. 전체 셀의 면적에 대한 갭 영역의 비율을 계산합니다. 비율이 높을수록 근육 퇴행 정도가 높다는 것을 의미하며, 누락된 영역이 없으면 비율이 0으로 계산됩니다.