생물 발광 직소성 췌장암 마우스 모델: 마우스의 암 진행을 모니터링하기 위한 비침습적 기술

- 생물 발광 이미징을 통해 암세포를 비침습적으로 추적하여 동물 종양 모델 내에서 암세포의 분포를 연구할 수 있습니다. 마우스 모델을 생성하려면 마취된 마우스를 가져다가 복부 부위를 살균합니다. 비장의 위치를 찾기 위해 외과적 절개를 합니다. 복강에서 꺼내고 아래에 있는 췌장을 노출시킵니다.

다음으로, 적절한 하이드로겔 매트릭스에 혼합된 형질도입된 췌장암 세포의 냉각된 현탁액을 마우스의 췌장에 주입합니다. 이 유전자 변형 세포는 루시페라아제 효소를 발현합니다. 주사기를 제자리에 고정하여 세포 매트릭스 현탁액이 응고되어 누출을 최소화할 수 있도록 합니다.

장기를 복강에 다시 놓고 절개 부위를 봉합합니다. 마우스가 복구되도록 합니다. 종양이 발달하면 마우스를 마취하고 생물 발광 기질 용액을 꼬리 정맥에 주입합니다. 분자가 루시페라제 발현 세포를 포함하는 종양 부위에 도달하도록 합니다.

세포 내에서 루시페라제 효소는 기질 분자의 산화를 촉매하여 빛을 방출합니다. 쥐를 생물 발광 이미징 챔버에 넣어 종양의 이미지를 캡처하고 종양 성장 역학을 연구합니다. 다음 프로토콜에서는 루시페라아제를 발현하는 췌장암 세포를 주입하여 생물발광 직소성 췌장암 마우스 모델의 생성을 보여줍니다.

- 멸균 수술 기구를 사용하여 정중선에서 측면으로 약 2mm 떨어진 피부를 1.5cm 절개합니다. 그런 다음 아래 복부 근육을 1.5cm 절개합니다. 다음으로, 멸균 집게를 사용하여 비장을 찾아 복강에서 부드럽게 제거합니다. 멸균 면봉을 따라 비장을 고정하여 아래에 있는 췌장을 노출시킵니다. 그런 다음 비장에 인접한 췌장의 꼬리를 찾습니다.

Matrigel 세포 현탁액을 재현탁하고 췌장 꼬리에 20마이크로리터를 주입합니다. 주사 후 Matrigel이 응고될 때까지 30-60초 동안 주사기를 제자리에 유지합니다. 이 중요한 단계는 세포 누출을 최소화합니다.

바늘을 제거한 후 주입 부위를 검사하여 누출이 발생하지 않았는지 확인하십시오. 그런 다음 비장과 췌장을 복강으로 되돌립니다. 연속 스티치를 사용하여 둥근 바늘로 흡수 가능한 꼰 4-0 봉합사로 마우스의 복부 근육 조직을 닫습니다.

다음으로, 연속 스티치를 사용하여 절단 바늘로 흡수되지 않는 모노필라멘트 6-0 봉합사로 외부 피부를 닫고 베타딘을 바릅니다. 그런 다음 흡입된 마취제에서 마우스를 제거하고 수술 후 진통제로 kg당 0.05-0.1mg의 부프레노르핀을 피하로 주입합니다. 쥐가 음식과 물에