JoVE 실험 백과사전
미생물학
0 조회수 • 2:40 분 • February 2nd, 2026
마취된 성체 모기가 인산염 완충 식염수 또는 PBS 한 방울에 포함된 슬라이드부터 시작하세요.
해부 현미경으로 모기의 다리, 날개, 머리를 제거하세요.
소화관을 손상시키지 않도록 복부 끝을 잘라내세요.
가슴과 복부 끝을 고정한 후 소화관을 부드럽게 당겨 빼내세요.
추출된 소화관에는 소화를 담당하는 중장이 포함되어 있으며, 모기 생리에 영향을 미치는 다양한 장내 세균이 있습니다.
높은 배율에서는 주변 구조물을 조심스럽게 제거하여 중장을 분리하세요.
분리된 중장을 PBS가 포함된 신선한 튜브로 옮깁니다.
중장을 균질화하여 박테리아를 PBS로 방출합니다.
희석된 호모제네이트를 영양분 한천 플레이트에 바릅니다.
배양판을 배양하여 모기 중장의 미생물 군집을 나타내는 박테리아 군락이 성장할 수 있도록 합니다.
모기를 PBS 한 방울이 포함된 멸균 유리 슬라이드에 따로 해부하세요. 모기의 다리, 날개, 머리를 겸자로 조심스럽게 제거하세요.
모기의 가슴과 복부 마지막 부분을 겸자로 집고, 소화관을 분리하기 위해 분리하세요.
겸자를 사용해 소화관에서 작물과 말피기관을 제거하세요. 작물은 설탕물을 섭취한 후 중장 앞쪽에 위치하며, 돌출부가 있습니다. 말피기관 그룹은 중장과 후장 교차부에 있는 가느다란 배설관 그룹입니다.
해부한 중장을 200마이크로리터 멸균 PBS 완충제가 있는 EP 튜브에 넣고, 초청정 작업대에서 멸균 분쇄 공으로 갈아줍니다. 호모제네이트를 10배 희석 3회로 연속 희석하여 각 희석액을 50마이크로리터 LB 한천 플레이트와 스프레드 플레이트에 투여합니다.
플레이트를 37도에서 1일에서 이틀 정도 배양하여 단일 군집이 보일 때까지 보관하세요.