마이코박테리움 abscessus에 감염된 제브라피시 배아에서 숙주-병원체 상호작용의 라이브 이미징

마취되고 투명한 형질전환 제브라피시 배아가 형광 표지된 대식세포를 발현하는 것부터 시작하세요.

배아는 형광 표지된 Mycobacterium abscessus rough 균주를 꼬리 근육에 미리 주입하여 국소 감염을 유도합니다.

이 박테리아들 내에 표면 글리코펩티돌지피드가 없기 때문에 이들의 집합이 촉진됩니다.

배아를 저융점 아가로스에 고정시키고 감염 부위를 노출하도록 방향을 조정합니다.

아가로스가 굳어지면, 마취를 유지하고 탈수를 방지하기 위해 마취제가 포함된 생선 물을 추가하세요.

형광 현미경을 통해 실시간으로 감염 상태를 모니터링하세요.

감염 후 내인성 대식세포는 박테리아 쪽으로 이동하여 개별 세포를 식합니다.

하지만 일부 박테리아는 끈(cord)을 형성하는데, 이는 복제, 확산, 식세포작용을 저항하여 숙주 세포 사멸과 면역 침투를 일으킵니다.

그럼에도 불구하고 면역 세포는 성대를 제거하지 못해 박테리아와 죽은 숙주 세포가 축적되어 농양을 형성합니다.

이것은 코드가 핵심 M임을 드러냅니다. 농양 면역 회피 전략.

M. abscessus 감염의 생체 영상을 위해서는 1% 저녹는점 아가로스에 설치된 마취된 배아를 35mm 유리 바닥 페트리 접시(역현미경용) 또는 단일 공동식 압력 슬라이드(직립 공초점 현미경용)로 촬영합니다. 배아를 원하는 위치로 배치하고, 굳어진 아가로스를 트리카인이 들어간 어류 물로 덮습니다. 마지막으로, 10배 대물렌즈가 장착된 형광 현미경 또는 40배 또는 63배 대물렌즈를 가진 형광 공초점 현미경을 사용하여 순차적으로 형광 획득과 배아의 투과 영상을 수행하세요.