인간 폐 조직에서 박테리아 위치 및 숙주 상호작용 영상

형광 표지된 황색포도상구균 현탁액과 같은 형광 표지균에 감염된 인간 폐포 조직을 가져와 봅시다.

섬유형 공초점 형광 현미경 탐침의 원위 끝을 박테리아 현탁액에 삽입하고 스캔합니다.

밝은 형광 신호는 박테리아 막 표지와 성공적인 탐침 활성화를 확인합니다

프로브가 현탁을 통과할 때 형광을 기록하세요.

과산화수소에 적신 렌즈 클리어 조직을 사용해 프로브를 닦아 잔류 박테리아를 제거하고 배경 형광을 방지합니다

깨끗한 프로브를 조직에 직접 닿게 하고 표면을 스캔하세요.

조직 내에서 콜라겐과 엘라스틴 섬유는 자가형광 기반성으로 나타나며, 형광 표지된 박테리아는 뚜렷한 밝은 점으로 보입니다.

형광이 없는 치포 공간은 어두운 영역으로 나타납니다.

조직에 부착된 박테리아와 느슨하게 결합된 박테리아를 모두 촬영하여 숙주 폐포 조직에서 박테리아 감염을 실시간으로 시각화할 수 있도록 영상을 녹화하세요.

데이터 수집을 시작하려면 화면에서 시작을 클릭하거나 왼쪽 발 페달을 눌러 레이저를 켭니다. 다음으로, 각 박테리아 현탁 샘플을 영상으로 촬영하세요. FCFM 영상 섬유의 원위 끝을 삽입하고 섬유를 천천히 현탁 안으로 이동시켜 샘플을 조사합니다.

오른발 페달을 밟거나 화면 녹화 버튼을 선택하면 광섬유가 샘플 주위를 천천히 움직이면서 어떤 길이의 영상이든 녹화할 수 있습니다. FCFM 영상 섬유의 원위 끝을 8% 과산화수소로 세척하고, 샘플 사이에 렌즈 세척 조직을 사용하세요. 각 폐 조직 샘플을 영상화하기 위해 FCFM 영상 섬유의 원위 끝을 샘플에 삽입하여 섬유 끝과 조직 사이에 직접 접촉이 되도록 합니다.

그 다음 영상 섬유 끝을 부드럽게 움직여 샘플을 조사합니다. 섬유 끝을 조직에서 멀리 들어 올리면 조직이 초점면에서 제거됩니다. 하지만 이 방법은 조직에 부착되지 않은 표지된 박테리아를 이미징하는 데 사용될 수 있습니다.

오른발 페달을 밟거나 화면 녹화 버튼을 선택하면 광섬유가 샘플 주위를 천천히 움직이면서 어떤 길이의 영상이든 녹화할 수 있습니다.