박테리아 외계다당류 분해를 평가하기 위한 얇은 층 크로마토그래피 수행

0 조회수2:23 • March 31st, 2026

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먼저 분해된 외다당류(EPS)를 포함한 발효 상청액부터 시작하세요.

이 EPS는 발효 과정에서 얻어지며, 각 상청액 내 뚜렷한 배설 세균 집단이 EPS에 다르게 작용합니다.

극성 고정상으로 미리 코팅된 얇은 층 크로마토그래피 플레이트의 바닥 근처에서 상청액을 발견하세요.

판을 자연 건조시킨 후, 고정상보다 극성이 낮은 이동상이 있는 챔버에 넣습니다.

이동상이 상승함에 따라 EPS는 극성과 크기에 따라 이동합니다.

크고 열화되지 않은 EPS는 고정 상과 강하게 상호작용하며 원점 근처에 머문다.

작고 분해된 조각들은 약하게 결합하여 이동상과 함께 위쪽으로 이동합니다.

접시를 떼어내고 자연 건조시키세요.

플레이트를 EPS와 반응하는 탄수화물 염색 시약에 담가세요.

플레이트를 자연 건조시킨 후 가열해서 EPS를 탈수시키고 색 띠를 만듭니다.

원점 근처의 단일 밴드는 EPS가 분해되지 않음을 확인하고, 여러 밴드는 박테리아에 의한 EPS 분해를 확인한다.

각 미리 코팅된 실리카겔 알루미늄 플레이트 60 TLC 위에 0.2마이크로리터의 발효 상청액을 주입하고 돌려 펴집니다. 그 다음 뜨거운 공기를 이용한 헤어드라이어로 말리세요.

샘플링한 플레이트의 한쪽 끝을 20밀리리터의 개상산:n-부탄올:물 용액에 몇 분간 담가 있다가, 전기영동이 거의 반대쪽 끝까지 확장될 때까지 유지합니다. 그 다음 겸자로 플레이트를 빼고 헤어드라이어로 말리세요. 그 후 플레이트를 오르시놀 시약에 2분간 담가 염색 후 다시 건조시킵니다.

접시를 120도 오븐에 옮겨 3분간 가열합니다. 그 후 TLC 밴드를 측정하여 EPS 열화를 평가하기 위해 플레이트 사진을 찍으세요.

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마지막 업데이트: 22 8월 2026