모스키토 리어링 (A. gambiae)에 대한 프로토콜

제 이름은 Shish이고 John Hopkins School of Public Health의 Dr. George OU의 연구실에서 박사후 연구원으로 일하고 있습니다. 분자 미생물학 및 면역학과에서는 모기를 기르는 방법을 보여줄 것입니다. 실험실에서는 일반적으로 섭씨 27도, 습도 80%로 유지하는 곤충실에서 유지합니다.

곤충 실은 또한 자연 조건에있는 조건을 모방 할 수 있도록 12 시간 낮 밤 원으로 유지됩니다. 이것이 우리가 가지고 있는 곤충실이고, 이곳의 핵심 시설이며, 이 곤충을 관리하고 있습니다. 보시다시피, 이것들은 모든 다른 단계의 모기, 알, 유충 및 엿보기의 다른 단계에있는 모든 다른 쟁반을 가지고 있습니다.

이 쟁반에는 생후 11일 또는 12일 된 유충이 있는데, 이것은 성충 모기를 모으고 10% 정도의 자당 용액을 유지하는 케이지입니다. 모기 착용을 시작하려면 모기가 알을 낳기 위해 혈액의 단백질이 필요하기 때문에 모기에게 혈액을 공급해야 합니다. 그래서 첫날은 성충을 새장에 모아 10%의 자당을 유지한 후입니다.

첫째 날은 모기에게 피를 먹이는 것인데, 이것이 인공 막이 피를 먹이는 이유입니다. 이것은 우리가 모기를 먹이는 막에 사용하는 유리 모이통입니다. 우리는 여러분이 보시는 작은 구멍을 통해 혈액을 넣었고 그 안에 피가 들어 있었습니다.

측면 하단에는 37도로 유지되는 수중 분만에 연결된 두 개의 노즐이 있습니다. 37도의 피를 따뜻하게 유지하기 위해, 먹이를 먹기 위해 모이통을 준비하기 위해, 우리는 작은 위험을 감수합니다. 우리는 두 끝에서 네 면 모두에서 뻗은 다음 유리 공급기의 열린 면에 그것을 놓아 피부를 모방하는 얇은 멤브레인 시트를 만듭니다.

이것을 멤브레인 공급이라고 합니다. 이것은 순환 수조로, 물을 37도로 유지하고 유리 공급기를 통해 물을 순환시켜 혈액이 37도에서 따뜻하게 접합되도록 합니다. 그래서 우리는 유리 공급기를 작은 모세관을 통해 연결하고 그것을 순환 수조에 연결하고 수조를 켜서 물이 순환하고 물과 피가 두 개의 분리된 방에 있기 때문에 섞이지 않도록 합니다.

이것은 Phis Gambi 성인 모기의 케이지입니다. 이것은 순환 수조에 연결된 유리 피더이며 케이지 상단에 클램프를 놓고 200마이크로리터의 혈액을 추가합니다. 케이지에는 수컷 모기와 암컷 모기가 모두 있습니다.

피를 먹으러 오는 것은 암컷뿐이다. 먹이는 약 30분 동안 계속됩니다. 피를 먹인 지 이틀 후, 우리는 모기가 알을 낳을 수 있도록 모기의 우리 안에 달걀 컵을 넣었습니다.

이것이 수행되는 방법입니다. 우리는 작은 것을 가져다가 약간의 증류수로 부분적으로 채우고 무엇을 가져다가 종이를 채운 다음 원뿔 모양으로 싸서 증류수가 들어 있는 비커에 넣고 인다 고추가 mo를 얻는지 확인합니다. 이제 천천히 모기장을 열고 모기가 나오지 않도록 주의하고 달걀 컵을 안에 넣습니다.

컵을 케이지 안에 넣은 다음 날, 즉 4일째 되는 날, 컵을 케이지에서 천천히 꺼냅니다. 그리고 이것들은 알, 검은 알, 또한 죽은 모기가 있습니다. 달걀이 준비되면 플라스틱 쟁반에 넣습니다.

과거에는 플라스틱 트레이에 증류수가 채워져 있었습니다. 계란과 함께 필터 페퍼를 가져다가 꺼냅니다. 우리는 또한 갈은 생선 음식인 음식 A를 한 꼬집 넣고 트레이를 랙에 넣습니다.

우리는 트레이를 시작하는 날에 트레이의 수평을 맞춰야 하며 여기에 어떤 종도 있어야 합니다. 이것은 당신 다음이고, 이것은 당신이 쟁반에 계란을 넣은 다음 날입니다. 즉, 이것들은 하루가 지났지만 실제 프로토콜은 모기의 날 5일째입니다.

이것들은 검은 것들은 애벌레로 부화할 알입니다. 그리고 이것들은 모기 먹이입니다. 모기를 기르기 위해 우리는 보통 세 가지 종류의 음식을 사용합니다.

식품 A는 실제로 빻은 생선 사료이며, 이것은 우리가 모기 배양을 시작할 때, 모기가 X 단계에 있을 때 매일 푸리나에서 구입한 고양이 사료인 C 두 알을 추가하는 것입니다. 8-9일 후에 트레이의 물을 바꾸고 신선한 물을 줍니다. 그리고 그 때, 우리는 음식 A 대신 빻은 음식인 음식 B, 빻은 고양이 음식인 C를 한 꼬집, 그리고 유충에게 음식 C, 알, 부화 두 알을 추가합니다.

그리고 유충에는 세 가지 다른 단계가 있습니다. 첫 번째는 설치, 두 번째는 설치, 세 번째는 설치입니다. 이것은 5일 또는 6일 된 유충이 있는 쟁반입니다.

이 라비는 생후 9일에서 10일 정도 된 훨씬 나중 단계에 있습니다. 그 사이에 물이 바뀌고 담수가 추가되고 신선한 음식이 추가되었습니다. 이 트레이에는 성인과 PPE가 모두 있습니다.

보시다시피 모기장 아래를 날아다니는 성체입니다. 그리고 가장자리에서 모든 어두운 색의 PPE를 볼 수 있는데, 이는 성인에게 부화할 것입니다. 성체가 생기면 다음과 같은 새장에 넣을 준비가 된 것입니다.

내부에는 종이 타월 안감이 있고 10% 슈퍼 용액과 면 비누 주석이 들어 있는 작은 병이 있어 모기의 먹이 공급원 역할을 합니다. 그래서 우리는 뚜껑을 덮었고, 이것은 장치, 흡인기이며, 이 쟁반에서 성인을 모을 진공 청소기에 연결되어 있습니다. 흡인기의 이 부분은 여기에 연결되어 있고 다른 쪽 끝에 있습니다.

진공에 연결됩니다. 우리는 새장을 집어넣고, 어른들을 이 작은 상자 안에 모을 것입니다. 이것은 모기통 내부에 넣을 긴 튜브가 있는 흡인기의 또 다른 부분입니다.

다른 쪽은 케이지에 연결됩니다. 모든 것이 빡빡하고 진공 청소기가 잘 작동하는지 확인해야 합니다. 우리는 뚜껑을 닫고 모든 것이 단단히 조여졌는지 확인합니다.

백엔드를 천천히 시작합니다. 설정이 준비되면 이 긴 파이프를 모기장 안에 천천히 넣고 모기를 닫고 모기가 느슨해지지 않도록 합니다. 보시다시피 모기들은 작은 우리에 모이고 있습니다.

모든 성인을 모으기 위해 천천히 파이프를 여기저기 가져 가십시오. 이제 거의 끝났습니다. 모든 성체가 모여졌고, 그들은 모두 이 우리에 있습니다.

그런 다음 천천히 진공을 해제하고 수집 장치를 분해합니다. 그래서 이것은 Ana Gambi 성인 모기이며 며칠 동안이 우리에있을 것입니다. 그들은 10%자당에 맞을 것이고, 우리가 알을 낳아야 할 때만 맞도록 피를 받을 것입니다.

방금 모기를 착용하는 방법을 보여줬습니다. Finis mb 모기 실험실 조건에서, 단어의 중요한 단계는 혈액 피팅입니다. 그런 다음 달걀 컵을 놓고 달걀을 따라가고, 그런 다음 유충, PPE 및 성인과 같은 여러 단계를 거칩니다.

그리고 마지막으로, 우리는 성인을 수집합니다. 이 기술의 중요성은 건강한 모기를 가질 수 있도록 자연 조건 밖에 있는 조건을 모방한 다음 플라스모디움으로 감염시키고 말라리아에 대한 다양한 종류의 연구를 수행해야