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미생물학
0 조회수 • 2:29 분 • February 2nd, 2026
먼저 형광 표지된 대식세포를 발현하는 형질전환 제브라피시 배아를 저융 아가로스에 영상 접시에 장착하는 것으로 시작합니다.
이 배아들은 근육 내 미세주사를 통해 형광 표지된 Mycobacterium marinum 에 감염되어 국소 면역 반응을 시작합니다.
마취제가 포함된 배아 배지를 덮어 마취를 유지하고, 색소침착을 억제하는 화학적 억제제를 넣어 영상 촬영을 위한 시각적 선명도를 보장합니다.
접시를 고해상도 공초점 현미경의 환경 챔버에 넣으세요.
밝은 필드 조명을 이용해 감염 부위를 찾아보세요.
형광 레이저 채널을 활성화하고, Z-스택 시작 및 종료 위치를 설정하며, 타임랩스 영상을 시작하세요.
형광 박테리아로 가득 찬 감염된 대식세포가 둥글고 움직이지 않는 모습을 시각화하세요.
이는 세포골격 붕괴와 용해세포 사사의 시작을 나타냅니다.
시간이 지남에 따라 대식세포는 부풀어 오르고 파열되어 세포질 내용물과 내부 박테리아를 주변 조직으로 방출하는데, 이는 염증성 용해세포 사멸의 특징입니다.
아가로스가 완전히 굳으면 계란 물로 덮으세요. 환경 챔버를 설치한 후, 35밀리미터 유리바닥 접시와 제브라피시를 환경 챔버에 넣습니다. 405 다이오드, 20% 출력의 아르곤, 그리고 DPSS 561 나노미터 레이저를 열어주세요. 스펙트럼 설정에 적절한 레이저 출력을 설정하세요.
"XYZ"의 "순차 스캔" 획득 모드를 선택하고 이미지 포맷을 "512 x 512 픽셀"로 설정하세요. "라이브 데이터 모드"로 전환하고, 첫 번째 제브라피시의 위치를 조준하며, Z 위치를 "시작"과 "끝"을 표시하세요. 이 과정을 남은 배아마다 반복합니다. 프로그램 끝에 "일시정지"를 추가하세요. 프로그램의 루프와 사이클을 정의하고 파일을 저장하세요.