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암 연구
0 조회수 • 2:44 분 • April 30th, 2023
- 세포는 세포 외 기질에 작용하는 기계적 힘을 생성합니다. 이 힘을 견인력이라고 합니다. 세포는 이동 및 증식과 같은 다양한 작업을 수행하기 위해 견인력을 가합니다.
전이성 암세포는 건강한 세포보다 더 큰 견인력을 발휘합니다. 따라서 우리는 세포가 탄성 기질에 가하는 견인력을 측정하기 위해 견인 세포 분석 분석을 수행합니다. ECM을 in vitro에서 모방한 겔인 폴리아크릴아미드 하이드로겔에 원하는 양의 대장암 세포를 파종하는 것으로 시작합니다. 겔은 세포가 표면에 부착되도록 돕는 피브로넥틴 단백질과 위치 변화에 대한 마커 역할을 하는 형광 구슬로 구성됩니다.
원하는 기간 동안 세포를 배양합니다. 세포는 겔에 부착되어 견인력을 발휘하여 형광 구슬의 변위를 유발합니다. 이제 플레이트를 형광 현미경 아래에 놓고 변위된 형광 구슬의 이미지를 촬영합니다. 다음으로, 세포를 분리하기 위해 플레이트에 원하는 양의 트립신을 첨가하고 적절한 소프트웨어를 사용하여 세포가 가하는 견인력을 분석합니다. 다음 프로토콜에서는 인간 대장암 세포의 세포 견인을 분석하기 위해 견인력 현미경 분석을 수행합니다.
- 견인력 현미경 분석을 수행하려면 먼저 0.25% 트립신-EDTA 10% SDS 용액을 수조에서 섭씨 37도까지 10분 동안 예열한 후 견인 실험을 시작합니다. 세포 배양 인큐베이터에서 한 번에 하나의 겔을 제거하고 현미경 스테이지에 놓습니다. 시야에서 단일 셀을 찾은 후 view, 페트리 접시 뚜껑을 제거하고 셀의 위상차 이미지를 촬영합니다.
그런 다음 이미징 모드를 형광으로 전환하고 적절한 필터를 선택합니다. 현미경을 이동하지 마십시오.tage 또는 samp이 시간 동안. 그런 다음 세포 견인에 의해 변위된 형광 구슬의 이미지를 촬영합니다. 이제 페트리 접시에 1ml의 트립신 SDS 용액을 첨가하여 겔에서 세포를 분리합니다. 세포를 제거한 후 구슬의 참조 이미지를 촬영합니다.