정소성 동종이식 종양 이식: 췌장 종양 마우스 모델을 생성하는 기술

- 정형소성 동종이식 종양 이식 시, 암성 기증자의 종양 세포 또는 종양 조각이 종양 조직형과 일치하는 장기 또는 부위에 있는 동일한 종에 속하는 수혜자에게 이식됩니다. 췌장 기원 세포를 포함하는 종양을 가진 마취된 기증자 마우스를 채취하는 것으로 시작합니다. 해당 부위를 소독하고 외과적으로 종양을 적출합니다. 조직을 씻어 혈액을 제거하고 조각으로 자릅니다. 다음으로, 마취된 수혜 마우스를 오른쪽 측면 위치에 놓고 복부 부위를 살균합니다. 수술로 비장을 노출시키십시오.

그런 다음 비장 아래에서 췌장의 일부를 부드럽게 당겨 빼냅니다. 종양 조각을 췌장에 놓고 함께 봉합합니다. 복부를 닫고 마우스가 케이지에서 회복되도록 합니다. 수혜자 마우스를 매일 모니터링하여 정형소 췌장 종양의 성장을 관찰합니다. 다음 프로토콜에서는 C57 black 6 기증자 마우스에서 C57 black 6 수혜자 마우스의 췌장으로 췌장 관 선암 동종이식의 orthotopic 이식을 보여줍니다.

- 저울을 사용하여 C57 black 6 마우스의 체중을 모니터링합니다. 또한 캘리퍼 측정을 통해 종양을 보유한 기증자 마우스의 종양 부피를 모니터링합니다. 프로토콜에 따라 생물학적 위험 후드에 동물을 안락사시킨 후 요오드 면봉을 사용하여 종양 주변 피부를 살균합니다. 텍스트 프로토콜에 자세히 설명된 대로 종양을 외과적으로 제거한 후 섭씨 4도로 사전 냉각된 PBS 20ml가 들어 있는 페트리 접시에 종양을 넣습니다. 오염된 혈액이 있는 경우 종양을 다른 페트리 접시로 옮기고 PBS로 종양을 씻습니다.

종양을 반으로 자릅니다. 여분의 피부, 혈관, 석회화 및/또는 괴사를 제거합니다. 손상되지 않은 종양 조각만 선택하여 멸균된 50ml 원심분리 튜브에 넣습니다. 약리학 연구를 위해 튜브를 별도의 동물실로 운반하기 전에 PBS 20ml를 추가합니다. 정소성 이식을 준비하려면 완전히 마취된 마우스를 오른쪽 측면 위치의 실험 보드에 고정합니다. 비장 주변 피부를 요오드로 소독한 다음 75% 에틸 알코올로 탈요오드화합니다.

비장의 중간 지점을 찾아 복부를 1cm 수직 절개하여 비장을 노출시킵니다. 끝이 편평한 핀셋을 사용하여 비장 아래의 췌장 조직 일부를 부드럽게 뽑아내고 종자 마우스의 마우스 동종이식 종양 조각을 9-0 흡수성 수술 봉합사로 수혜자 마우스의 췌장에 봉합합니다. 더블 솔기로 6-0 실크 봉합사로 복부를 닫습니다. 압축을 통해 항상성을 달성합니다