컬리 섬유 매개 박테리아 하이드로겔 패턴의 안정화

3D 프린팅된 알지네이트 매트릭스가 들어 있는 두 개의 접시를 가져가자, 각각 대조군 또는 시험용 박테리아 균주를 캡슐화합니다.

두 균주 모두 시각화를 위해 형광 단백질을 지속적으로 발현합니다. 이 시험 균주는 또한 컬리 섬유라고 불리는 단백질성 세포외 섬유를 생성하는 유도 유전자를 포함하고 있습니다.

패턴은 칼슘과 람노스를 보완한 단단한 배지에 인쇄합니다.

알지네이트와 칼슘 이온이 교합하여 하이드로겔을 형성하도록 인큐베이팅하세요.

시험 균주에서 람노스는 컬리 소단위체의 생성을 유도하며, 이 소단위체는 세포 표면에서 섬유로 자기 조립됩니다.

형광 스캐너를 사용해 패턴을 촬영하세요.

칼슘 킬레이팅 용액으로 처리하고 흔들면서 배양하여 칼슘 이온을 격리시키는데, 이는 알지네이트 가교결합을 방해하고 하이드로겔을 용해시킵니다.

해답을 버리고 패턴을 다시 이미지화하세요.

처리로 인해 대조 패턴은 녹았지만, 컬리 섬유의 안정화 네트워크 덕분에 테스트 패턴은 유지되었습니다.

인쇄된 샘플을 상온에서 3일에서 6일간 배양하여 컬리 섬유와 같은 바이오필름 성분을 생산할 수 있도록 하세요.

그 다음 플레이트를 형광 스캐너에 올려놓고 플레이트를 촬영합니다.

알지네이트 매트릭스를 용해시키기 위해, pH 7의 0.5몰 시트레이트 용액 20밀리리터를 인쇄된 기판에 첨가하고, 30rpm으로 진동시키며 실온에서 2시간 배양합니다.

그 후 액체를 버리고 다시 플레이트를 촬영하여 시트레이트 처리 전후의 플레이트 이미지와 비교합니다.