Porcine Cumulus Oocyte Complex Isolation: 체외 수정을 위해 돼지 난포 난포에서 Cumulus Oocyte 복합체를 분리하는 기술

0 조회수3:02 • July 8th, 2025

돼지 난모세포는 난구-난모세포 복합체 또는 COC를 형성하는 난구 세포의 조밀한 다층 클러스터로 둘러싸여 있습니다. 가장 안쪽 난구 세포는 난모세포의 투명대를 통해 과정을 확장합니다. 이러한 과정은 난모세포와 주변 난구 세포 사이의 분자 간 이동을 돕는 갭 접합부와 중간 접합부를 모두 발달시킵니다. 이러한 양방향 상호 작용은 성공적인 체외 수정 또는 IVF의 중요한 결정 요인인 COC의 생존 가능성을 유지합니다.

COC를 분리하려면 성숙 배지가 들어 있는 페트리 접시에 돼지 난소 난포 몇 개를 담그십시오. 이 배지에는 체외 난모세포 성숙에 필요한 호르몬이 포함되어 있습니다. 난포를 해부하여 COC와 난포액을 페트리 접시로 방출합니다. 이 유체는 난모세포 능력에 필수적인 추가 영양소와 호르몬으로 성숙 배지를 보충합니다.

방출된 모낭 내용을 흡인하여 다른 페트리 접시로 옮깁니다. 적당히 과립화된 세포질을 가진 둥근 난모세포와 난구 세포로 둘러싸인 온전한 극체로 구성된 정상적인 형태를 나타내는 손상되지 않은 COC를 현미경으로 시각화하여

플레이트를 시각화합니다.

단일 COC를 분리하여 IVF 플레이트의 성숙 배지 함유 중앙 웰로 옮깁니다. 나중에 사용할 때까지 플레이트를 최적의 온도에서 보관하십시오.

중간 크기의 난포에서 COC를 분리하려면 2-3개의 난소를 HM으로 채워진 멸균 10cm 페트리 접시로 옮깁니다. 멸균 수술용 # 15 블레이드로 돌출된 난포의 표면을 부드럽게 자르면 난포액과 COC가 페트리 접시로 흘러나옵니다. 일회용 주사기에 부착된 28게이지 바늘로 모낭 내용물을 흡인하고 다른 페트리 접시로 옮깁니다.

IVF 페트리 접시를 준비하려면 중앙 웰에 HM 1밀리리터를 추가하고 외부 링에 HM 3-4방울을 떨어뜨립니다. 그런 다음 폴리카보네이트 마이크로피펫을 사용하여 손상되지 않은 COC를 외부 링의 HM 방울로 이동하고 3-4회 짧게 헹굽니다. 완료되면 개별적으로 중앙 우물로 옮깁니다. IVF 플레이트를 인큐베이터에 보관하십시오.

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마지막 업데이트: 29 8월 2026