0 조회수 • 3:21 분 • February 26th, 2026
포식성 박테리아인 Bdellovibrio bacteriovorus와 그 먹이 인 E. coli가 함께 배양된 페트리 접시를 아가로스 패드 아래에 두는 것부터 시작하세요.
아가로스 패드는 대장균 을 움직이지 못하게 하는 반면, B. 박테리오보루스 는 운동성을 유지하며 먹이 세포를 적극적으로 침투합니다.
포식자는 DNA 중합효소 소단위체에 융합된 붉은 세포질 표지와 녹색 형광 태그를 발현하여 시각화합니다.
접시를 홀더에 고정한 후 접시 바닥과 현미경 대물렌즈에 침수 오일을 바르면 최적의 해상도를 얻을 수 있습니다.
홀더를 현미경에 장착하고 이중 채널 형광 검출용으로 설정하세요.
밝은 영역 광학을 사용해 초점면을 찾고 겹치지 않는 여러 영상 필드를 선택하세요.
타임랩스 파라미터를 설정하여 명시계와 형광 이미지를 정해진 간격으로 순차적으로 캡처합니다.
이 방법은 먹이 부착과 침입에서 시작하여 먹이 세포 변형, 섬유 성장, 격화, 자손 형성, 그리고 먹이 세포 해체로 끝나는 포식을 관찰할 수 있게 합니다.
공산화의 타임랩스 플로레센스 현미경 촬영을 위해, 접시를 페트리 접시 홀더에 넣어 실험 중 접시가 움직이지 않도록 하고, 역현미경 대물경에는 침수 오일 한 방울, 접시 바닥에 한 방울을 떨어뜨립니다. 홀더를 역현미경 챔버 내 현미경 스테이지에 장착하고, 현미경 소프트웨어에서 배율을 100배, 다색 렌즈를 GFP와 mCherry로 설정하세요. Brightfield에서 아이피스를 사용해 초점면을 찾아 포인트리스트 매니저를 엽니다.
스테이지를 이동시키고 Mark Points 버튼을 사용해 관심 있는 위치 최소 10곳의 좌표를 저장하세요. 카메라 밸브를 아이피스에서 모니터로 바꿔보세요. 초점면을 설정하고 포인트리스트 매니저에서 포인트 교체 버튼을 클릭하여 각 포인트를 보정하세요.
실험 설계자를 열고 질병 쌓기 상자의 표시를 해제하세요. 적절한 형광 채널과 최적의 조명 설정을 선택하고, 이미지 획득과 실험 전체 시간 사이의 간격을 설정하세요. 선택한 위치에 초점 유지를 활성화하고, 이미지 파일이 자동으로 저장될 데이터 폴더를 선택하세요.
현미경 소프트웨어 제어의 모든 설정을 다시 확인하고 타임랩스 실험을 시작하세요. 실험 첫 한 시간이 지나면 모든 스테이지 위치가 여전히 초점이 맞는지 확인하세요. 타임랩스 실험이 끝나면 페트리 접시를 제거하고 35밀리미터 접시와 아가로스 패드를 함께 폐기하세요.