0 조회수 • 2:05 분 • April 30th, 2023
- 먼저, 마취된 물고기를 등쪽이 위를 향하도록 미리 적신 스펀지에 넣습니다. 전기천공법 전에 유전 물질을 표적 조직, 이 경우 텔뇌팔론(telencephalon)이라고 하는 전뇌의 일부에 주입합니다. 다음으로 소량의 초음파 젤을 머리에 바릅니다. 또한 효율적인 작동을 위해 전극 끝에 젤을 바르십시오. 양극을 머리의 복부 쪽에 놓고 음극을 등쪽 쪽에 놓습니다.
이제 전극을 머리에 부드럽게 누르고 여러 펄스의 전류를 투여합니다. 전류는 전기천공된 세포의 원형질막에 일시적인 기공을 만들고 투과성을 높입니다. 전류는 또한 주변에 존재하는 DNA 발현 플라스미드 또는 RNAi 올리고뉴클레오티드와 같은 음전하를 띤 입자가 세포로 이동하는 것을 용이하게 합니다. 다음 예에서는 전기천공법을 사용하여 새로운 뉴런 생성을 담당하는 줄기세포인 뇌실막세포에 재조합 플라스미드를 도입합니다.
- 물고기 텔렌스팔론을 소량의 초음파 젤로 덮습니다. 플라스미드 주입 동물의 전기천공을 위해 배출 설정에서 스폰지를 제거하고 전극 팁의 내부를 초음파 젤에 담그십시오. 양극은 머리의 복부 쪽에, 음극은 등쪽 쪽에 놓고 전극 사이에 물고기 머리를 배치합니다. 그런 다음 물고기의 몸을 스펀지에 고정한 상태에서 전극을 텔렌스팔론에 부드럽고 정확하게 누르고 풋 페달로 전류를 투여하면서 5개의 펄스가 모두 끝날 때까지 전극을 제자리에 유지합니다.