JoVE 실험 백과사전
암 연구
0 조회수 • 5:35 분 • April 30th, 2023
- 폐 점안은 암 또는 기타 병리학이 있는 쥐의 폐를 분석하기 위해 기관에 물질을 직접 주입하는 데 사용됩니다. 먼저 마취된 마우스를 경사면 삽관 플랫폼에 놓고 목의 털을 면도합니다. 목 아래를 가위로 작게 절개하고 집게를 사용하여 피부를 부드럽게 당겨 기관을 드러냅니다. 입을 통해 기관에 카테터를 삽입하고 절개를 통해 관찰합니다. 예시 액체를 기관에 주입하고 빈 주사기로 공기를 주입하여 폐를 빠르게 팽창시켜 액체를 적절하게 분배합니다.
상처를 봉합하고 마우스를 회복실에 넣습니다. 원하는 기간이 지나면 마우스를 희생하고 폐를 노출시킵니다. 총 폐활량을 정량화하기 위해 고정제로 팽창시킵니다. 고정제가 있는 튜브에 폐를 넣습니다. 아르키메데스의 원리를 사용하여 고정된 폐 용적을 측정합니다. 폐를 물에 넣고 유선 장치로 누르십시오. 물에 잠긴 폐에 의해 옮겨진 물의 무게에 주목하십시오. 고정된 좌측 폐의 폐 용적량은 일반적으로 생체 내에서 측정된 것보다 작습니다.
- 절차를 시작하기 전에 시판되는 1인치 길이의 20게이지 정맥 캐뉼라 끝을 수동으로 약간 구부립니다. 그런 다음 발가락 꼬집음에 대한 반응 부족으로 마취를 확인한 후 성인 마우스의 눈에 연고를 바르고 큰 사무실 바인더와 봉합 루프가 있는 경사진 플랫폼에 누운 자세로 마우스를 고정합니다. 목의 복부 부분을 면도하고 70% 알코올로 피부를 소독합니다. 그런 다음 날카로운 가위를 사용하여 아래 앞니에서 약 12mm 아래 목을 작게 절개합니다.
그런 다음 집게를 사용하여 기관의 복벽이 보일 때까지 목의 피부를 꼬리 방향으로 부드럽게 당깁니다. 그런 다음 혀를 부드럽게 집어넣고 구부러진 끝이 마우스의 복부 표면 쪽으로 기울어진 상태에서 캐뉼라를 삽입합니다. 방금 시연한 것처럼 목 피부를 다시 부드럽게 당기고 캐뉼라를 기관에 삽입합니다. 기관에서 카테터가 관찰될 수 있으면 카테터를 약 5mm 전진시켜 성대를 통과시킵니다.
이제 50마이크로리터의 점안액이 주입된 젤 로딩 피펫의 끝을 카테터의 하단 허브에 놓습니다. 마우스의 호흡과 동기화된 팁에서 유체의 움직임을 확인한 다음 주입물을 주입합니다. 1밀리리터 주사기를 사용하여 즉시 카테터를 통해 0.6ml의 공기로 폐를 팽창시켜 액체가 폐 깊숙이 분배되도록 한 다음 캐뉼라를 제거합니다. 소량의 시아노아크릴레이트 접착제로 수술 상처를 봉합하고 완전히 회복될 때까지 모니터링하면서 마우스를 개별 케이지에 넣습니다.
마지막 실
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