0 조회수 • 2:46 분 • February 26th, 2026
먼저 체외다당류의 시험관 발효 중 인간 장내 미생물에서 생성되는 상정액부터 시작한다. 상정액에는 탈양성자 단쇄 지방산(SCFA)과 기타 대사산물이 포함되어 있습니다.
메타포스포릭산을 넣어 상원액의 pH를 낮추고, 와류를 섞어 완전히 섞으세요. 이 과정은 SCFA를 가스 크로마토그래피 분석에 적합한 양성자 형태로 전환시킵니다.
원심분리기를 이용해 이물질을 분리하고 SCFA와 기타 대사산물이 포함된 상청액을 수집합니다.
상정액을 여과하여 잔여 이물질을 제거하고 크로마토그래피 간섭을 피하세요.
고성능 가스 크로마토그래피 시스템에서는 상원액을 가열된 입구에 주입하여 기화시킵니다. 그 다음 증기를 불활성 가스와 혼합하여 극성 고정상 컬럼을 통과시켜 분리합니다.
SCFA는 컬럼의 정지상과 상호작용하여 휘발성에 따라 분리되며, 짧은 사슬산이 더 긴 산보다 먼저 용출됩니다.
내부 표준과 결과를 비교하여 다양한 SCFA의 농도를 파악하세요. 이는 장과 유사한 조건에서 외계다당류가 미생물에 의해 분해되는 것을 반영합니다
EPS가 SCFA 생성에 미치는 영향을 연구하기 위해, 발효된 상원액 1밀리리터를 2밀리리터 원심분리관에 첨가하고, 각 샘플에 25 중량/부피 비율의 메타인산을 0.2밀리리터 첨가합니다. 용액을 완전히 섞기 위해 소용돌이를 사용하세요. 혼합물을 13,000g 원심분리기로 20분간 가열 합니다.
그동안 120밀리몰라 아세트, 프로피온, 부티르, 이소부티릭, 발레릭, 이소발레릭산 용액을 튜브에 준비하세요. 그 다음 각각 1밀리리터씩 각각 1밀리리터씩 25 중량/부피 메타포스포릭산 1.2밀리리터 튜브에 첨가한 뒤, 표준 칵테일로 가스 크로마토그래피 장비의 샘플 병에 담습니다.
원심분리기에서 튜브를 꺼내고, 상원액을 새 튜브로 옮기세요. 0.22마이크론 필터가 장착된 주사기를 사용해 상청액을 새로운 튜브로 걸러내어 가스 크로마토그래피 분석에 사용하세요.