0 조회수 • 3:25 분 • February 2nd, 2026
뚜껑이 달린 영양분 한천을 필터 페이퍼로 덮은 바이알을 준비하세요.
병원성 박테리아를 필터 페이퍼에 현탁액 바르세요.
굶은 초파리 멜라노가스터 파리를 바이알에 넣은 후 뚜껑을 닫습니다. 배양하여 먹이를 허용하고 박테리아 섭취를 보장하세요.
섭취된 박테리아는 장으로 들어가 내강을 덮는 보호막을 뚫고 들어갑니다.
박테리아는 기저 상피에 부착하여 상피 손상과 침범을 촉진하는 독소를 방출하고, 내부 조직에 정착합니다.
파리를 알코올에 담가 표면에 있는 박테리아를 제거한 후, 알코올을 제거하기 위해 세척하세요.
완충제를 추가하고 파리를 균질화하여 내부 박테리아 성분을 방출하세요.
마이크로플레이트에서 균질을 연속적으로 희석합니다. 다음으로, 희석된 양을 영양분 한천에 배판하고 배양하여 군집 형성을 허용합니다.
구강 감염으로 인해 생긴 생존 박테리아 세포의 수를 파악하기 위해 집락을 세세요.
구강 감염 2시간에서 4시간 전, 파리를 음식이 없는 일반 한천 바이알로 옮기세요. 한편, 파리 한 마리마다 감염 바이알을 준비하세요.
먼저, 7밀리리터 샘플 튜브 뚜껑에 표준 설탕 한천 500마이크로리터를 넣고 고체화시킵니다. 다음으로, 용천에 필터 페이퍼 원반을 넣으세요. 그 다음 100마이크로리터의 박테리아 배양물을 필터 디스크에 직접 피펫으로 옮기세요. 대조용으로는 5% 자당 물을 사용하세요.
기아 기간이 끝난 후에는 단발 플라이를 준비된 튜브로 옮깁니다. 파리를 18시간에서 24시간 부화 후 표면 멸균하세요. 70% 에탄올 100마이크로리터가 들어있는 튜브에 사람들을 넣습니다.
20초에서 30초 후에 에탄올을 제거하고 100마이크로리터의 삼중 증류수로 교체합니다. 20초에서 30초 정도 더 기다린 후에는 물을 제거하세요. 그 다음 PBS 100마이크로리터를 추가하고 플라이를 균질화하세요.
균질물을 96웰 플레이트의 상단 줄로 옮기고, 그 아래 모든 웰에 1x PBS 90마이크로리터를 추가합니다. 그 후 10마이크로리터 알리코트를 사용하여 이 샘플을 연속적으로 희석하여 다양한 CFU 값을 구별합니다. 다음으로, 연속 희석액을 LB 영양 한천 플레이트에 5마이크로리터 방울 분량으로 적재합니다.
방울을 판 위에 눈에 띄게 위치시키세요. 그 다음 플레이트를 하룻밤 동안 부양시킵니다. 다음 날, 희석으로 인해 10개에서 60개의 뚜렷한 군집이 생성되는 CFU 수를 계산하세요.