정소주사: 성체 마우스에 조직 특이적 암세포 이식

먼저 마취된 쥐를 수술 침대에 눕히고 통증을 완화하는 진통제인 부프레노르핀을 어깨에 피하로 주사합니다. 다음으로, 쥐의 코를 코 마스크에 삽입하여 동물에게 이소플루란과 같은 산소와 마취제를 지속적으로 공급합니다. 실험실 테이프를 사용하여 팔다리를 고정시키고 클로르헥시딘과 요오드, 두 가지 소독제, 에탄올로 가슴 피부를 살균합니다.

이제 가위를 사용하여 전방 흉벽 중앙을 절개하고 집게로 피부를 뒤집어 흰색 유방 지방 패드를 노출시킵니다. 생물 발광 단백질을 발현하는 암세포 현탁액을 유방 지방 패드에 조심스럽게 주입합니다. 역류를 방지하기 위해 바늘을 뽑기 전에 5초 동안 기다리십시오. 지방 패드를 부드럽게 풀고 멸균 봉합사를 사용하여 절개 부위를 꿰매고 봉합합니다.

유방 지방 패드 내부에 주입된 암세포는 빠르게 분열하여 종양을 형성합니다. 시술 후 동물을 우리로 되돌려 주십시오. 동물이 마취에서 회복되어 자유롭게 움직이기 시작할 때까지 동물을 면밀히 모니터링하십시오.

다음 프로토콜에서는 루시페라아제를 발현하는 유방 선암 세포를 성체 마우스의 유방 지방 패드에 이식합니다.

먼저 마취된 암컷 마우스에서 발가락 꼬집음에 대한 반응이 없는지 확인하고 동물의 팔다리를 수술 보드에 테이프로 붙입니다. 멸균 면봉을 사용하여 클로르헥시딘, 요오드, 75% 에탄올로 수술 부위를 소독하고 전방 흉벽 중앙을 5mm 정도 절개합니다. 그런 다음 절개 부위에 인접한 피부의 오른쪽을 들어 올리고 멸균 현미해부 가위를 사용하여 흉벽에서 피부를 분리합니다.

피부를 뒤집어 올바른 넘버 2 유방 지방 패드를 노출시키고 28.5 게이지 바늘이 장착된 1밀리리터 인슐린 주사기를 사용하여 상처를 통해 20마이크로리터의 암세포 현탁액을 지방 패드에 조심스럽게 주입합니다. 바늘을 제거하기 전에 젤라틴 같은 암세포 단백질 혼합물이 응고될 때까지 지방 패드 내에서 바늘을 5초 동안 잡고 멸균 5-0 비흡수성 봉합사로 절개 부위를 닫습니다. 그런 다음 동물이 완전히 누울 때까지 모니터링하면서 깨끗한 케이지에 동물을 놓습니다.