zPDX-침습성 분석: 제브라피시 배아 이종이식편에서 전이성 암세포의 침습적 행동 조사

제브라피시 배아 이종이식편은 암세포 침입을 연구하는 데 유용합니다. 형광 표지된 전이성 암세포와 비암성 세포를 두 개의 형질전환 배아의 주위 공간에 주입하여 이종이식 모델을 준비합니다. perivitelline space는 배아 periderm과 난황 주머니 사이의 공간입니다. 원하는 기간 동안 배아가 자라도록 합니다.

이 기간 동안 전이성 암세포는 주사 부위에서 공격적으로 분열하는 반면 비암성 세포는 안정적으로 유지됩니다. 배양 후 파스퇴르 피펫을 사용하여 배아를 유리 바닥 현탁액 접시에 옮깁니다. 여분의 난자 수분을 제거하고 이미징을 위해 원하는 위치에 배아를 배치합니다. 접시 위에 덮개 슬립을 유지하고 접시를 명시야 현미경 아래에 놓습니다.

이미지를 캡처하고 두 가지 유형의 세포의 침입 행동을 분석합니다. 전이성 암세포는 주사 부위에서 혈관을 침범하는 경향이 있습니다. 그들은 순환을 따라 이동한 다음 주변 조직으로 침입하여 증식합니다. 대조적으로, 비암성 세포는 주사 부위에 남아 있습니다. 예시 프로토콜에서는 전이를 연구하기 위해 제브라피시 이종이식 모델에서 큐비어의 주위 공간과 관에 유방암 세포를 주입합니다.

전이를 시각화하려면 파스퇴르 피펫을 사용하여 주입된 제브라피시 배아를 유리 바닥 폴리스티렌 접시에 옮기고 과도한 계란 물을 제거합니다. 종양 세포 파종의 일반적인 패턴을 얻기 위해 저배율로 설정된 컨포칼 현미경으로 배아의 전신을 이미지화합니다.

488 나노미터 레이저를 사용하여 제브라피시 배아 혈관 구조를 시각화하고 543 나노미터 레이저를 사용하여 적색 형광 마커로 표지된 이식된 종양 세포를 시각화합니다. 다음으로, 8-10단계로 배아를 스캔하여 고품질 이미지를 획득합니다.

• Zebrafish Embryo Xenografts - A research tool used to study cancer cell invasion.
• Perivitelline Space - A niche between the zebrafish embryo periderm and the yolk sac.
• Metastatic Cancer Cells - Malignant cells that can spread aggressively and invade lots areas .
• Non-cancerous Cells - Stable cells that do not invade or proliferate like cancer cells.
• Invasiveness - The capacity of cancer cells to infiltrate healthy tissues.

• Define the concept of Zebrafish Embryo Xenografts - These are used for studying cancer invasion (e.g., invasiveness).
• Outline the Perivitelline Space - It serves as the injection site for xenografts (e.g., perivitelline space zebrafish).
• Describe Metastatic Cancer Cells and their aggressive division and invasion traits.
• Connect to Experiment - The injected metastatic and non-cancerous cells in embryos facilitate the investigation of cellular behaviors.

• What is Zebrafish Embryo Xenografts and how it aids in studying cell invasiveness?
• What is the role of Perivitelline Space in these xenograft models?
• What difference in behavior can be expected between Metastatic Cancer Cells and Non-cancerous Cells?

• Practical Applications - Xenografts help in understanding cancer cell behaviors (e.g., invasiveness).
• Industry Impact - Such studies can guide developments in healthcare and cancer research.
• Societal Importance - Findings may result in better cancer treatments (e.g., combating malignancy).
• Scientific Advances -The methodology aids in real-time tracking of cell actions.