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미생물학
0 조회수 • 2:51 분 • March 31st, 2026
쥐의 요로 감염과 관련된 혐기성 박테리아인 G. vaginalis의 항생제 내성 균주를 살펴보세요.
초기 방광 감염 시, 요로병원성 대장균 은 방광 상피 세포 내에 휴면 저장소를 형성합니다.
이후 G. vaginalis 에 노출되면 표면 세포의 독소 매개 탈락이 촉진되어 휴면 상태였던 UPEC가 다시 나타나 재발성 요로감염을 유발합니다.
G. vaginalis 접종을 준비할 때, 항생제 없이 육수를 영양 한천 플레이트에 줄무늬 줄로 붙여 박테리아 회복을 돕습니다.
무산소 배화하여 활발히 성장하는 군집을 얻습니다.
조밀한 군집을 한 루프 한 묶음 한 줄을 항생제 없는 영양 육수에 옮기세요.
원하는 박테리아 농도에 도달할 때까지 혐기성 조건에서 정적으로 배양합니다.
광학 밀도를 측정하여 농도를 추정하세요.
현탁액을 튜브로 옮기고, 원심분리기로 박테리아를 제거한 뒤 상정액을 버리고 버퍼에 재현탁하세요.
연속 희석액을 준비하여 항생제 함유 배지를 도판하여 G. vaginalis 의 선택적 성장과 오염을 방지합니다. 접종 농도를 파악하기 위해 군집을 개수하세요.
G 음을 순환시키는 것부터 시작하세요. 질 염좌 는 영하 80도(섭씨) 냉동고에서 혐기성 냉동실로 옮겨집니다. 항생제 없이 박테리아를 NYCIII 플레이트에 줄로 찍어보세요. 플레이트를 37도 섭씨에서 혐기적으로 24시간 배양합니다.
혐기성 챔버에서 혐기성 NYCIII 배지를 5밀리리터 접종하고, NYCIII 플레이트에서 1마이크로리터 크기의 세포 루프를 넣고, 37도 환경에서 18시간 동안 정적으로 배양합니다. 배지에 항생제를 포함하지 마세요. 분광광도계를 사용해 배양물의 OD600 을 측정합니다.
그 후 9,600g에서 1분간 원심분리한 후 배지를 흡입하세요. 박테리아 펠릿을 PBS에 원하는 농도로 재현탁한 후 접종물을 연속적으로 희석하고 도판합니다.