JoVE 실험 백과사전
생물학
0 조회수 • 2:14 분 • April 30th, 2023
- 시작하려면 얼룩말 물고기 유충을 유충이 수영할 수 있는 바닥이 유리로 된 우물과 같은 기록실에 넣습니다. 마이크로피펫의 도움으로 먹이인 파라메시아를 모아 기록실에 넣습니다. 다음으로, 커버 슬립 중앙에 작은 물방울을 놓고 챔버 위에 올려 기포를 방지합니다.
이제 챔버를 백색 LED 링 조명이 장착된 조명 시스템에 배치하여 그림자를 제거하고 유기체를 명확하게 볼 수 있도록 합니다. 행동 기록 시스템을 사용하여 먹이 포획 행동을 관찰합니다. 먹이가 시야에 들어오자마자 유충은 눈을 모으고 J회전을 하여 몸을 먹이 쪽으로 향하게 하고 잡아냅니다. 우리는 일정 기간 동안 챔버에 남아 있는 파라메시아의 수를 기록하여 먹이 포획 행동을 정량화할 수 있습니다. 다음 프로토콜에서는 특정 뉴런의 레이저 절제 후 얼룩말 물고기 유충의 먹이 포획 행동을 평가할 것입니다.
- 행동 기록 시스템을 설정하고 텍스트 프로토콜에 따라 유충을 기록 챔버에 배치한 후 마이크로피펫을 사용하여 50개의 파라메시아를 수집하여 기록 챔버에 넣습니다. 커버 슬립을 레코딩 챔버 위에 놓으려면 커버 슬립을 레코딩 챔버의 물 표면에 놓기 전에 챔버에 공기가 유입되지 않도록 커버 슬립에 작은 물방울을 떨어뜨립니다.
조명 시스템에 레코딩 챔버를 배치합니다. 그런 다음 10분 동안 초당 11프레임으로 타임랩스 녹화를 시작합니다. 마지막으로 텍스트 프로토콜에 따라 분석을 수행합니다.