새로운 탱크 다이빙 분석: 제브라피시의 선천적 스트레스 반응을 연구하는 방법

JoVE Encyclopedia of Experiments

생물학

0 조회수 • 2:32 분 • April 30th, 2023

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- 시작하려면 새로운 탱크 뒤에 적외선을 놓고 탱크와 빛 사이에 흰색 아크릴 시트를 놓아 빛을 확산시키고 눈부심을 방지합니다. 이제 수조의 3/4을 수돗물의 역삼투압에 의해 생성된 어류 시스템 물로 채웁니다. 수용 탱크에서 순응된 물고기 한 마리를 물고기 시스템 물이 들어 있는 비커로 옮기고 10분 더 그대로 두십시오. 다음으로, 물과 물고기를 소설 탱크에 부드럽게 붓습니다.

스틸 프레임 비디오 이미지를 사용하여 탱크의 높이를 계산하고 3으로 나누어 탱크의 상단, 중간 및 하단 영역을 찾고 추적 소프트웨어를 사용하여 각 영역에서 보낸 시간과 총 이동 거리를 결정합니다. 성체 물고기는 낯선 수조에 넣었을 때 일반적으로 스트레스로 인해 아래쪽 절반을 선호합니다. 스트레스 수준이 낮아짐에 따라 점차 더 자주 정상까지 수영합니다. 실험당 최소 10마리의 물고기를 테스트하십시오. 예시 프로토콜에서 새로운 탱크 다이빙 테스트를 위한 실험 설정을 볼 수 있습니다.

- 250ml 비커와 최소 2개의 저장 탱크에 물고기 시스템 물을 채우는 것으로 시작합니다. 실험 당일 아침, 각 실험 조건에 대해 최소 10마리의 성체 제브라피시를 개별 수용 수조로 옮긴 후 모든 물고기를 최소 1시간 동안 적응을 위해 행동실로 옮깁니다. 동물의 상태나 유전자형이 실험자에게 보이지 않도록 탱크에 라벨을 붙이고, 그물을 사용하여 미리 채워진 비커에 성체 한 명을 부드럽게 놓습니다.

다 자란 물고기가 비커에 10분 동안 적응하도록 한 후 비커의 물과 물고기를 실험용 소설 탱크에 부드럽게 붓습니다. 물고기가 수조에 들어가자마자 카메라 녹화를 시작하고 물고기가 더 이상 조난을 당하지 않도록 설정에서 멀리 떨어집니다. 녹음이 끝나면 새로운 수조에서 개체를 제거하고 물고기를 새 저장 탱크에 넣습니다.

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마지막 업데이트: 22 8월 2026