생존 분석법을 이용한 C. elegans에어로모나스 병태 모델링

0 조회수2:19 • February 2nd, 2026

영양분이 풍부한 배지에서 배양하는 박테리아 병원체인 에어로모나스 균주를 배양하는 것부터 시작하세요.

배양액의 광학 밀도를 측정하고 균열 감염 부중을 유지하기 위해 박테리아 농도를 조절하세요.

배양물을 선충 성장 배지(NGM 한천)에 판팅하여 균일한 박테리아층을 형성하도록 배양합니다.

발달 동기화된 C. elegans 유충을 준비하는데, 이는 농축된 배지에서 유지되는 박테리아 식성 선충입니다.

유충을 박테리아층으로 옮기고 배양하여 에어로모나스 를 경구 섭취하고 장 내 정착을 가능하게 합니다.

숙주 내부에서 박테리아는 증식하여 장내 상피 세포를 손상시키는 세포독소를 방출하고, 이를 통해 사망을 초래합니다.

살아남은 선충을 신선한 박테리아 플레이트에 옮기고, 마지막 벌레가 죽을 때까지 매일 살아있는 선충, 죽은 벌레, 반응하지 않는 벌레의 수를 세어보세요.

마지막으로, 숙주의 생존 가능성을 평가하기 위한 생존 곡선을 생성하세요.

먼저, 네 가지 에어로모나 스 균주 각각의 단일 집단을 선택하여 텍스트 프로토콜에 따라 배양합니다. 그 다음 박테리아 육수의 OD600 흡광도를 측정하고 흡수도가 2.0이 될 때까지 조절합니다.

다음으로 각 균주에서 30마이크로리터의 박테리아 육수를 NGM 플레이트에 뿌리세요.

미리 준비된 L4 벌레를 무작위로 선택하여 Aeromonas 균주가 있는 NGM 판으로 옮깁니다. 그 후 분석이 완료될 때까지 20도 섭씨에서 배양판을 배양합니다.

매일 모든 살아있는 벌레를 박테리아가 있는 새로운 NGM 플레이트로 옮깁니다. 매일 살아있는 벌레, 죽은 벌레, 센서벌레의 수를 세어 마지막 벌레가 죽을 때까지 반복하세요.