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Encyclopedia of Experiments Microbiology
Establishing a Defined Gut Bacterial Population in Adult Mosquitoes

성체 모기에서 정의된 장내 세균 집단 확립

Protocol
89 Views
03:27 min
December 11, 2025
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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Transcript

성체 모기가 담긴 종이컵을 거즈로 밀봉해 도망가지 못하게 하세요.

항생제가 함유된 자당 용액에 적신 솜뭉치를 거즈 위에 놓고, 습도를 유지하기 위해 페트리 접시로 덮으세요.

모기가 먹이를 먹으면서 항생제를 섭취하여 내인성 장내 미생물군을 제거합니다.

면화를 제거하고 모기 장에 남아 있는 항생제를 제거하기 위해 기아 기간을 시작하세요.

자당 용액에 박테리아가 부유된 튜브를 복용하고, 식욕자극제를 보충하여 먹이를 자극하세요.

밀폐된 급식 장치를 가져와 박테리아 현탁액을 채운 뒤 고정하세요.

장치를 예열된 먹이 장치에 연결하고, 미리 굶겨둔 모기가 담긴 컵 위에 올려놓으세요.

모기가 먹이를 먹으면서 박테리아가 장으로 이동해 정착하여 뚜렷한 박테리아 집단을 형성합니다.

이 박테리아 개체군을 운반하는 먹이 모기는 숙주-병원체 상호작용 연구를 수행할 준비가 되어 있습니다.

멸균된 면봉을 항생제가 포함된 자당 용액에 넣어 모기가 들어있는 종이컵 위에 올려놓으세요.

물이 증발하지 않도록 면봉을 10cm 크기의 페트리 접시로 덮으세요. 솜뭉치는 하루에 두 번 교체하고 모기에게 3일 연속으로 먹이를 주세요. 박테리아 용액을 준비하세요. 자외선 가시광광도계에서 박테리아 용액을 측정하세요. EP 튜브에 OD 박테리아 현탁액 하나를 추가하세요.

서스펜션을 5,000 RCF에서 4도에서 5분간 원심분리하세요.

상원액은 버리세요. 박테리아 펠릿을 멸균된 PBS 완충제로 세 번 세척하세요. 박테리아 펠릿을 200마이크로리터 멸균 PBS 완충액으로 재현탁하세요. 600마이크로리터 10% 자당 용액, 200마이크로리터 ATP, 200마이크로리터 박테리아 현탁액을 새 EP 튜브에 넣고 잘 섞으세요. 준비된 박테리아 용액을 최대 부피로 천천히 먹이통에 넣습니다.

기포가 한 방향에서 떨어지는 것을 막기 위해 급식 유닛을 밀봉했습니다. 전원 공급 장치를 연결하세요. 기온이 37도에 도달할 때까지 기다려. 박테리아 용액이 포함된 피더 유닛을 피더에 설치하세요. 박테리아에게 먹이를 주기 전에 모기를 24시간 동안 멈춰 항생제를 대사해야 합니다. 모기가 있는 종이컵 위에 먹이 유닛을 올려놓고 90분간 먹이를 줍니다. 완전히 부풀어 오른 모기를 추가 연구를 위해 선별할 수 있습니다.

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