콜론은 (CASP) 복막염 스텐트 Ascendens - Polymicrobial 복부 패혈증에 대한 표준 모델

이 절차의 전반적인 목적은 마우스의 상행 결장에 스텐트를 삽입하여 복강 내 패혈증을 유발하는 것입니다. 이는 먼저 상행 결장을 준비한 후, 개조된 캐뉼라를 결장에 삽입하고 이를 고정함으로써 수행됩니다.

마지막으로 스텐트를 제거하고 결장을 복강 내로 다시 위치시킵니다. 최종적으로 혈장 내 사이토카인과 박테리아 수를 측정함으로써 패혈증을 확인할 수 있는 결과를 얻을 수 있습니다. 결찰 및 천자(sickle lation and puncture)와 같은 기존 방법과 비교했을 때 이 기술의 주요 장점은 삽입된 스텐트의 크기에 따라 패혈증 정도와 사망률을 조절할 수 있다는 점입니다.

일반적으로 이 방법이 처음인 연구자들은 미세수술 기법에 어느 정도 숙련이 필요하기 때문에 어려움을 겪을 수 있습니다. 완벽하게 수행할 수 있을 때까지 연습하십시오. 먼저 마취제를 복강 내 주사하여 마우스에 마취를 실시하고, 동물을 앙와위로 배치합니다. 수술 중 동물이 안정적인 자세를 유지할 수 있도록 마우스의 발을 테이프로 플레이트에 고정해야 합니다.

본 절차를 위해, 사람의 정맥 주사에 흔히 사용되는 IV 캐뉼라를 조정하여 플라스틱 튜브를 깎아냅니다. 마우스의 복부 피부를 철저히 소독한 후, 끝단에서 원형으로 2 mm 떨어진 지점부터 중앙선을 따라 약 15 mm 정도 절개합니다. 백선(linea alba)을 따라 복근과 복막을 절개하여 복강을 엽니다.

맹장 끝부분을 확인하고 면봉을 사용하여 맹장, 말단 회장 및 상행 결장을 복강 밖으로 조심스럽게 끌어냅니다. 회맹판에서 원위부로 15 millimeters 떨어진 지점에서 7-0 봉합사를 사용하여 상행 결장 벽을 뚫습니다. 두 번의 외과적 매듭을 지어 봉합사를 결장 벽에 고정합니다.

준비된 캐뉼라로 상행결장을 천자합니다. 7-0 봉합사로부터 근위쪽으로 1~2mm 지점을 선택하십시오. 고랑과 플라스틱 튜브가 회맹판과 수평이 될 때까지 캐뉼라를 결장 내부로 조심스럽게 삽입합니다.

7-0 봉합사의 자유단을 캐뉼라 주위로 감고, 플라스틱 튜브의 준비된 홈에 정확하게 두 번 묶은 매듭을 만듭니다. 7-0 봉합사의 바늘을 사용하여 결장의 장간막 반대측 벽을 연속적으로 꿰맵니다. 플라스틱 튜브와 결장 벽을 추가로 고정하기 위해 외과적 매듭을 두 번 실시합니다.

봉합사 끝을 자릅니다. 캐뉼라의 철제 부분을 약간 뒤로 뺀 다음, 고정용 7.0 봉합사와 가까운 지점에서 플라스틱 튜브를 자릅니다. 이제 면봉을 사용하여 맹장에서 결장 스텐트 방향으로 분변을 조심스럽게 밀어내어, 스텐트 상단에 분변의 끝부분이 살짝 보일 때까지 반복합니다.

장을 복강 내로 다시 넣고, 식염수 0.5 milliliters를 복강 내로 투여하여 수액 소생술을 시행합니다. 연속 봉합법으로 복막을 폐쇄합니다. 통증 완화를 위해 단일 봉합법으로 피부를 폐쇄합니다.

필요한 경우 buprenorphine과 같은 강력한 진통제를 피하 투여하고, 먹이와 물이 들어 있는 케이지에 동물을 다시 넣습니다. casp 5시간 후, 마우스의 수술적 처치를 위해 다시 준비하고 마취합니다. 복벽의 봉합사를 제거하여 절개 부위를 엽니다.

스텐트가 삽입된 상행결장을 조심스럽게 끌어내어 스텐트를 고정하고 있는 봉합사를 절단하고 스텐트를 제거합니다. 단일 내번 봉합법으로 결장의 결손 부위를 폐쇄합니다. 장을 복강 내로 다시 넣고 5 mL의 식염수로 두 번 세척합니다.

복막을 연속 봉합으로 폐쇄합니다. 통증 완화를 위해 피부를 단독 봉합으로 폐쇄합니다. 강력한 진통제를 정기적으로 피하 투여합니다.

수술 후 첫 2일 이내에 동물을 충분한 먹이와 물이 제공된 케이지로 다시 옮깁니다. CASP 수술 후 몇 시간 이내부터 6시간마다 동물을 관찰하십시오. 동물들은 초기 패혈증의 임상 징후를 보이며, CASP 수술 후 생존율은 삽입된 스텐트의 직경에 따라 달라집니다. 14 gauge CASP의 경우 사망률은 100%이며, 16 gauge CASP는 70%의 사망률을 보이고, 18 gauge CASP는 50%의 사망률로 이어집니다.

위가(Sham) CASP의 생존율은 100%와 연관됩니다. CASP의 결과는 시간 경과에 따라 달라집니다. CASP 후 스텐트를 제거할 때, CSP 3시간 후에 중재술을 시행하면 생존율은 45%가 됩니다. CSP 5시간 후에 스텐트를 제거하면 실험 동물의 10%만이 생존합니다. 9시간 후에 스텐트를 제거하면 치사율은 100%가 됩니다. 위가(Sham) CASP는 100%의 생존율로 이어집니다.

CSP 24시간 후 복부 부위를 육안으로 관찰하면 복막염, 부종, 혈관 확장, 충혈, 장벽의 명확한 경계가 있는 화농성 반점, 장 마비, 유리 액체 및 패혈성 분비물과 같은 전형적인 징후가 나타납니다. 전신 감염은 CSP 12시간 후 세균학적 분석을 통해 확인할 수 있습니다. 복강 세척액, 혈액, 간, 폐, 비장 및 신장에서 다량의 세균이 검출될 수 있습니다.

CSP로 유도된 패혈증은 전염증성 및 항염증성 사이토카인과 케모카인의 국소적 및 전신적 방출로 나타납니다. CSP 이후 12시간이 지나면 혈액뿐만 아니라 간, 폐, 비장, 신장과 같은 장기 현탁액의 상층액에서 TNF-α, IL-6, IL-10, MCP-1 및 기타 인자들이 ELISA를 통해 상당량 측정될 수 있습니다. 이 기술을 숙달하면 적절히 수행했을 때 10분 이내에 완료할 수 있습니다.

이 영상을 시청하신 후, 여러분은 SSP 모델 및 중재가 포함된 SSP 모델을 사용하여 복강 내 패혈증을 유도하는 방법에 대해 충분히 이해하게 될 것입니다. 이것으로 마치겠습니다. 시청해 주셔서 감사하며, 실험에 좋은 결과가 있기를 바랍니다.