0 조회수 • 2:20 분 • April 30th, 2023
- 시작하려면 이식 피펫을 사용하여 10 개의 제브라 피시 배아를 20ml의 물이 채워진 비커로 옮깁니다. 이제 섭씨 28도에서 실험에 필요한 적절한 밝은 어두운 주기 아래에서 배아를 성장시킵니다. 다음으로, 유충을 우물 플레이트로 옮깁니다. 수영할 수 있는 충분한 공간을 제공하기 위해 각 우물에는 한 마리의 유충이 포함되어 있는지 확인하십시오.
이제 각 우물에 물을 완전히 채우십시오. 웰 플레이트를 행동 기록 챔버에 놓고 비디오 추적 소프트웨어를 사용하여 유충의 움직임을 추적합니다. 유충은 스트레스 수준 증가로 인해 비정상적인 명암 주기에 노출될 때 어두운 곳에서는 움직임이 증가하고 빛 속에서는 움직임이 감소합니다. 초기 기간의 마지막 1분과 다음 기간의 첫 1분 동안 이동한 평균 거리의 차이를 계산하면 물고기의 광운동 반응을 알 수 있습니다.
이 프로토콜에서는 카페인에 노출된 제브라피시와 팻헤드 미노 유충의 광운동 반응을 조사할 것입니다. 먼저, 실험용 물고기가 들어 있는 우물 플레이트를 행동 기록 챔버에 놓습니다. 그런 다음 이전에 개발된 추적 프로토콜을 엽니다. 비디오 추적 뷰어에서 모든 유충이 보이는지, 각 웰에 유충이 하나만 있는지, 웰이 정의된 관찰 영역과 정렬되어 있는지 확인합니다.
그런 다음 Experiment and Execute를 클릭합니다. 데이터의 이름과 저장 위치를 지정하고 여러 라이브 이미지 아이콘을 클릭하여 미리 정의된 모든 보기 영역을 강조 표시합니다. 마지막으로 녹음실의 패널을 닫고 컴퓨터 모니터에서 Background(배경)를 클릭한 다음 Start(시작)를 클릭합니다.
본 연구에서는 카페인에 노출된 제브라피시와 fathead minnow 치어의 광운동 반응을 조사합니다. 이 실험에서는 다양한 빛 조건 하에서 치어의 움직임을 추적하여 행동 변화를 평가합니다.
제브라피쉬 유생의 광운동 반응 분석법은 신경 활성 화합물 스크리닝 및 스트레스 경로 조사를 위한 정량적이고 고효율적인 행동 판독법을 제공합니다. 이 방법은 조절된 조명 조건 하에서 화합물 노출과 측정 가능한 운동성 변화를 연결함으로써, 초기 단계의 표적 검증 및 기전적 위험 제거를 가능하게 합니다. 본 분석법의 재현성과 확장성은 CNS 및 신경 행동 약물 발견 과정에서 포트폴리오 선별과 예측 신뢰도를 높이는 가치 있는 자산이 됩니다.
본 분석법은 초기 타겟 검증부터 리드 화합물 발굴 및 전임상 행동 프로파일링에 이르는 신약 개발 연속 과정에 통합되어 적용됩니다.
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마지막 업데이트: 22 8월 2026