0 조회수 • 2:14 분 • April 30th, 2023
- 시작하려면 얼룩말 물고기 유충을 유충이 수영할 수 있는 바닥이 유리로 된 우물과 같은 기록실에 넣습니다. 마이크로피펫의 도움으로 먹이인 파라메시아를 모아 기록실에 넣습니다. 다음으로, 커버 슬립 중앙에 작은 물방울을 놓고 챔버 위에 올려 기포를 방지합니다.
이제 챔버를 백색 LED 링 조명이 장착된 조명 시스템에 배치하여 그림자를 제거하고 유기체를 명확하게 볼 수 있도록 합니다. 행동 기록 시스템을 사용하여 먹이 포획 행동을 관찰합니다. 먹이가 시야에 들어오자마자 유충은 눈을 모으고 J회전을 하여 몸을 먹이 쪽으로 향하게 하고 잡아냅니다. 우리는 일정 기간 동안 챔버에 남아 있는 파라메시아의 수를 기록하여 먹이 포획 행동을 정량화할 수 있습니다. 다음 프로토콜에서는 특정 뉴런의 레이저 절제 후 얼룩말 물고기 유충의 먹이 포획 행동을 평가할 것입니다.
- 행동 기록 시스템을 설정하고 텍스트 프로토콜에 따라 유충을 기록 챔버에 배치한 후 마이크로피펫을 사용하여 50개의 파라메시아를 수집하여 기록 챔버에 넣습니다. 커버 슬립을 레코딩 챔버 위에 놓으려면 커버 슬립을 레코딩 챔버의 물 표면에 놓기 전에 챔버에 공기가 유입되지 않도록 커버 슬립에 작은 물방울을 떨어뜨립니다.
조명 시스템에 레코딩 챔버를 배치합니다. 그런 다음 10분 동안 초당 11프레임으로 타임랩스 녹화를 시작합니다. 마지막으로 텍스트 프로토콜에 따라 분석을 수행합니다.
본 연구에서는 행동 기록 시스템을 사용하여 제브라피쉬 치어의 먹이 포획 행동을 조사합니다. 방법론에는 특정 뉴런의 레이저 절제술이 포함되어 있으며, 이를 통해 치어의 먹이 포획 능력에 미치는 영향을 평가합니다.
제브라피시 치어의 먹이 포착 행동을 정량화하면 초기 발견 단계에서 신경 활성 화합물 스크리닝 및 표적 검증을 위한 고효율 표현형 판독값을 얻을 수 있습니다. 이 분석법은 특정 신경 세포군을 기능적 행동 출력과 연결함으로써 기전적 리스크를 제거하여, 경로 조절에 대한 예측 신뢰도를 높여줍니다. 이러한 질환 관련 시스템은 섭식 및 운동 협응에 관여하는 신경 회로에 영향을 미치는 화합물 라이브러리 스크리닝에 유용합니다.
본 분석법은 표적 가설 검증부터 리드 화합물 발굴에 이르는 신약 개발 연속 과정에 적합하며, 전임상 단계의 투자에 앞서 행동 표현형을 통해 화합물의 우선순위를 결정하는 정보를 제공합니다.
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마지막 업데이트: 22 8월 2026