제브라피시 모델을 이용한 마이코박테리아 감염에서 숙주 면역의 역할 평가

JoVE Encyclopedia of Experiments

미생물학

0 조회수 • 2:54 분 • February 26th, 2026

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마취된 야생형 제브라피시와 림프구가 없는 면역 저하 제브라피시를 예로 들어보겠습니다.

각 물고기를 젖은 스펀지에 새긴 틈에 배를 위로 올려 놓아 생존 가능성을 유지하세요.

복강에 마이코박테리움 마리눔 을 주입하여 인간 결핵을 모델링하는 전신 감염을 확립합니다.

주입 후에는 물고기를 신선한 물로 옮겨 회복시키고 상태를 관찰하세요.

야생형 어류에서는 염증 반응이 박테리아, 감염된 대식세포, 림프구로 구성된 육아종을 형성합니다. 육아종에는 박테리아가 포함되어 있어 전파를 막습니다.

림프구는 대식세포의 항균 기능을 강화하는 사이토카인을 분비하여 박테리아 사멸을 가능하게 합니다.

면역력이 약한 어류에서는 육아종에 림프구가 부족합니다. 그 결과 대식세포는 부분적으로 활성화되어 박테리아가 생존하고 복제하며 확산할 수 있게 하여 어류 사망을 초래합니다.

생존 그래프를 생성하세요. 면역력이 저하된 어류의 높은 사망률은 림프구가 감염 조절에 중요한 역할을 한다는 점을 강조합니다.

먼저, 희석된 박테리아 용액 5마이크로리터 방울을 파라핀 필름 조각에 피펫 흡입합니다. 그 후 방울을 30게이지 인슐린 바늘로 당겨 넣습니다.

이 실험에는 5개월에서 8개월 된 물고기를 사용하세요. 한 마리는 야생형, 다른 한 마리는 래그 돌연변이 물고기입니다. 이 물고기들을 젖은 폼 플라스틱의 틈에 배를 위로 올려놓으세요. 인슐린 바늘을 골반지느러미 사이에 45도 각도로 주입하세요.

바늘 구멍을 위로 유지하여 전체 입구가 복강 안에 있는지 확인하세요. 그 다음, 천천히 박테리아 용액을 주입하세요. 그 후 바늘을 조심스럽게 제거하고 즉시 신선한 수조 물이 채워진 회수 어항으로 옮기세요.

사용 중인 박테리아 알리코트에서 15분마다 7H10 플레이트에 샘플을 채취하세요. 이 샘플들을 29도 섭씨에서 5일간 배양하여 감염 용량을 확인하세요. 물고기의 건강을 정기적으로 점검하며, 감염 증상이 있는 물고기는 3-아미노벤조산 에틸 에스터 0.02% 이상의 물에 품종시켜 안락사시키세요.

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마지막 업데이트: 22 8월 2026