JoVE 실험 백과사전
암 연구
0 조회수 • 3:02 분 • April 30th, 2023
- 실험적 암 마우스 모델에서 동물에서 유발된 암은 표현형이 인간의 암과 유사합니다. 그들은 잠재적인 치료법의 효능을 평가할 수 있는 효율적인 플랫폼을 제공합니다. 2단계 피부 발암 모델을 유도하기 위해 먼저 면역이 저하된 마취된 마우스를 엎드린 자세로 준비합니다. 털을 깎아 밑에 있는 피부를 드러냅니다. 첫 번째 단계에서는 노출된 등쪽 피부에 강력한 종양 유발제를 바릅니다.
휴지기 또는 휴지기 단계에 있는 모낭에는 비활성 피지선이 있습니다. 그 결과 피지 흐름이 부족하면 이러한 모낭 내에 화합물이 축적될 수 있습니다. 이 화합물은 주변 세포로 확산되어 주로 모낭 줄기세포 또는 일차 각질세포 줄기세포에서 표적 유전자 돌연변이를 유도합니다. 변형된 유전자 발현은 이러한 세포에서 종양 시작을 유발합니다.
두 번째 단계에서는 원하는 시간 간격 동안 등쪽 피부에 적절한 종양 성장 촉진제를 반복적으로 도포합니다. 화학 물질은 시작된 세포 집단의 확장을 자극합니다. 지속적인 세포 증식은 유두종(papillomas)이라고 하는 발암성 파생물의 형성으로 이어집니다.
다음 프로토콜에서는 돌연변이 유발 물질인 DMBA와 성장 촉진제인 TPA를 사용하여 2단계 피부 발암 마우스 모델을 생성하는 방법을 보여줍니다.
- 실험을 시작하기 전에 공격적인 7-9주 된 쥐를 별도의 우리에 수용하여 싸움과 피부 병변을 피하십시오. 피부 유두종 유도의 경우 먼저 실험 동물의 등 피부를 면도하고 마우스의 무게를 개별적으로 측정합니다. 면도 48시간 후, 피펫을 사용하여 200마이크로리터의 아세톤에 50마이크로그램의 DMBA를 마취한 각 마우스의 면도 부위에 도
포합니다.피부 유두종 촉진을 위해 DMBA 적용 후 7일 후에 실험이 끝날 때까지 일주일에 두 번, 200마이크로리터의 아세톤에 5마이크로그램의 TPA를 함유하여 피부를 치료합니다. 동물의 유두종을 검사하고 매주 각 유두종의 크기를 사진으로 찍어 지도에 기록합니다.
직경이 1mm 이상인 만져질 수 있는 종괴가 일주일 이상 지속되면 유두종으로 간주됩니다.