샙터 셀 카운터를 사용하여 세포 배양 동안 휴대폰 번호를 결정

Scepter Cell Counter는 세포 계수, 세포 직경 및 부피 모니터링, 세포 집단의 건강 및 품질 검사를 위한 휴대용 자동화 장치입니다. 다른 계수 방법에 비해 정확도 향상, 사용 용이성, 세포 계수 비용 절감 등 상당한 이점을 제공합니다. 홀을 사용하여 그래픽 디스플레이의 지침에 따라 일회용 센서로 세포를 흡인합니다.

그런 다음 세포를 계수하고 장치가 세포 농도와 통계를 보고하면 컴퓨터에 업로드하여 분석할 수 있습니다. 안녕하세요, 저는 소냐입니다. 저는 이곳 밀포트의 연구 과학자인데, 오늘은 홀을 사용하는 방법을 보여드리

세포 계수기: 세포 계수는 체외 세포 배양을 위한 필요하지만 지루한 단계입니다. 일관된 세포 농도는 실험의 재현성과 정확성을 보장합니다. 세포 수는 세포 건강 및 증식 속도를 모니터링하고, 후속 실험을 위한 불멸 또는 형질전환 시딩 세포를 평가하고, 형질 주입 또는 감염을 수행하고, 속도와 정확성이 필요함에도 불구하고 세포 기반 분석을 준비하는 데 중요합니다.

세포 계수에서 400명의 연구원 중 71%가 혈세포 분석기를 사용하여 세포 계수를 조사했습니다. 혈구 세포 분석은 저렴하지만 힘들고 사용자 편향과 오용에 노출되어 부정확한 계수를 초래할 수 있습니다. 혈구 세포 분석에서 오류의 원인으로는 샘플의 불균일한 세포 분포, 샘플의 세포가 너무 많거나 너무 적은 것 등이 있습니다.

주어진 세포가 정의된 계수 영역 내에 속하는지 여부에 대한 주관적인 결정. hemo cytometer의 오염, 사용자 tous variation 및 hemo cytometer filling rate의 변화는 수동 계수와 관련된 지루함을 완화합니다. 29%자동 세포 계수 장치를 사용하여 세포를 계수하는 연구원의

그러나 대부분의 연구자들에게 이러한 대형 탁상용 기기와 관련된 가격은 사용에 장벽이 됩니다. Scepter cell counter는 사용하기 쉬운 핸드헬드 형식으로 비교적 저렴한 비용으로 코터 카운팅의 자동화 및 정확성을 제공하는 자동화된 핸드헬드 장치입니다. 이 시스템은 신호 처리, 데이터 저장 및 그래픽 디스플레이를 감지하기 위해 아날로그 및 디지털 하드웨어의 조합을 사용하여 소형 형식으로 임피던스 기반 입자 감지의 Coter 원리를 사용합니다.

일회용 센서는 마이크로 제작 셀 감지 영역으로 설계되어 서브미크론 및 서브 피콜리터 해상도에서 셀 크기와 셀 부피를 구별할 수 있으며, 정밀 액체 처리 채널 및 전자 장치로 향상되었습니다. Scepter cell counter는 세포 집단 통계를 사용할 히스토그램으로 그래픽으로 표시합니다. 홀 세포 계수기는 인산염 완충 식염수에서 세포의 단일 세포 현탁액을 희석하는 것으로 시작합니다.

밀리리터 당 10, 000에서 500, 000 세포의 농도가 최적입니다. 100마이크로리터의 희석된 셀을 1.5ml 마이크로뷰 튜브 튜브로 옮깁니다. 기기 뒷면에 있는 토글을 길게 눌러 홀 셀 카운터를 켜고 화면 지침이 나타날 때까지 기다립니다.

메시지가 표시되면 전극 감지 패널이 기기 전면을 향하도록 하여 센서를 홀 장치 끝에 연결합니다. Scepter 센서는 전자 감지 영역과 통합 셀 감지 전극이 있는 정밀 성형 샘플링 챔버로 구성됩니다. 이 센서를 사용하면 서브미크론 해상도에서 세포 크기를 구별하고 서브 피콜리터 해상도에서 세포 부피를 구별할 수 있습니다.

일관된 센서 엔지니어링을 통해 동일한 시료 부피가 계수되고 정확한 크기 측정이 이루어집니다. 센서가 연결되면 다음과 같이 화면의 지시에 따라 계수 프로세스의 각 단계를 수행합니다. 화면이 읽히면 플런저를 누르고 있으면 플런저를 누르기 시작하면 화면은 센서를 담그고, 센서를 세포 현탁액에 담그고, 플런저를 해제하여 세포 현탁액을 센서로 흡인합니다.

플런저는 전기 신호로 작용하며 샘플과 데드 볼륨을 센서로 끌어들입니다. 플런징의 속도나 정확도는 파이펫팅과 마찬가지로 중요하지 않습니다. 이 프로세스는 준비가 되면 몇 초 정도 걸립니다.

기기에서 신호음이 울리고 sample이 로드되어 화면에 표시됩니다. 샘플이 센서에 로드되면 감지 영역을 통해 추출되어 셀 크기와 셀 부피를 평가합니다. 그런 다음 마이크로 채널을 통해 50마이크로리터의 샘플이 계수되면 센서는 기기에 계수를 중지하도록 지시합니다.

계수가 완료되면 기기 화면에 계수 완료가 표시됩니다. 센서를 제거하고 폐기하십시오. 지시에 따라 센서를 제거하고 폐기합니다.

그러면 기기는 화면에 셀 크기 또는 직경의 히스토그램과 밀리리터당 셀 농도를 표시합니다. 계수가 완료되고 히스토그램이 기기에 표시된 후 토글 버튼을 눌러 게이트를 적용하거나 자동 게이팅을 선택하거나 마지막을 사용하여 히스토그램 프로파일을 기반으로 게이트를 자동으로 설정하거나 이전 카운트의 게이트를 사용합니다. 선택에 관계없이 게이트를 수동으로 fine으로 이동할 수 있습니다.

데이터를 조정하고 토글 버튼을 다시 눌러 왼쪽 게이트를 선택한 다음 토글을 스크롤하여 원하는 대로 게이트를 이동합니다. 그런 다음 토글을 다시 눌러 오른쪽 게이트를 활성화하고 토글을 스크롤하여 오른쪽 게이트를 배치합니다. 다시 클릭합니다.

새로운 세포 농도, 평균 세포 부피 및 직경이 표시됩니다. 토글을 양쪽으로 사용하여 날짜, 시간, 평균 셀 크기 및 평균 셀 볼륨 간에 표시를 전환할 수도 있으며 최대 72개의 히스토그램을 기기 자체에 저장할 수 있습니다. 데이터를 PC에 업로드하려면 PC의 디스플레이 화면에서 USB 케이블 포트를 통해 기기를 연결하십시오.

Scepter 소프트웨어 응용 프로그램을 두 번 클릭하여 소프트웨어를 시작합니다. 그런 다음 연결을 클릭합니다. 모든 카운트는 자동으로 소프트웨어로 이식됩니다.

Scepter 응용 프로그램 소프트웨어는 부피 또는 직경으로 배양물의 개체군 분포를 자세히 설명하는 히스토그램을 표시합니다. 그런 다음 다운로드한 파일을 Microsoft Excel로 내보낼 수 있으며, 여기서 원시 데이터는 지정된 셀 지름 또는 셀 볼륨의 bin에 표시됩니다. 카운팅을 위해 19개의 서로 다른 세포주를 준비하고, 이론적인 시작 농도를 aculter counter를 사용하여 측정했습니다.

그런 다음 이러한 세포 현탁액을 더 희석하여 이론적인 세포 농도에서 세포 현탁액을 얻었습니다. 그런 다음 홀 세포 계수기를 사용하여 세포 농도를 측정했습니다. 이 그림은 이론적인 세포 농도와 함께 5개의 대표 세포주에 대해 측정된 5가지 희석을 보여줍니다.

r-제곱 값으로 표시되는 높은 선형성은 셉터 계수가 넓은 선형 작동 범위에서 테스트된 세포주에 대해 신뢰할 수 있는 방법임을 보여줍니다. 홀 계수의 전반적인 상대적 정확도는 여기에서 홀 계수에서 얻은 데이터를 코터 계수에서 얻은 계수와 비교하는 데 설명되어 있습니다. scepter cell counts의 로그는 coter counts의 log에 대해 표시되며, 테스트된 모든 세포주에서 scepter count가 coter count와 일치함을 보여줍니다.

19개의 세포주를 계수하는 것은 Z 2 쿨터 계수기를 사용하여 수행되었습니다. 셉터 세포 계수기, V 세포 또는 계수 검사 시스템과 같은 자동화된 시력 기반 계수기 및 혈구 TER 계수는 동일한 세포 시작 현탁액 및 동일한 희석액을 사용하여 제조업체의 지침에 따라 수행되었습니다. 이 그림에 표시된 결과는 셉터 카운팅으로 측정된 세포 농도가 높은 선형성을 가진 이론적 세포 농도와 밀접하게 일치한다는 것을 보여줍니다.

변동 퍼센트 계수 또는 CV는 각 세포주의 각 희석에 대해 계산되었습니다. 여기에 표시된 각 계수 시스템에 대해 작동 범위 내의 세포 농도 및 계수 방법과 관련하여 19개 세포주에 대한 평균 CVS 백분율입니다. Scepter cell counter는 혈구 분석기 계수보다 더 정확하여 더 작은 표준 편차와 더 작은 평균 변동 계수를 표시합니다.

Scepter 계수는 혈구 세포 분석보다 10배 빠르며 다른 자동 카운터보다 빠릅니다. 여기서, SF 9개, MCF 7개 및 HC 2 93 셀은 본 비디오에 설명된 방법을 사용하여 계수되었습니다. 세포 농도를 측정하는 데 필요한 평균 시간을 기록했습니다.

혈구 세포 분석은 샘플당 한 번만 수행되었습니다. Scepter는 세포 크기에 따라 측정합니다. 따라서 세포 형태학의 모든 변화를 히스토그램에 포착할 수 있습니다.

건강한 배양은 멋진 종 모양의 가우스 분포를 나타내는 반면, 건강하지 않은 세포는 이를 일으켜 히스토그램을 왼쪽으로 이동시킵니다. 유사하게, 50%의 죽은 세포 집단을 50%의 살아있는 세포와 혼합했을 때 히스토그램 이동도 관찰되었습니다. 방금 말씀드렸듯이, 연구자들이 세포를 계수하는 방식에 혁명을 일으키고 있는 밀리포어(millipore)를 위한 새로운 셉터 세포 계수기(scepter cell counter)를 사용하는 방법을 보여드렸습니다.