0 조회수 • 2:32 분 • April 30th, 2023
- 시작하려면 새로운 탱크 뒤에 적외선을 놓고 탱크와 빛 사이에 흰색 아크릴 시트를 놓아 빛을 확산시키고 눈부심을 방지합니다. 이제 수조의 3/4을 수돗물의 역삼투압에 의해 생성된 어류 시스템 물로 채웁니다. 수용 탱크에서 순응된 물고기 한 마리를 물고기 시스템 물이 들어 있는 비커로 옮기고 10분 더 그대로 두십시오. 다음으로, 물과 물고기를 소설 탱크에 부드럽게 붓습니다.
스틸 프레임 비디오 이미지를 사용하여 탱크의 높이를 계산하고 3으로 나누어 탱크의 상단, 중간 및 하단 영역을 찾고 추적 소프트웨어를 사용하여 각 영역에서 보낸 시간과 총 이동 거리를 결정합니다. 성체 물고기는 낯선 수조에 넣었을 때 일반적으로 스트레스로 인해 아래쪽 절반을 선호합니다. 스트레스 수준이 낮아짐에 따라 점차 더 자주 정상까지 수영합니다. 실험당 최소 10마리의 물고기를 테스트하십시오. 예시 프로토콜에서 새로운 탱크 다이빙 테스트를 위한 실험 설정을 볼 수 있습니다.
- 250ml 비커와 최소 2개의 저장 탱크에 물고기 시스템 물을 채우는 것으로 시작합니다. 실험 당일 아침, 각 실험 조건에 대해 최소 10마리의 성체 제브라피시를 개별 수용 수조로 옮긴 후 모든 물고기를 최소 1시간 동안 적응을 위해 행동실로 옮깁니다. 동물의 상태나 유전자형이 실험자에게 보이지 않도록 탱크에 라벨을 붙이고, 그물을 사용하여 미리 채워진 비커에 성체 한 명을 부드럽게 놓습니다.
다 자란 물고기가 비커에 10분 동안 적응하도록 한 후 비커의 물과 물고기를 실험용 소설 탱크에 부드럽게 붓습니다. 물고기가 수조에 들어가자마자 카메라 녹화를 시작하고 물고기가 더 이상 조난을 당하지 않도록 설정에서 멀리 떨어집니다. 녹음이 끝나면 새로운 수조에서 개체를 제거하고 물고기를 새 저장 탱크에 넣습니다.
본 논문은 성체 제브라피쉬를 이용한 새로운 탱크 다이빙 테스트 프로토콜을 통해 스트레스에 대한 행동 반응을 평가하는 방법을 제시합니다. 이 실험 설정은 물고기를 순화시키고 탱크 내 움직임을 추적하여 서로 다른 구역에 대한 선호도를 분석하는 과정을 포함합니다.
제브라피시의 새로운 수조 다이빙 분석법(novel tank diving assay)은 선천적 스트레스 반응에 대한 표준화된 행동 판독 결과를 제공하여, 신경 행동 연구의 초기 단계 표적 검증을 지원합니다. 정량적인 움직임 추적과 구역 선호도 지표를 통해 CNS 중심의 발굴 포트폴리오에서 기전적 리스크 감소와 예측 신뢰도를 확보할 수 있습니다. 본 분석법은 제브라피시를 전임상 파이프라인 내 스트레스 조절 중재법을 평가하기 위한 확장 가능하고 재현 가능한 모델로 활용할 수 있게 합니다.
본 분석법은 초기 가설 검증부터 리드 물질 발굴 및 신경행동학적 표적에 대한 전임상 검증에 이르기까지의 발견 연속체에 통합됩니다.
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마지막 업데이트: 22 8월 2026